СПИРОХЕТЫ

Спирохеты. Микробиологическая диагностика спирохетозов.

Риккетсии, хламидии, микоплазмы. Микробиологическая диагностика риккетсиозов, хламидиозов, микоплазмозов.

 

Патогенные для человека спирохеты являются представителями трех родов семейства Spirochaetaceae: Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, возбудитель фрамбезии – Т. pallidum subsp. tenue, возбудитель пинты – Т. carateum); Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, возбудители клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.) и рода Leptospira семейства Leptospiraceae (возбудитель лептоспироза – L. interrogans).

Спирохеты имеют штопорообразную извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими морфологическими и физиологическими признаками.

Спирохеты представляют собой тонкие спирально извитые нити, изогнутые вокруг центральной оси. Клетки спирохет представляют собой цитоплазматические цилиндры, отграниченные цитоплазматической мембраной (ЦМ) от тонкой и эластичной клеточной стенки. Между ЦМ и цитоплазматическим цилиндром расположены фибриллы, которые, как и жгутики бактерий, состоят из белка флагеллина. У трепонем и боррелий имеется два пучка фибрилл, прикрепленных к дисковидным образованиям – блефаропластам. Фибриллы обеспечивают разные типы движения спирохет: поступательное, вращательное и сгибательное.

 

отребностей клетки.

Рис. Структура спирохет

Клетка спирохеты в продольном (А) и поперечном (Б) разрезе. На рис. А изображена клетка, содержащая по одной аксиальной фибрилле у каждого конца; на рис. Б — поперечный разрез, прошедший через среднюю часть клетки, где показаны два пересекающихся пучка, состоящих из множества аксиальных фибрилл: 1 —протоплазматический цилиндр; 2 —наружный чехол; 3 — аксиальные фибриллы;4 — место прикрепления аксиальных фибрилл; 5 — пептидогликановый слой клеточной стенки; 6 — ЦПМ

Таблица

Классификация: представители отдельных родов различаются по длине и толщине, числу и характеру завитков.

 

Все спирохеты – грамотрицательные микроорганизмы. Различные виды – анаэробы, факультативные анаэробы и аэробы. Большая часть спирохет – свободно живущие микроорганизмы, обитают как сапрофиты и в организме человека. Патогенными для людей являются немногие.

Определить родовую принадлежность спирохет в готовом мазке, окрашенном по Романовскому-Гимзе, используя данные, приведенные в табл.

 

 

Морфологию спирохет изучают в препаратах «раздавленная» капля и в мазках, окрашенных по Романовскому – Гимзе. Нативные препараты микроскопируют в темном поле или с помощью фазово-контрастного микроскопа, наблюдая за активным и характерным движением спирохет и особенностями их формы.

Приготовление мазков из крови. На чистое обезжиренное стекло ближе к одному из его концов помещают каплю крови. Другое предметное стекло, имеющее шлифованный край, прижимают под углом 45° к капле крови, а затем скользящим движением передвигают его к свободному концу первого стекла. При этом кровь распределяется по предметному стеклу тонким слоем. Высушивают препарат на воздухе, фиксируют в жидком фиксаторе (метиловый спирт или смесь этилового спирта и эфира).

Для приготовления «толстой» капли на предметное стекло наслаивают 2—3 капли крови, распределяя ее до величины 10-копеечной монеты. После высушивания на воздухе осторожно наливают несколько капель дистиллированной воды на 10-15 мин для удаления гемоглобина из эритроцитов.

Окрашивание препарата по Романовскому – Гимзе смесью метиленового синего, эозина и азура. На мазок наносят рабочий раствор красителя (2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды) на 10-20 мин. Затем препарат промывают водой и высушивают на воздухе. По Романовскому – Гимзе спирохеты возвратного тифа окрашиваются в фиолетовый цвет, эритроциты крови – в розовый, ядра лейкоцитов – в фиолетовый Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, лептоспиры – в розово-сиреневатый.

 

ТРЕПОНЕМЫ

Бледная трепонема

Treponema pallidum — возбудитель сифилиса — была откры­та в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гофманом.

Морфология, физиология. Длина спиралевидного тела клетки колеблется от 6 до 20 мкм при диаметре 0,13—0,15 мкм. Протоплазматический цилиндр скручен в 8—12 равнозначных завитков. От концов клеток отходят по 3 периплазматических жгутика.

Т. pallidum плохо воспринимает анилиновые красители из-за малого количества нуклеопротеидов в клетке. Только при длительном окрашивании по методу Романовского-Гимзы приобретает слабо-розовый цвет, что послужило поводом для названия возбудителя сифилиса «бледная трепонема».

T. pallidum (в темном поле микроскопа)

 

При действии неблагоприятных факторов, в частности лечебных препаратов, трепонемы могут переходить в L-форму, а также образовывать цисты – свернутые в шар спирохеты, покрытые непроницаемой муциновой оболочкой. Цисты могут длительное время находиться в организме больного, не проявляя патогенности. При благоприятных для них условиях цисты спирохет становятся спиралевидными, размножаются и восстанавливают свою патогенность.

Т. pallidum  очень  требовательна к составу искусственных питательных сред и на обычных средах не размножается. Она растет на средах, содержащих почечную или мозговую ткань в строго анаэробных условиях при температуре 35 °С. Культивирование трепонем в течение длительного времени приводит к потере вирулентности и изменениям других биологических свойств (биохимических, физиологических). Для сохранения исходных свойств трепонем в лабораториях их пассируют на кроликах – в ткани яичек животных, где они хорошо размножаются.

Антигены. Наличие в составе микробной клетки трепонем полисахаридных, липидных и белковых комплексов обусловливает их сложную антигенную структуру.

Экология и распространение. Средой обитания для бледной трепонемы является организм человека. Животные в естественных условиях сифилисом не болеют. Заражение происходит половым путем и редко через предметы обихода (белье, посуда и др.).

Попадая в окружающую человека среду, трепонемы быстро погибают, так как они малоустойчивы к высыханию, измене­ниям температуры и действию химических веществ. Так, при температуре 55°С они гибнут через 15 мин, при 45-48 °С – через 1 ч. Чувствительны трепонемы к тяжелым металлам (ртуть, висмут, мышьяк), кислотам и обычным дезинфицирующим веществам.

Патогенность возбудителей и патогенез сифилиса. Экспериментальное заражение трепонемами лабораторных животных (крыс, мышей, морских свинок) создает бессимптомную инфекцию. Заражение кроликов в кожу или яичко позволяет размножить, накопить необходимое количество трепонем. Эта модель дала возможность, кроме сохранения исходных биологических свойств культур, выделенных от больных людей, изучить их отношение к лечебным препаратам и другие вопросы инфекционной патологии. Способность трепонем противостоять защитной реакции фагоцитов, активно внедряться в ткани при поврежда­ющем действии эндотоксина обеспечивает развитие патологи­ческого процесса.

Время от заражения	Начало 2-10 недели	Первичный сифилис 1-3 месяца	Вторичный сифилис 2-6 недель	Скрытый сифилис 3-30 лет	Третичный  и четвертичный сифилис
Ведущие признаки	Первичный шанкр в месте проникновения	Увеличение лимфатических узлов.	Сыпь на коже и слизистых оболочках.		Нейросифилис Кардиоваскулярный сифилис Прогрессирующие деструктивные процессы

 

 После инкубационного периода, длительность которого составляет в среднем 24 дня (но может затягиваться до 90- дней), на месте внедрения возбудителя возникает без­болезненный плотный инфильтрат — твердый шанкр и регионарный аденит — плотный увеличенный лимфатический узел. Это – первичный период сифилиса. Этот этап продолжается примерно 6 нед. Возбудитель размножается, накапливается в большом количестве в первичном очаге.

  

Твердый шанкр

 

Затем, когда трепонемы проникают в кровь, возникает генерализация инфекции, которая сопровождается высыпаниями на коже и слизистых оболочках. Это — вторичный период сифилиса. Возбудитель содержится в элементах сыпи, больной опасен для окружающих. Без лечения вторичный период продолжается 2—3 года.

Третичный период, когда в органах и тканях обнаружива­ются инфекционные гранулемы (гуммы, склонные к распаду), наступает у нелеченых больных. Этот период продолжается несколько лет. При отсутствии кожных высыпаний больной малоопасен. Возможно поражение центральной нервной системы (прогрессивный паралич) или спинного мозга (спинная сухотка). В этот период возбудители могут быть обнаружены в огром­ном количестве в ткани мозга, где они вызывают глубокие не­обратимые изменения.

