Home » Методические указания

Методические указания

June 14, 2024

Методические указания для студентов

медицинского факультета к практическим занятиям

по микробиологии, вирусологии и иммунологии

ЗАНЯТИЕ № 9 (6 часов)

Темы: 1. Морфология и ультраструктура вирусов.

2. Индикация вирусной репродукции.

3. Серологические реакции в вирусологии.

Цель: Научиться трактовать морфологию и ультраструктуру вирусов, анализировать особенности взаимодействия вирусов с живыми системами, оценивать результаты размножения вирусов в живых системах и методы культивирования вирусов в лабораторных условиях.

Профессиональная ориентация студентов: Умение анализировать биологические свойства патогенных для людей вирусов, обнаруживать вирусную репродукцию, трактовать методы диагностики вирусных инфекций, делать выводы за результатами исследований, объяснять роль вирусов в патологии человека необходимые будущему специалисту-медику для использования в практической деятельности.

Выполнение практической работы: 9.00-12.00

І. Морфология и ультраструктура вирусов. Культивирование вирусов в курином эмбрионе и организме лабораторных животных.

Работа 1. Выучить морфологию вирионов по микрофотографиям, слайдам, рисункам.

Протоколы к практическим занятиям (ч. I)

Работа 2. Заражение куриных эмбрионов в алантоисну полость.

Протоколы к практическим занятиям (ч. I)

ІІ. Клеточные культуры в вирусологии. Культивирование вирусов в клеточных культурах. Индикация в клеточных культурах.

Работа 3. Заражение культур клеток вирусовмисним материалом.

Протоколы к практическим занятиям (ч. I)

Работа 4. Ознакомиться с микропрепаратами культур тканей, которые пораженно вирусами. Оценить наличие ЦПД.

Протоколы к практическим занятиям (ч. I)

Работа 5. Рассечение зараженного куриного эмбриона, взятия алантоисной жидкости

Работа 6. Постановка РГА для серологичной идентификации вируса гриппа

ІІІ Серологические реакции, которые используются в вирусологии.

Работа 7. Поставить РГГА для серологичной идентификации вируса гриппа

Работа 8. Поставить РГГА для серологичной диагностики гриппа с парными сыворотками

Работа 9. Поставить реакцию нейтрализации (РН) с парными сыворотками для серологичной диагностики полиомиелита

Работа 10. Ознакомиться и провести учет результатов РЗК для серологичной диагностики кори

Работа 11. Ознакомиться с демонстрационным ИФА для диагностики Спида

Перерыв: 12.00-12.30

1. Программа самоподготовки студентов

I Морфология и ультраструктура вирусов. Культивирование вирусов в курином эмбрионе и организме лабораторных животных.

1. Классификация, строение, ультраструктура и химический состав вирусов.

а – основные принципы, положенные в основу классификации вирусов, навести современную классификацию;

б – строение вирионов, их размеры, понятия о простых и сложных вирусах;

в – типы симметрии вирусов, форма вирусов;

г – химический состав вирусов.

2. Основные методы культивирования вирусов:

а – заражение лабораторных животных;

б – заражение куриных эмбрионов;

ІІ Клеточные культуры в вирусологии. Культивирование вирусов в клеточных культурах. Индикация в клеточных культурах.

3. Основные методы культивирования вирусов:

а – классификация культур тканей;

б – методы заражения культур тканей;

в – цитопатичный эффект.

4. Типы взаимодействия вируса и чувствительной клетки.

5. Репродукция вирусов.

а – фазы взаимодействия вируса и чувствительной клетки;

б – особенности репродукции вирусов разных классов нуклеиновых кислот.

6. Методы индикации вирусов:

а – реакция геммагглютинации (компоненты, механизм, учет);

а – реакция геммадсорбции (компоненты, механизм, учет);

в – “цветная проба” (компоненты, механизм, учет);

г – ЦПД

7. Роль вирусов в эволюции.

ІІІ Серологические реакции, которые используются в вирусологии.

8. Реакция торможения геммагглютинации. Компоненты и механизм реакции.

а – методика постановки и учет результатов;

б – практическое использование.

9. Реакция торможения геммадсорбции. Компоненты и механизм реакции и учет результатов.

10. Реакция нейтрализации. Разновидности реакции в зависимости от биологической модели репродукции вирусов.

а – компоненты и механизм реакции и учет результатов;

б – практическое использование.

11. Реакция непрямой геммагглютинации (РНГА) и обратной непрямой геммагглютинации (РОНГА).

12. Реакция связывания комплемента (РСК). Особенности постановки при диагностике вирусных инфекций.