 

Клинические проявления сифилиса

 

 

Иммунитет. Восприимчивость человека к сифилису высока. Приобретенный иммунитет характеризуется защитными клеточными реакциями, способствующими фиксации трепонем и образованию гранулем, но не элиминации возбудителя из организма. Развивается и инфекционная аллергия, которую можно выявить внутрикожным введением убитой взвеси тканевых трепонем. На высоте иммунного ответа трепонемы образуют цисты, которые ло­кализуются обычно в стенке кровеносных сосудов – болезнь пе­реходит в стадию ремиссии. Снижение напряженности иммунитета сопровождается возвратом возбудителя в вегетативную стадию, его размножением, следствием чего являются рецидивы болезни.

Образующиеся на антигенные комплексы микробной клетки антитела не обладают защитными свойствами. Способность одних антител (реагинов) вступать в реакцию с кардиолипино-вым антигентом используется в серодиагностике сифилиса.

Перенесенное заболевание не оставляет невосприимчивости. После излечения возможно повторное заболевание при реинфекции.

Лабораторная диагностика. При первичном сифилисе проводят микроскопическое исследование. Материалом служит отде­ляемое твердого шанкра, из которого готовят нативные препараты. Микроскопию проводят в темном поле зрения.

Широко применяется серодиагностика. Сыворотка крови больного испытывается в реакциях Вассермана, ИФА.

Серологическая диагностика сифилиса. При проведении серологических реакций теперь используют такие унифицированные в Украине методы исследований: реакции связывания комплементу (РСК), иммунофлуоресценции (РИФ), иммобилизации трепонем (РИТ), микрореакцию преципитации (МПР) и иммуноферментный анализ (ІФА).

На протяжении многих лет основной и наиболее распространенной реакцией считалась реакция связывания комплемента или реакция Вассермана (РВ, RW). Для ее постановки используют сыворотку крови больного сифилисом и спинномозговую жидкость при поражении нервной системы.

Методика постановки реакции Вассермана не отличается от техники проведения РСК. Разница лишь в том, что для РВ используют не только специфический трепонемный, но и неспецифический кардиолипидный антиген.

Взятие 5-10 мл крови из локтевой вены проводят натощак или не раньше 6 час после приема пищи. Нельзя брать кровь у больных с повышенной температурой, после употребления алкоголя и жирной пищи, у беременных женщин за 10 дней до родов и родильниц. Добытую из крови сыворотку прогревают при температуре 56 ⁰С на протяжении 30 мин для инактивации собственного комплемента. РВ обьязательно ставят с двумя антигенами: специфическим и неспецефическим.

Специфический ультраозвучены трепонемны антиген готовят из культур бледных трепонем (штамм Рейтера), выращенных в пробирках и подвергшихся действия ультразвука выпускают в виде лиофильно высушенного порошка. Неспецифический кардиолипиновый антиген готовят путем спиртового экстрагирования липидов из бычьего сердца и очистки от балластных смесей, расфасовывают в ампулы по 2 мл. Для введения антигена в РВ его титруют согласно данной инструкции. Непосредственно перед постановкой РВ прроводять титрования комплемента и гемолитической сыворотки по такой же схеме, как и в РСК. Реакцию Вассермана ставят как качественным, так и количественным методом. Качественную реакцию проводят в трех пробирках с двумя антигенами по обычной схеме Таблица

Схема постановки качественной реакции Вассермана

.

 

Результаты реакции оценивают по 4-х плюсовой системе: положительная реакция – когда налицо полная или значительная задержка гемолиза (4+, 3+); слабоположительная реакция – частичная задержка гемолиза (2+); сомнительная реакция – незначительная задержка гемолиза (1+). В случае возникновения полного гемолиза РВ считают отрицательной.

Каждую сыворотку, которая дала положительную качественную реакцию, необходимо исследовать и количественным методом с последовательным ее разведением от 1:10 до 1:640

За титр исследуемой сыворотки (титр реагина) принимают то максимальное ее разведение, при котором наступает полная (4+) или значительная (3+) задержка гемолиза. Количественный метод постановки РВ имеет важное значение для оценки эффективности лечения сифилиса. Быстрое снижение титра реагина указывает на успешную терапию. Если же титр сыворотки долго не снижается, это свидетельствует об отсутствии эффективности примененных препаратов и необходимости изменить тактику лечения.

 

РСК

При подозрении на сероотрицательный первичный сифилис или скрытый, третичный или врожденный, рекомендуют ставить реакцию Вассермана на холоде по той же схеме. В случае подозрения на нейросифилис РВ проводят со спинномозговой жидкостью, которую не инактивируют, так как она не содержит собственного комплемента. В реакцию вводят неразведенный ликвор и в разведениях 1:2 и 1:5.

Реакция Вассермана становится положительной через 2-3 недели после появления твердого шанкра. При вторичном сифилисе она становится положительной в 100 % случаев, в третичном – в 75 %.

Кроме того, в комплексе серологических реакций в качестве теста скрининга используют микрореакцию преципитации с плазмой крови или инактивированной сывороткой.

Микрореакцию преципитации ставят с кардиолипидным анттигеном. Принцип реакции заключается в том, что при добавлении к плазме или сыворотке крови больного сифилисом эмульсии кардиолипинового антигена образуется преципитат (комплекс антитело антигена), который оседает в виде хлопьев белого цвета. Методика следующая: в лунку пластины вносят пипеткой три капли плазмы (или инактивированной сыворотки), потом добавляют одну каплю эмульсии стандартного кардиолипинового антигена. Компоненты реакции смешивают стряхиванием пластины на протяжении 5 мин, после чего добавляют три капли 0,9 % раствора хлорида натрия и оставляют при комнатной температуре еще на 5 мин. Обязательно ставят контроль со слабоположительной сывороткой крови. Результаты оценивают невооруженным глазом над искусственным источником освещения. При появлении в лунке больших хлопьев реакцию считают положительной (4+, 3+), средних и мелких – как слабоположительная (2+, 1+). При отрицательном результате преципитат не образуется.

Микрореакцию преципитации можно проводить и количественным методом для установления титра преципитирющих антител и оценки на этой основе эффективности лечения. Высшие титры МРП получають с плазмой, чем с сывороткой. За рубежом аналогом МРП с сывороткой больного является VDRL (Veneral disease research laboratory), а с плазмой – RPR (Rapid plasma reagin).

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ). К группе специфических реакций, которые широко употребляются для серологической диагностики сифилиса, относится непрямая реакция иммунофлуоресценции. В качестве антигена в ней используют взвесь патогенных бледных трепонем штамма Никольса из паренхимы яичек кролика на 7-й день после заражения. Реакцию ставят в двух модификациях: РИФ-АБС и РИФ-200. В первом варианте используют сорбент антител (соникат) – трепонемный антиген для РСК. Его выпускает Каунасское предприятие по производству бактериальных препаратов (Литва). При варианте РИФ-200 сыворотку больного разводят в 200 раз с целью снять влияние групповых противотрепонемных антител.

 

РИФ.

 

Постановку РИФ-АБС проводят на тонких, хорошо обезжиреных предметных стеклах. На зобратной  стороне стекол стеклорезом обозначено 10 кружочков, диаметром 0,7 см. В пределах кружка на стекло наносят антиген – взвесь бледных трепонем – в таком количестве, чтобы в поле зрения их было 50-60. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем и 10 мин в ацетоне. В отдельную пробирку вносят 0,2 мл сорбента (сониката) и 0,5 мл сыворотки крови больного, хорошо перемешивают. Смесь наносят на мазок (антиген) так, чтобы равномерно его покрыть, выдерживают 30 мин во влажной камере при 37 0С (I фаза реакции). После этого мазок промывают фосфатным буфером, высушивают и наносят на него антиглобулиновую флуоресцирующую сыворотку на 30 мин, ставят во влажную камеру при 37 0С (ІІ фаза). Препарат опять промывают фосфатным буфером, высушивают и исследуют под люминесцентным микроскопом.

При положительной реакции бледные трепонемы излучают золотисто-зеленое сияние, при отрицательной – не  светятся.

Техника постановки РИФ-200 такая же, как и РИФ-АБС, только сыворотку крови больного предварительно разводят в 200 раз фосфатным буфером. При проведении реакции иммунофлуоресценции со спинномозговой жидкостью больного сифилисом нервной системы используют РИФ-ц и РИФ-10, то есть ликвор вводят в реакцию неинактивированным и неразведенным, или разведенным 1:10.

Реакция иммунобилизации бледных трепонем (РИТ) основана на феномене потери их подвижности в присутствии иммобилизирующих противотрепонемных антител сыворотки больного и комплемента в условиях анаэробиоза. В качестве антигена в реакции используют взвесь бледных трепонем из тестикулярной ткани кролика, зараженного лабораторным штаммом Никольса.  Взвесь разводят стерильным 0,85% раствором хлорида натрия так, чтобы в поле зрения было 10-15 спирохет.

Для проведения реакции в стерильной пробирке смешивают 0,05 мл сыворотки крови больного, 0,35 мл антигена и 0,15 мл комплемента. Опыт сопровождают контролями сыворотки, антигена и комплемента.  Пробирки ставят в анаэростат, создают анаэробные условия и выдерживают в термостате 18-20 час при температуре 35 0С. Потом из каждой пробирки готовят препарат раздавленной капли, подсчитывают не меньше 25 трепонем и отмечают сколько из них подвижных и сколько неподвижных. Процент специфической иммобилизации бледных трепонем подсчитывают по такой формуле:

 

Х=  (A–B) : B x 100

 

где Х – процент иммобилизации, А – число подвижных трепонем в контрольной пробирке, В – число подвижных трепонем в опытной пробирке. Реакция считается позитивной, когда процент иммобилизации составляет 50 и больше слабкопозитивной – от 30 до 50, сомнительной – от 20 до 30 и негативной – от 0 до 20.

Пример положительной РИТ  ( Табл. )

 

Таблица

Постановка реакции иммобилизации трепонем (микроанаэростатная методика)

Компоненты, мл	Номер пробирки
	Опыт		Контроль компонентов
	1 (опыт)	2 (контроль)	1	2	3	4	5
Исследуемая сыворотка	0,05	0,05	–	–	–	–	–
Комплемент активный	0,15	–	0,15	0,15	0,15	–	–
Комплемент инактивированный	–	0,15	–	–	–	0,15	–
Антиген	0,35	0,35	0,35	0,35	0,35	0,35	0,35
Позитивная сыворотка–	–	–	0,05	0,05	–	–	–
Отрицательная сыворотка	–	–	–	–	0,05	0,05	–

 

 

В практических лабораториях используют более простой меланжерний метод РИТ по М.М. Овчинникову. Анаэробные условия опыта создаются помещением реагирующей смеси (сыворотки, антиген, комплемент) в меланжер, оба конца которого закрывают резиновым кольцом. Меланжерна методика позволяет обойтись без сложного оборудования и аппаратуры для создания анаэробиоза, но дает такие результаты, которые не уступают классической микроанаэростатной методике.

Реакции иммобилизации трепонем и иммунофлуоресценции считаются наиболее специфическими в серологической диагностике сифилиса. И все же, РИТ, невзирая на ее специфичность, не рекомендуют для использования в широкой практике из-за трудоемкости постановки.

Иммуноферментный анализ (ИФА) проводят как с кадриолипиновым антигеном (неспецифическая, отборочная реакция), так и с трепонемным (специфическая реакция), которая подтверждает диагноз сифилиса.

Принцип непрямого метода ИФА заключается в том, что к антигену, адсорбируемому на твердой фазе в лунках планшеты, вносят исследуемую сыворотку. Если она содержит антитела против трепонем, образуется комплекс антитело антигена (I фаза). После отмывания несвязанных неспецифических антител в лунки вносят антиглобулиновую сыворотку, конъюированную с ферментом (чаще всего из пероксидазы хрена). Конъюгат крепко присоединяется к комплексу антитело антигена (ІІ фаза).

После отмывания несвязанного конъюгата в лунки добавляют окрашивающий субстрат ОФД – ортофенилендиамин (ІІІ фаза). Пероксидазную реакцию останавливают, добавляя серную кислоту. Для контроля ставят такие же пробы из положительной и заведомо негативной сыворотками.

Учет результатов анализа проводят с помощью фотометра, который определяет оптическую густоту в двуволновом режиме (492 нм и 620 нм). Для постановки реакции энзиммеченных антител, кроме фотометра, нужны одно- и восьмиканальные автоматические пипетки с наконечником, полипропилена, и соответствующие наборы диагностических систем теста.

Метод ИФА находит широкое использование в серологической диагностике сифилиса. Он одинаково эффективный для выявления болезни в инкубационном периоде (через 1-2 недели после инфицирования), при клинических проявлениях болезни и скрытых ее формах. Очень часто ИФА используют при скрининговых обследованиях населения, особенно на станциях переливания крови.

В лабораторной практике иногда применяют также реакцию иммунного прилипания (РИП) и реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА). Первая из них основана на том, что патогенные тестикулярные трепонемы штама Никольса при смешивании с сывороткой больного в присутствии комплемента и эритроцитов человека прилипают к поверхности красных кровяных телец. РНГА достаточно широко используется для диагностики сифилиса благодаря своей методической простоте. Она становится позитивной уже через три недели после заражения. Позитивный результат реакции остается на протяжении лет после выздоровления. Аналогом этой реакции за рубежом является ТРНА (Treponema pallidum haemoagglutination).

Профилактика и лечение. Вакцинопрофилактика сифилиса не разработана в связи с отсутствием эффективных вакцин. Для химиотерапии используют антибиотики: пенициллин, цефалоспорины, а также препараты висмута и др.

 Другие трепонемы

Сходное с сифилисом заболевание — фрамбезия — вызывается подвидом Т. pallidum, T. pallidum subsp., T. pertenue. Заболевание распространено в странах с тропическим климатом. Возбудитель передается не только половым путем, а главным образом через предметы обихода, при контакте с больным, имеющим кожные высыпания. Болезнь носит выраженный социальный характер, наблюдаются семейные вспышки.

 

 

Лабораторная диагностика, профилактика и лечение аналогичны тем, которые применяют для выявления, предупреждения и лечения сифилиса.

Другой трепанематоз — пинта — регистрируется также в странах с жарким климатом. Возбудитель — Т. carateum — по морфологическим, тинкториальным,

культуральным признакам не отличается от Т. pallidum. Заболевание характеризуется возникновением первичного аффекта в виде красной или коричневой папулы, а затем генерализацией процесса, сопровождающейся поражением кожи — возникновением различного цвета пятен, гиперкератозом подошв и ладоней, выпадением волос.

 

 

Лабораторная диагностика сводится к обнаружению трепонем в пораженных участках кожи и постановке серологических реакций с сывороткой больного..

Род Treponema включает ряд видов, экологически связанных с полостью рта человека. Сходные с Т. pallidum морфологически, эти микроорганизмы хорошо размножаются в анаэробных условиях на искусственных питательных средах, содержащих сыворотку. Большинство из них — сапрофиты, живущие в полости рта. Т. vincentii в ассоциации с фузобактериями (Fusobacterium necrophorum) участвует в развитии фузоспирохетоза — некротической ангины Венса-на — Плаута.

 

БОРРЕЛИИ

Род Borrelia включает 19 видов, из которых патогенны для человека два, вызывающие эпидемический (вшивый) возвратный тиф и эндемический (клещевой) возвратный тиф.

Боррелии эпидемического возвратного тифа

В. recurrentis — возбудитель эпидемического возвратного тифа был открыт в 1868 г. О. Обермейером.

Морфология, физиология. Представители вида В. recurrentis — тонкие, 0,3—0,6 мкм в диаметре спиралевидные микроорганизмы длиной от 8 до 18 мкм. Имеют 3—8 крупных неравномерных завитков и заостренные концы.

Боррелии — строгие анаэробы. Культивируют их на питательных средах, содержащих асцитическую жидкость или сыворотку и кусочки тканей. Хорошо размножаются в куриных эмбрионах.

 

 

Borrelia recurrentis (по Романовскому– Гимзе)

 

Антигены. Поверхностные антигены боррелии вариабельны. В развитии заболевания это свойство ярко проявляется. В идентификации боррелии серологические реакции (равно как и биохимические) не применяются.

Экология и распространение. Эпидемическим возвратным ти­фом болеют только люди. Распространяется возбудитель платяной вошью,- которая, насосавшись крови больного, становится способной заразить человека в течение всей своей жизни, так как для вшей боррелии непатогенны, а в гемолимфе на­секомого микроорганизмы хорошо размножаются. Трансовари-альной передачи боррелии у вшей не существует.

В окружающей среде боррелии быстро погибают. При действии  температуры  45—48 °С  гибель  наступает  через  30  мин.