13. Иммуноферментний (ИФА), иммунофлюоресцентный (РИФ) методы диагностики вирусных инфекций.

14. Иммуноблотинг. Цепная полимеразная реакция.

Семинарское обсуждение теоретических вопросов : 12.30-14.00

Перерыв: 14.00-14.15

Самостоятельная работа студентов: 14.15-15.00

Решение ситуационных задач по каждой теме, разбор заданий тестового лицензионного экзамена «Крок», оценивание студентов, которые не сдали накануне тестовый контроль по системе «Moodle», отработка и прием практических навыков (матрикулы).

Тестовые задания и ситуационные задачи.

1. Что такое вирион?

А – вирус, который проник в клетку

В – вирус, который репродуцируется в клетке

Е – зрелый вирус вне клетки

D – вирусный геном в состоянии интеграции с геномом клетки

C – вирус в курином эмбрионе.

2. В основу классификации вирусов положены:

А – тип нуклеиновой кислоты

В – тип симметрии

С – молекулярная масса

D – хозяин

Е – все названы признаки.

3. Дегенеративные изменения в культуре клеток при действии вирусов имеют общее название:

А – цитотоксичное действие

В – цитопатичное действие

С – некротоксичное действие

D – гистотоксичное действие

Е – гемолитическое действие

4. Для индикации вирусов в исследуемом материале используют реакцию:

А – гемолиза

В – кольцепреципитации

С – латексагглютинации

D – геммагглютинации

Е – коагглютинации.

5. Для серологичной диагностики гриппа использовали РГГА. С этой целью от больного взяли …, после последовательных … в каждую пробирку внесли … . Через 30 мин. В каждую пробирку прибавили … . Реакция считалась достоверной, если … .

6. Для идентификации неизвестного вируса поставили реакцию нейтрализации по типа цветной пробы. За какими критериями определить позитивный результат?

А – по наличию цитопатичного эффекта

В – по наличию гемолиза эритроцитов

С – по наличию жидкости розового цвета в опытных пробирках

D – по наличию жидкости желтого цвета в опытных пробирках

Е – по наличию осадка эритроцитов на дне пробирки.

Исходный уровень знаний и умений

Студент должен знать:

1. Морфологию и ультраструктуру вирусов

2. Методы культивирования вирусов

3. Методы индикации вирусов

4. Особенности репродукции вирусных геномов

5. серологические реакции, которые используются при диагностике вирусных инфекций.

Студент должен уметь:

1. Проводить заражения куриных эмбрионов и культур тканей вируссодержащим материалом.

2. Поставить и проанализировать:

а – реакцию геммагглютинации

б – реакцию торможения геммагглютинации

в – реакцию нейтрализации по типу “цветной пробы”.

3. Объяснить механизм современных реакций, которые используются в вирусологии: РИФ, ИФА, РИА, иммуноблотинг, ЦПР.

Правильные ответы на тесты и ситуационные задачи:

1 – Е; 2 – Е; 3 – С; 4 – D; 5 – парные сыворотки, разведений, вирусный диагностикум, 1% куриные эритроциты, отсутствие геммагглютинации, осадок в виде “монетки”, титр антител во второй сыворотке растет минимум в 4 разы; 6 – D.

4. Источники информации:

А – Основные:

Материалы подготовки 09

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник/Под ред.. А. А. Воробьев– М.: Медицинское информционное агентство, 2004. – С.46-49

2. Коротяев А. И., Бабичев С.М. Медицинская микробиология, иммунология и вірусологія: учебник для мед. вузов.– СПб.: СпецЛит, 2008. – С. 297-325.,

А. А. Воробьев Медицинская и санитарная микробиология. Учебное пособие для студентов высших медицинских учебных заведений./ А. А. Воробьев. Ю.С Кривошеин, В. П.Широбоков. –М:Издательский центр « Академия». – 2003. С. 259-279.

1. Пяткін К Д., Кривошеїн Ю.С. «Мікробіологія», Київ.: «Вища школа», 1992, С. 69-71, 183;

2. Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С.Широбоков В.П. «Практична мікробіологія», Тернопіль.: «Укрмедкнига», 2004, С. 321-335;

3. Ситник І.О., Климнюк С.І., Творко М.С. «Мікробіологія, вірусологія, імунологія», Тернопіль.: «Укрмедкнига», 1998, С. 82-90, 208-221

4. Протоколи до практичних занять (ч. І)

В – Дополнительные:

1. «Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии и лабораторной диагностике инфекционных болезней» под ред. Ю.С. Кривошеина, Киев:. «Высшая школа», 1986, С. 54-63, 191-221.