Патогенность возбудителей и патогенез эпидемического возвратного тифа. Человек заражается, втирая содержащую боррелии гемолимфу вшей (при расчесывании укуса, раздавливании насекомого). Попав во внутреннюю среду организма боррелии внедряются в клетки лимфоидно-макрофагальной системы, где размножаются, а затем поступают уже в большем количестве в кровь. Под влиянием бактерицидных свойств крови боррелии частично разрушаются и при этом освобождается эндоток­син, повреждающий кровеносную и центральную нервную систему. Токсикоз сопровождается лихорадкой, а в селезенке и печени возникают очаги некроза. За счет образующихся под влиянием антител агрегатов из боррелии, которые задерживаются в капиллярах внутренних  органов,  нарушается  местное кровоснабжение, что приводит к развитию геморрагических инфарктов.

Иммунитет. Первый лихорадочный период болезни завершает­ся образованием антител против боррелии первой генерации. Под влиянием этих антител возникают микробные агрегаты с нагрузкой тромбоцитов и большая часть боррелии погибает. Клинически это выражается наступлением ремиссии. Но часть возбу­дителей меняют антигенные свойства и становятся устойчивыми к образовавшимся антителам, сохраняются в организме. Эта новая генерация боррелии размножается и, наводняя кровяное русло, дает новый приступ лихорадки. Образующиеся антитела против второй генерации возбудителя лизируют значительную часть из них, но не полностью. Устойчивые возбудители, изменившие антигенную специфичность, размножаясь, вновь дают рецидив болезни. И так повторяется несколько раз. Выздоровление наступает только тогда, когда в крови появляется спектр антител, лизирующих все антигенные варианты боррелии.

Перенесенное заболевание не оставляет прочного иммунитета. Образовавшиеся антитела сохраняются непродолжительное время.

Лабораторная диагностика. Во время приступа, на высоте лихорадки возбудитель сравнительно легко может быть обнаружен в крови больного. Для этого готовят препараты толстой капли или мазка крови, окрашивают по Романовскому — Гимзе или фуксином и микроскопируют. Можно микроскопировать капли крови в темном поле, наблюдая подвижность боррелии. Метод серологической диагностики состоит в постановке реакций лизиса, РСК-

Дифференциацию эпидемического от эндемического возвратного тифа проводят в биологическом опыте: морской свинке вводят кровь больного. Боррелии эпидемического возвратного тифа в отличие от эндемического не вызывают заболевание животного.

Профилактика и лечение. Эпидемический характер заболева­емости возвратным тифом связан со снижением общего санитарно-гигиенического состояния, при котором легко возникает завшивленность. Профилактика данного заболевания сводится к борьбе с вшами. В настоящее время в нашей стране и во мно­гих других эпидемический возвратный тиф не встречается.

Для лечения возвратного тифа используют антибиотики (пе­нициллин, левомицетин, хлортетрациклин) и мышьяковистые пре­параты (новарселон).

Боррелии клещевого возвратного тифа

Клещевой возвратный тиф — зоонозное трансмиссивное заболевание. Возбу­дителями являются многие виды боррелии: В. duttonii, В. persica, В. hispanica, В. latyschewii, В. caucasica, распространенные в определенных географических зонах. Эти боррелии сходны с возбудителем эпидемического возвратного тифа по морфологии, резистентности к действию факторов окружающей среды, биологическим свойствам.

Резервуаром боррелии различных видов в природных очагах являются разные виды грызунов, а также паразитирующие на них клещи рода Ornithodoros. Зараженность клещей сохраняется в течение всей их жизни (около 10 лет). Имеет место и трансовариальная передача возбудителей, которые проникают в яйцевод и яйцеклетку насекомых. В природных очагах происходит постоянная циркуля­ция возбудителя от грызунов к клещам и обратно. Животные и паразитирующие на них клещи обычно накапливаются в норах, пещерах, но находят для себя обитание и в различных хозяйственных строениях в населенных пунктах.

Человек заражается при укусах клеща. На месте инокуляции возбудителя образуется папула (первичный аффект). Патогенез и клинические проявле­ния клещевых возвратных тифов сходны с эпидемическим. Заболевания чаще возникают в теплое время года с активизацией жизнедеятельности клещей.

Население эндемичных по клещевому возвратному тифу районов приобретает определенную степень невосприимчивости к циркулирующим возбудителям — в сыворотке крови у них обнаруживаются антитела к боррелиям, распростра­ненным в этом регионе. Заболевают же главным образом приезжие.

Лабораторная диагностика боррелиозов осуществляется микроскопией маз­ков крови (толстая капля) и биологической пробой на морских свинках, у кото­рых после заражения кровью больного развивается заболевание через 5—7 дней, а боррелии обнаруживаются в крови животных.

Профилактика и лечение. Профилактика клещевого возвратного тифа со­стоит в защите людей от нападения клещей, уничтожении грызунов и на­секомых в природных очагах.

Для лечения используют антибиотики тетрациклинового ряда, левомицетин, ампициллин.

 

Боррелиоз Лайма, болезнь. Лайма (хроническая мигрирующая эритема, лаймоборрелиоз) – хроническая или рецидивирующая трансмиссивная природно-очаговая инфекция, которая поражает нервную, сердечно–сосудистую системы, кожу, суставы, сопровождается лихорадкой, ознобом, головной болью. У половины заболевших наблюдаются вторичные  высыпания.

Возбудитель болезни Лайма (Borrelia burgdorferi) выделен из крови,  кожи, спинномозговой  жидкости людей в 1982 р. в США. Боррелии грамотрицательны, длиной 30 мкм, диаметр 0,18—0,25 мкм; имеют 7 завитков.

 

Болезнь передается через укусы иксодовых клещей, которые паразитируют на диких и домашних животных, распространенная в США, во многих странах Европы, в Австралии, Африке, Китае, Японии и в нашей стране.

Среди боррелий, что вызывают болезнь Лайма, на основе анализа их ДНК в последнее время идентифицированы три самостоятельных вида: Borrelia burgdorferi, B. garinii, B. afzelii. Все они могут долгое время персистувати в организме человека.

Патогенез захворюваня. В ходу заболевания выделяют три стадии. В первой стадии через 2-30 суток после укуса клещом Ixodes dammini на теле больного человека появляется мигрирующая эритема, наступают чувства усталости, лихорадка, озноб, головная боль, боль в спине. В 25-50 % больных наблюдаются вторичные сыпи. Во второй стадии бывают неврологические расстройства и мигрирующая боль в костях и мышцах, иногда – нарушение деятельности сердца длительностью от 3 суток до 6 недель. На третьей стадии заболевания в 60 % больных возникает артрит, что длится несколько недель; наиболее уязвимые коленные суставы.

Во всех стадиях заболевания есть признаки поражения нервной системы: головная боль, боль в участке шеи, сонливость, провалы памяти, быстрое изменение настроения.

Микробиологическая диагностка. Боррелии, что вызывают болезнь Лайма, очень прихотливые к питательным средам и условиям культивирования. Лишь в последнее время созданная среда BSK-II, пригодная для их выращивания и выделения в чистой культуре.

 

Материалом для лабораторного исследования служит эскудат из поражений кожи, спинномозговая жидкость, кровь. В связи с отсутствием боррелий в периферической крови выделить гемокультуру практически не удается. Но уже есть попытки выделить и идентифицировать чистые культуры возбудителей из поражений кожи и ликвора. Чаще вияляють боррелий в этих же материалах микроскопическим методом с помощью темного поля или в окрашенных азаур-эозином мазках. B. burgdorferi является одной из самых крупных боррелий.

Для выявления боррелий в тканях и жидкостях организма используют полимеразную цепную реакцию. Уже разработанные и внедренные в практику специфични системы теста для этой реакции.

И все же основу лабораторной диагностики лайм-боррелиоза составляют серологические реакции. В частности достаточно широко используют реакцию непрямой иммунофлуоресценции и иммуноферментный анализ со специфическим антигеном, адсорбируемым на лунках полистироловых планшет. Большие перспективы имеет широкое внедрение метода вестерн блота, с помощью которого можно обнаружить антитела к уникальному белку B. burgdorferi.

Микрореакция преципитации и ее  аналог VDRL при болезни Лайма всегда негативные.

Лечения проводят антибиотиками (пеницилин, тетрациклин, эритромицин, цефалоспорин), под воздействием которых наступает временное обостение – реакция Яриша – Герксгеймера,  возникающая в результате соединения антигенов боррелий, антител   и   комплемента.

Профилактика заключается в осторожном поведении в эндемических районах, где есть перенощики возбудителя – иксодовые клещи. Наибольшая активность клещей бывает в июне – сентябре. В этот период особенно важно обеспечить защиту детей от укуса клещами.

 

ЛЕПТОСПИРЫ

Leptospira interrogans — единственный патогенный для человека вид рода Leptospira семейства Leptospiraceae является возбудителем лептоспироза — острого природно-очагового заболева­ния.

Морфология, физиология. Лептоспиры — тонкие 0,1 мкм в диаметре спиралевидные микроорганизмы с тесно прилегающими друг к другу 12—18 завитками. Длина клеток 6— 12 мкм, концы загнуты и утолщены. Микроорганизмы плохо окрашиваются анилиновыми красителями, а потому их изучают обычно в живом состоянии в темном поле. Лептоспиры чрезвычайно подвижны. Быстрое вращательное движение вокруг продольной оси создает впечатление, что на концах микроба имеются образования в виде пуговки. Но в фиксированных препаратах можно видеть вторичные завитки концевых частей лептоспир, которые придают микробам вид, напоми­нающий букву S или С.

 

Морфология лептоспир

 

Лептоспиры — факульта­тивные анаэробы. Для культи­вирования в лабораторных условиях чаще всего применяют жидкие питательные среды, содержащие 5—10% кроличьей сы­воротки. Температурный оптимум 28—30 °С, оптимальная концен­трация хлорида натрия 0,05 %. Размножаются лептоспиры мед­ленно.

Антигены. Вид лептоспир, патогенных для человека, вклю­чает 19 серогрупп, различающихся группоспецифическим антиге­ном, а по типоспецифическому поверхностному липопротеиновому и белковому антигену различают 180 сероваров. Антигенную структуру выделенных лептоспир изучают в живых культурах с помощью адсорбированных иммунных сывороток — наблюдают скучивание, потерю лептоспирами подвижности и затем лизис (реакция агглютинации — лизиса).

Экология и распространение. Резервуаром патогенных лептоспир в природе являются животные 4 классов позвоночных (млекопитающие, земноводные, пресмыкающиеся и птицы). Широкое распространение лептоспир и заболевания, вызываемые ими, ре­гистрируются во многих странах мира. У грызунов лептоспирозная инфекция протекает хронически, имеет место носительство и выделение возбудителя с мочой. Попав в воду, почву, лептоспи­ры сохраняют жизнеспособность в течение 2—3 нед. В пищевых продуктах (молоко, масло, хлеб) выживают не более нескольких дней.

Заражение человека в природных очагах происходит глав­ным образом через воду, инфицированную лептоспирами, а также при уходе за больными животными. В прошлом связь заболевания с водой была настолько очевидна, что болезнь называли «водная лихорадка».

Патогенность возбудителей и патогенез лептоспироза. В организм человека лептоспиры проникают через слизистые оболочки и поврежденную кожу. По лимфатическим путям, затем кровеносной  системе лептоспиры  распространяются по организму, повреждая паренхиматозные органы. Характерным является поражение печени. В тяжелых случаях развивается желтуха, свя­занная с гепатитом. В первые дни болезни имеет место бактерие­мия, а затем микроорганизмы концентрируются в почках, печени, селезенке, костном мозге, лимфатических узлах. Лептоспиры не выделяют экзотоксин, но содержат токсическое вещество, которое при распаде клеток поражает паренхиматозные органы, — развивается жировое перерождение печени, возникают очаговые кровоизлияния в селезенке, геморрагический нефрит. Эти явления обычно претерпевают обратное развитие, и болезнь заканчивается выздоровлением. Течение патологического процесса имеет волнообразный характер.

Иммунитет. К 5—6-му дню заболевания в крови можно об­наружить антитела, титр которых к 3—4-й неделе достигает 1:10 000— 1:100 000. После перенесенного заболевания остаются антитела, которые сообщают организму стойкий пожизненный иммунитет. Но невосприимчивость носит типоспецифический характер. Не исключается поэтому возможность повторного заболевания,, вызванного другими серотипами лептоспир.

Лабораторная диагностика лептоспироза проводится микро­скопическим, бактериологическим, биологическим и серологиче­ским методами исследования.

Микроскопия исходного материала (крови, мочи) недостаточно эффективна, увидеть лептоспиры в темном поле часто не удается.

Бактериологический метод состоит в посеве крови больного (до 4—5-го дня заболевания) или мочи (с 7—8-го дня) в жидкую питательную среду, инкубации посевов при 28 °С и обнаружении лептоспир на 5—7-й день культивирования.

Биологический метод используется одновременно с бактериологическим. Кровью больного заражают морскую свинку внутрибрюшинно. Через 2—3 дня исследуют экссудат брюшной полости на наличие в нем лептоспир путем микроскопии в темном поле и посева на питательные среды.

Серологическую диагностику проводят со 2-й недели заболевания. Антитела в сыворотке крови больного определяют реакцией агглютинации — лизиса живой эталонной культуры лептоспир различных серогрупп. Диагностическим считается титр 1:100— 1:200.

Таблица

Схема постановки реакции аглютинации  лизиса лептоспир

 

    

Подтверждением серологического диагноза является нарастание титра антител при повторном исследовании крови, взятой через неделю.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика лептоспироза проводится путем вакцинации лиц, работающих в природных очагах. Вакцина представляет собой взвесь убитых нагреванием лептоспир нескольких серогрупп.

Для лечения используют пенициллин, назначают также поливалентный иммуноглобулин против лептоспир распространенных сероваров.

РИККЕТСИИ

Риккетсии, объединенные в порядок Rickettsiales, названы в честь американского микробиолога Г. Риккетса, который в 1909 г. открыл возбудителя одного из риккетсиозов — пятнистую лихорадку Скалистых гор и погиб от этой инфекции.

Риккетсии — грамотрицательные неподвижные бактерии, отличающиеся от других прокариот облигатным паразитизмом. Морфологически эти микроорганизмы характеризуются полиморфизмом — чаще наблюдаются небольшие палочковидные формы, размером 1—2 мкм, но могут быть длинные нитевидные образования до 40 мкм и очень мелкие, проходящие через бактериальные фильтры. Клеточная стенка риккетсии построена аналогично грамотрицательным бактериям.

 

 

Облигатный паразитизм риккетсии связан с энергетическим обменом, осуществление которого вне клеток организма хозяина у этих микробов невозможно, так как они не способны синтезировать НАД. Вместе с тем риккетсии обладают и собственной метаболической активностью — они усваивают глутамат, образуют АТФ и в клетке хозяина размножаются бинарным делением, как все прокариоты. Место размножения в протоплазме или ядре клеток является видовым признаком риккетсии.

В природе большинство риккетсии обитают в организме насекомых. Имеются виды, поражающие животных, и патогенные для человека. В табл. представлена классификация основных заболеваний, вызываемых риккетсиями, — риккетсиозов, и общая характеристика соответствующих возбудителей. Из представленных риккетсиозов только сыпной тиф, вызываемый R. prowazekii, является эпидемическим антропонозным заболеванием. Все остальные — зоонозные, эндемические, природно-очаговые, трансмиссивные с трансовариальной передачей воз­будителя.

Патогенность определяется способностью возбудителей проникать в чувствительные к ним клетки, где происходит их размножение, и синтезировать токсин, действие которого проявляется лишь при жизни микроорганизмов. Токсин своеобразен — он не секретируется как истинные экзотоксины и не вызывает интоксикацию организма после гибели возбудителя, как эндотоксины. Он термолабилен, разрушается при нагревании микроб­ной суспензии до 60 °С. Внутривенное введение взвеси живых риккетсии белым мышам вызывает острую интоксикацию и смерть животных через 2—24 ч. У людей, больных риккетсиозом, воз­никают нейтрализующие токсин антитела, которые определяют реакцией нейтрализации на белых мышах.

Все риккетсии чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда. Это позволяет применять их как этиотропные средства в лечении больных любым риккетсиозом.

 

РИККЕТСИИ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО СЫПНОГО ТИФА И БОЛЕЗНИ БРИЛЛЯ — ЦИНССЕРА

Возбудитель сыпного тифа был открыт в 1913 г. чешским исследователем С. Провацеком, погибшим в результате лабораторного заражения сыпным тифом.

Морфология, физиология. Риккетсии Провацека — полиморф­ные микроорганизмы, чаще кокковидные и палочковидные, размерами 0,8 — 2,0X0,3 — 0,5 мкм, могут быть и длинные нити до 40 мкм. Размножаясь в клетках хозяина, образуют микрокапсулу.

Риккетсии — аэробы. В лабораториях их культивируют в куриных эмбрионах (заражают в желточный мешок), в мышах, которых заражают в легочную ткань, и реже — в культурах клеток млекопитающих. Размножаются риккетсии сыпного тифа в цитоплазме клеток, время генерации составляет 8 ч, оптималь­ная температура роста — 35 °С.

Антигены.   Риккетсии   Провацека   имеют  2   вида   антигенов: 1-й — группоспецифический (такой же антиген имеют другие возбудители риккетсиозов группы сыпного тифа), обладает иммуногенными свойствами и является протективным; 2-й — корпускулярный, термолабильный, видоспецифический антиген, присущий лишь риккетсиям Провацека. Антигенными свойствами обладает и токсическая субстанция.

Патогенез сыпного тифа. Заболевание возникает после по­ступления возбудителя в кровь. Адгезия риккетсий происходит на эпителиальных клетках, выстилающих стенки кровеносных сосудов, особенно капилляров. Затем они проникают в цитоплазму данных клеток, где происходит их размножение. После разрушения клеток новая генерация риккетсий поступает в кровь, вызывая повреждение интактных эндотелиальных клеток. На­копление возбудителя происходит в течение инкубационного пе­риода (12—14 дней). Поражение капилляров приводит к обра­зованию гранулем и тромбов. Наиболее выраженные изменения происходят в капиллярах ЦНС, особенно головном мозге, что приводит к сильным головным болям. Вследствие поражения сосудов кожи появляется розеолезно-петехиальная сыпь.

Иммунитет. После заболевания формируется напряженный антимикробный и антитоксический иммунитет. В сыворотке крови определяются антитела, нейтрализующие токсин, которые явля­ются важным фактором гуморальной защиты. При недостаточ­ной напряженности гуморального иммунитета возбудители могут персистировать в течение длительного времени в организме пере­болевших людей.

Экология и распространение. В естественных условиях риккетсий Провацека обитают в организме человека или вшей (платяных, головных).

В окружающей среде, вне организма человека или вши, рик­кетсий гибнут. При этом во влажной среде это происходит быстро, но в высушенном состоянии (сухих фекалиях вшей) они могут сохраняться живыми в течение 6 дней. Повышенная тем­пература губительно действует на риккетсий — кипячение губит их за 30 с, выдерживание при температуре 50 °С — за 15 мин. Дезинфицирующие вещества (0,25 % раствор формалина, 0,5 % раствор фенола и др.)  убивают риккетсий за несколько минут.

В минувшие годы сыпной тиф был всегда спутником войн и стихийных бедствий, когда завшивленность населения создавала реальную возможность распространения возбудителя. Пре­дотвращение эпидемий сыпного тифа стало возможным благо­даря системе мероприятий, среди которых наиболее существенным является уничтожение вшей. Однако даже при отсутствии больных сыпным тифом людей нельзя считать выполненной зада­чу полной ликвидации этой болезни и ее возбудителя, поскольку у переболевших возможно длительное и даже пожизненное мик-робоносительство. У таких людей могут возникать рецидивы, повторный сыпной тиф (болезнь Брилля — Цинссера).

Лабораторная диагностика сыпного тифа  в  обычных лабораториях проводится серологическим методом — в сыворотке больных постановкой РНГА, РСК и реакции связывания компле­мента, агглютинации с риккетсиозными диагностикумами опре­деляют антитела.

Схема постановки реакции агглютинации Вейгля

 

 

Результат постановки РСК с сывороткой больного

 

В острый период болезни накапливаются и специфически реагируют с возбудителем IgM, затем в период реконвалесценции образуются IgG. При повторном сыпном тифе нарастает титр только IgG. Это помогает дифференцировать эпидемический сыпной тиф от болезни Брилля — Цинссера. Сыворотку больного обрабатывают соединениями, разрушающи­ми дисульфидные связи IgM (например, 2-меркаптоэтанолом), и если она в разгар болезни дает положительную реакцию, то ставится диагноз болезни Брилля — Цинссера, а не эпидемиче­ского сыпного тифа.

В специальных лабораториях выделяют возбудитель введе­нием исследуемого материала (кровь больного, органы погиб­ших, вши) в одну из клеточных систем, чаще всего в желточный мешок куриного эмбриона. Идентифицируют риккетсии при помощи ИФА.

Профилактика. Наряду с неспецифической профилактикой (санитарная обработка очага, в случае заболеваний; уничтожение вшей; обязательная госпитализация больных) проводится также специфическая, предусматривающая иммунизацию. Химическая сыпнотифозная вакцина — очищенный и концентрированный поверхностный растворимый антиген риккетсии Провацека — используется для создания иммунитета у лиц, работающих с этими опасными микроорганизмами, а при необходимости — и у других групп населения.

 

РИККЕТСИИ ЭНДЕМИЧЕСКОГО (КРЫСИНОГО) СЫПНОГО ТИФА

Rickettsia typhi — возбудитель эндемического (крысиного) сыпного тифа был открыт в 1928 г. X. Музером. По морфологическим и биологическим свойствам эти микроорганизмы сходны с риккетсиями Провацека. Дифференцируют их по видоспецифическому антигену (растворимому, термолабильному, из которого готовят диагностикумы для серологических реакций), по специфичности образуемого ими токсина, который определяют в реакции нейтрализации на мышах и в биологических пробах на морских свинках.

Риккетсии тифа экологически связаны с организмом крыс и паразитиру­ющих на них насекомых (крысиные блохи, крысиные вши, гамазовые клещи). У заразившихся насекомых риккетсии размножаются в клетках желудка, кишки и выделяются с фекалиями. В окружающей среде риккетсии быстро погибают, но в сухом состоянии и при низкой температуре могут сохранять жизнеспо­собность в течение нескольких дней и даже недель. Люди, находясь в эндемичном природном очаге, могут заразиться различными путями: трансмиссивным — при укусах крысиных блох, воздушно-капельным — при попадании высу­шенного материала с риккетсиями на слизистую оболочку верхних дыхательных путей и, довольно часто, алиментарным путем — при употреблении в пищу про­дуктов, инфицированных больными животными.

Патогенез возникающего заболевания сходен с патогенезом эпидемического сыпного тифа. Клинические проявления также сходны с сыпным тифом, болезнью Брилля — Цинссера.

В лабораторной диагностике используют серологические методы с применением специфических антигенов. Антитела определяют РСК и ИФ. Биологическая проба — заражение материалом от больных самцов морских свинок — приводит к развитию периорхита (так называемый скротальный феномен), что характерно для возбудителя крысиного, но не эпидемического сыпного тифа.

После перенесенного крысиного сыпного тифа остается невосприимчивость не только к R. typhi, но и к риккетсиям Провацека.

Профилактика крысиного сыпного тифа проводится в очагах массового распространения грызунов. Важными являются санитарно-гигиенические меро­приятия, предупреждающие заболевания крысиным сыпным тифом. Среди них — охрана пищевых продуктов от грызунов, соблюдение общих санитарно-гигиени­ческих правил.

РИККЕТСИИ МАРСЕЛЬСКОЙ ЛИХОРАДКИ

Rickettsia conorii — возбудитель марсельской лихорадки — был выделен в 1932 г. Ж. Каминопетросом из оболочек яичка морской свинки, которой он ввел взвесь зараженных вшей.

Морфологически этот вид риккетсий не отличается от других возбудителей группы пятнистых клещевых лихорадок. Форма клеток — палочковидная, длина 0,3—0,8 мкм. Окрашиваются по Здродовскому в красный цвет.

В лабораториях R. conorii размножают в желточном мешке куриного эмбриона и культурах клеток.

Растворимый антиген является общим для всех риккетсий данной группы риккетсиозов. Видовой специфичностью обладает как корпускулярный антиген, так и продуцируемый риккетсиями токсин, что позволяет дифференцировать вид возбудителя от других представителей группы постановкой серологических реакций с видоспецифической иммунной сывороткой и реакции нейтрализации токсина.

R. conorii в природе обитают в организме клещей. Наличие трансовариальной передачи обеспечивает им существование вне зависимости от других организмов. Природные очаги имеются в бассейне Средиземного моря, побережья Черного и Каспийского морей. Собачий клещ — наиболее частый резервуар — включает в эпидемическую цепь и собак. Человек заражается при укусе клеща, втирая раздавленное инфицированное насекомое. На месте инокуляции риккетсий уже через несколько часов возникает очаг воспаления, в центре которого появляется некроз за счет действия токсина размножающихся возбудителей. Из местного очага риккетсий попадают в регионарные лимфатические узлы, где также могут возникать воспалительные процессы. Затем возбудитель, распространяясь кровью, поражает клетки, выстилающие мелкие сосуды. Проявлением этого процесса является пятнисто-папулезная сыпь по всему телу больного. Заболевание оцени­вается как доброкачественное.

После выздоровления остается прочный пожизненный иммунитет. Невос­приимчивость распространяется и на другие виды возбудителей, вызывающих риккетсиозы этой группы.

Лабораторная диагностика осуществляется серологическим методом — по­становкой РСК, ИФА, РИГА с использованием диагностикумов из R. co­norii.

Заболевание сопровождается развитием реакции ГЗТ. Для выявления этого состояния применяют реакцию торможения миграции макрофагов.

Профилактика марсельской лихорадки сводится к уничтожению клещей в   природных очагах, обработке собак, у  которых  выявлены   эти   насекомые.

 

РИККЕТСИИ СЕВЕРОАЗИАТСКОГО КЛЕЩЕВОГО РИККЕТСИОЗА

Возбудитель Североазиатского риккетсиоза — Rickettsia sibirica — распространен среди мелких грызунов и иксодовых клещей в природных очагах на территории России, в Туркмении, Армении  и   на  евере  Казахстана.  Для   клещей  характерен  трансовариальный путь передачи возбудителя. Насекомые инфицируют грызунов при укусе. Также заражается и человек. На месте инокуляции риккетсий развивается первичный воспалительный очаг, где размножается возбудитель. Затем, попадая в кровь, риккетсий поражают клетки эндотелия сосудов. При этом патологические изменения наиболее выражены в сосудах кожи и значи­тельно меньше поражены сосуды головного мозга и других органов. Болезнь сопровождается высыпаниями на коже, протекает доброкачественно, интокси­кация выражена слабо.

В природе распространены штаммы со сниженной вирулентностью, заражение которыми вызывает у человека бессимптомную инфекцию. Иммунитет — пожизненный.

Лабораторная диагностика осуществляется серологическими методами с применением специфических диагностикумов и гетерологичных антигенов (для дифференциации от других риккетсиозов группы клещевых пятнистых лихорадок и от сыпного тифа). Применяют РСК, РИГА, ИФА, иммуноферментный метод.

Профилактика состоит в индивидуальной защите человека от нападения клещей в природных очагах.

 

РИККЕТСИИ ОСПОВИДНОГО (ВЕЗИКУЛЯРНОГО) РИККЕТСИОЗА

Rickettsia akari — возбудитель осповидного риккетсиоза — был выявлен и описан независимо друг от друга советскими (1950) и американскими (1946) исследователями. В 1960 г. было установлено тождество штаммов R. akari, выделенных в США и нашей стране.

R. akari морфологически, тинкториально не отличаются от других возбудителей риккетсиозов группы пятнистых лихорадок, близки по антигенной структуре к R. conorii и R. sibirica, но не имеют антигенного родства с риккет-сиями других групп (сыпного тифа, цуцугамуши, Ку-лихорадки). Культивируют эти микроорганизмы в желточном мешке куриных эмбрионов, которые погибают на 4—5-й день. При этом количество риккетсий в курином эмбрионе не бывает большим. Значительно эффективнее размножение риккетсий этого вида наблюдается в культурах переживающих клеток эмбриональной ткани.

Природные очаги R. akari в нашей стране зарегистрированы в Донецкой области. В настоящее время имеются лишь единичные случаи заболеваний людей, но при легком, нетипичном течении диагностика затруднена, и истинное число больных везикулярным риккетиозом нельзя считать точно установленным.

Источником возбудителя везикулярного риккетсиоза являются домовые мыши и серые крысы. Среди грызунов возбудитель распространяется гамазовыми клещами, которые часто нападают и на человека. Заражение происходит при попадании риккетсий в ранку при кровососании клеща и при втирании риккетсий в кожу с раздавленным насекомым.

На месте внедрения возбудителя возникает первичный воспалительный очаг. Процесс начинается с появления уплотнения, красного пятна типа розеолы-папулы. Затем образуется болезненная язва, покрытая струпом. Умеренно увеличиваются регионарные лимфатические узлы.

После   перенесенного   заболевания   формируется   напряженный   иммунитет.

Лабораторная диагностика состоит в выделении возбудителя и определении в сыворотке больных антител постановкой РСК с антигеном из возбудителя. Положительным считается титр 1 : 10—80. Затем серологические исследования повторяют для наблюдения за нарастанием титра антител.

Профилактика сводится к дератизации и дезинсекции в очагах.

 

РИККЕТСИИ ЛИХОРАДКИ ЦУЦУГАМУШИ

R. tsutsugamushi — возбудитель лихорадки цуцугамуши — был открыт в 1905 г. Ханси. В 1923 г. его отнесли к роду Rickettsia.

В нашей стране зарегистрированы заболевания в Приморском  крае, а у ряда здоровых лиц выявлены антитела в РСК к рик-кетсиям цуцугамуши. Циркулирующие в этом природном очаге штаммы риккетсий данного вида характеризуются малой виру­лентностью.

Морфология, физиология. Риккетсий цуцугамуши — мелкие палочки, часто складывающиеся парами. По Романовскому — Гимзе окрашиваются в красный цвет.

Культивирование риккетсий цуцугамуши проводят в желточном мешке куриного эмбриона и в -культуре клеток (фибро-бласты куриного эмбриона и др.).

Экология и распространение. Источником инфекции являются грызуны и насекомоядные. Инфекция передается через личинки краснотелковых клещей.

Риккетсий цуцугамуши погибают при 50 °С в течение 10 мин. Они чувствительны к дезинфектантам (формалин, фенол и др.), устойчивы к высушиванию.

Патогенез заболевания человека и иммунитет. Из крови возбудитель проникает в клетки эндотелия кровеносных сосудов. При этом образуются гранулемы, а в паренхиматозных органах возникают воспалительные процессы. На коже появляется петехиальная сыпь. В процессе заболевания развивается реакция ГЗТ.   Иммунитет  нестойкий,  отмечены  повторные  заболевания.

Лабораторная диагностика проводится с помощью РСК с антигеном, приготовленным из нескольких сероваров риккетсий цуцугамуши.

 

РИККЕТСИИ КУ-ЛИХОРАДКИ

Возбудитель лихорадки Ку — Coxiella burnetii (род Coxiella, сем. Rickettsiaceae) —впервые был выделен в 1937 г. Э. Дерри­ком в Австралии. Впоследствии данные риккетсий получили видовое название Rickettsia burnetii и были отнесены к роду Coxiella.

Морфология, физиология. Риккетсий Бернета представляют собой мелкие палочковидные или кокковидные образования, окрашивающиеся краской Романовского — Гимзы в ярко-пурпурный цвет. Они образуют фильтрующиеся и L-формы.

 

 

Coxiella burnetii.

 

Риккетсий Бернета культивируют в желточном мешке кури­ного эмбриона и в культуре клеток.

Антигены. Риккетсий Бернета имеют два антигена: растворимый и корпускулярный. Последний используют для иммунизации и в качестве аллергена для постановки внутрикожных проб.

Экология и распространение. Ку-риккетсиоз распространен повсеместно. Заболевание зарегистрировано в разных регионах СССР. Источниками инфекции являются домашние животные и грызуны. Возбудитель передается через молоко, а также предметы, загрязненные мочой, испражнениями больных животных.   Заражение   происходит   и   при   укусах   инфицированных иксодовых клещей, которые выделяют риккетсии Бернета с фе­калиями при кровососании. Кроме того, человек может заразиться при уходе или контакте с больными животными, а также при обработке шерсти, кожи, меха, инфицированных риккет-сиями.

Риккетсии Бернета более устойчивы к факторам внешней среды по сравнению с другими риккетсиями. Они в течение 30 дней сохраняются в свежем мясе при 4 °С. В стерильном молоке сохраняют жизнеспособность до 4 мес. В свежем молоке погибают при кипячении. Риккетсии выживают при действии 1 % раствора фенола в течение 1 сут, 0,5 % раствора хлорамина в течение  4  сут.   На  белье  и  предметах  обихода — 2—3  нед.

Патогенез Ку-лихорадки и иммунитет. После проникновения риккетсии через слизистые оболочки или кожу в лимфу и кровь возникает состояние риккетсемии. Размножение риккетсии про­исходит в гистиоцитах и макрофагах, после разрушения которых отмечаются генерализация процесса и токсинемия. В процессе инфекции развивается реакция ГЗТ, а после выздоровления формируется напряженный иммунитет. В некоторых случаях инфекция   приобретает   хроническое,   рецидивирующее   течение.

Лабораторная диагностика проводится серологическими методами. Чаще используют РСК и реакцию агглютинации. На 8—10-й день болезни определяется титр антител, титр 1:8— 1:16 считается диагностическим. Дальнейшее нарастание титра подтверждает диагноз.

Кожно-аллергическая проба рассматривается как ретроспек­тивный метод диагностики.

Профилактика. В сельскохозяйственных очагах организуется комплекс санитарно-ветеринарных и противоэпидемических меро­приятий — поголовное обследование животных, карантин вновь прибывающих, обеззараживание выделений, освобождение пастбищ от клещей и т. д.

Для специфической профилактики применяют живую вакцину М-44. Иммунизируют как животных, так и людей, подвергающихся опасности заражения.

 

ХЛАМИДИИ

Хламидии — облигатные паразитические бактерии, сходные по химическому составу с грамотрицательными прокариотами. Полная зависимость от клетки хозяина обусловлена неспособностью хламидии синтезировать АТФ. Особенностью размножения этих микроорганизмов является цикл развития в клетке, включающий закономерную смену двух разных по морфологии и биологическим свойствам форм существования микроорганизма.

 

 

Chalamidia trachomatis:

ЭТ – элементарные тельца; РТ – ретикулярные тельца

 

Хламидии имеют широкий спектр хозяев. Главные экологи­ческие ниши — птицы и млекопитающие, включая человека. Заболевания у человека  вызывают хламидии двух видов  рода  Chlamydia: C. psittaci и С. trachomatis. Первый является воз­будителем болезней животных, иногда у человека (орнитоз, пневмонии, полиартрит, гастроэнтерит, менингоэнцефалит). С. trachomatis вызывает заболевания, различные по клиническим проявлениям, только у человека.

Хламидии орнитоза

С. psittaci — возбудитель орнитоза — болезни с природной и хозяйственной очаговостью. Источником возбудителя являются птицы. Известно около 140 видов птиц, естественно зараженных хламидиями этого вида. При перелетах на далекие расстояния они распространяют инфекцию. У большинства больных птиц орнитоз протекает как латентная инфекция. Очаги заболевания могут возникать в птицеводческих хозяйствах, где происходит заражение обслуживающего персонала.

Патогенез орнитоза и иммунитет. С. psittaci проникают в организм человека воздушно-капельным путем, вызывая поражение клеток эпителия слизистой оболочки дыхательных путей и лимфатических регионарных узлов. После разрушения зараженных клеток хламидии попадают в кровь, а затем в парен­химатозные органы. В клетках лимфоидной ткани они могут длительно сохраняться и вызывать рецидивы болезни.

В течение заболевания развивается реакция ГЗТ. Кроме того, иммунный ответ выражается антителообразованием. Однако антитела не обеспечивают невосприимчивость к повторному заболеванию. Отсутствие гуморальной защиты и аллергия замедленного типа, по-видимому, способствуют возникновению рецидивов.

Лабораторная диагностика. Выделение возбудителя из крови возможно в первые 2—3 нед болезни. Материалом заражают белых мышей в мозг или куриные эмбрионы в желточный мешок. В клетках мозга мыши или желточного мешка куриных эмбрио­нов обнаруживают включения, которые выявляют иммуно-флюоресцентным или иммуноферментным методами.

Серодиагностику проводят в РСК, РТГА, ИФА с использо­ванием соответствующих антигенов из возбудителя. Аллерги­ческое состояние выявляют постановкой внутрикожных проб со специфическим аллергеном.

Профилактика и лечение. Для лечения, а также экстренной профилактики используют антибиотики тетрациклинового ряда. Мероприятия неспецифической профилактики проводятся в соответствии с инструкциями, разработанными для птицеводческих хозяйств.

Другие хламидии

С. trachomatis, патогенный для человека вид хламидии, дифференцируется   на   15   сероваров:   L–l,   L-2,   L-3   являются возбудителями пахового лимфогранулематоза; А, Ва, В и С — трахомы; остальные, от D до К, вызывают уретрит и спорадические заболевания глаз. Резервуаром С. trachomatis в природе является человек. Животные в естественных условиях не вос­приимчивы к этому виду хламидий. Передача возбудителя осуществляется при прямом контакте и через зараженные предметы.

Возбудители пахового лимфогранулематоза — венерической болезни — распространены у людей, живущих главным образом в странах с тропическим и субтропическим климатом. Болезнь характеризуется цикличностью течения, в которой имеются три периода. Первичный проявляется через 1,5—2 нед после зара­жения и характеризуется возникновением на месте внедрения возбудителя единичного пузырька, который затем переходит в эрозию и язву. Вторичный период характеризуется генерализацией процесса, а третичный — формированием тяжелого фистульно-спаечного процесса промежности.

Заболевание сопровождается развитием аллергии, которая выявляется внутрикожной реакцией Фрея с аллергеном, получен­ным из хламидий. После перенесенного заболевания формируется напряженный иммунитет.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопиче­ского исследования мазков-отпечатков содержимого лимфати­ческих узлов. Выделение возбудителя производится при посеве исследуемого материала в культуры клеток. Для серодиагностики используется РСК и ИФ.

Специфическая профилактика отсутствует.

Трахома — хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся поражением клеток конъюнктивы глаза. При этом в цитоплазме клеток хламидий образуют включения, описанные в 1907 г. Хальберштадтом и Провацеком и названные их именами.

 

 

Внутриклеточное расположение хламидий

 

Обнаружение в соскобах конъюнктивы этих включений имеет диагностическое значение. В СССР трахома как массовое заболевание ликвидирована.

Для этиотропного лечения применяют антибиотики тетрациклинового ряда. Без лечения заболевание заканчивается потерей зрения.

Конъюнктивит новорожденных — инфекционное заболевание новорожденных. Ребенок заражается хламидиями в родовых путях больной матери. Помимо конъюнктивита, у новорожденных могут возникнуть пневмония или гастроэнтерит. Хламидийным конъюнктивитом могут болеть взрослые люди, заразившись во время купания в инфицированных водоемах.

Уретрит, вызываемый хламидиями, — венерическое заболева­ние, занимающее по частоте возникновения второе место после гонореи. При данном заболевании хламидий поражают цилин­дрический эпителий уретры.

Болезнь Рейтера — тяжелый системный хламидиоз, развивается после острой инфекции мочеполовых органов или кишечника у лиц с дефектами иммунной системы. Клинически проявляется триадой: уретрит, конъюнктивит, артрит.

Хламидии являются возможным этиологическим фактором дисплазии шейки матки — заболевания, описанного в 1967 г., при котором постоянно определяют в отделяемом матки IgA к хламидиям. Не исключена возможность, что у таких больных хламидиоз является сопутствующим заболеванием. Уретральный хламидиоз может быть причиной выкидышей, бесплодия.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопиче­ского исследования мазков, окрашенных краской Романовского — Гимзы. Наличие в элементарных клетках элементарных телец розового цвета, ретикулярных телец голубовато-синего цвета позволяет поставить положительный диагноз. Наиболее достоверные результаты получают при использовании иммуно-флюоресцентного метода с моноклональными антителами.

Для серодиагностики применяют реакцию ИФА, РСК. По­следняя является менее чувствительной. Достоверным является 4-кратное нарастание титра антител во 2-й пробе сыворотки крови. Выделение хламидии производится редко. Для этого заражают патологическим материалом клеточные культуры.

 

Дифференциальные признаки патогенных хламидий

 

 

МИКОПЛАЗМЫ

Микоплазмы — единственные среди прокариот микроорганиз­мы, лишенные клеточной стенки. Это позволило выделить их в отдельный класс бактерий Mollicutes («мягкокожие»), в который входит только один порядок Mycoplasmatales. В него включено семейство Mycoplasmataceae, к которому относятся роды Mycoplasma и Ureaplasma, отличающиеся друг от друга по биохимическим и антигенным свойствам.

Род Mycoplasma включает 69 видов. Патогенным для человека является один вид М. pneumoniae условно-патогенными три вида: М. hominis, M. fermentes, M. arthritidis.

К роду Ureaplasma относятся только два вида, среди кото­рых патогенным для человека является U. urealyticum.

Морфология, физиология. Микоплазмы грамотрицательные бактерии, характеризующиеся сравнительно небольшими размерами и выраженным полиморфизмом. При микроскопии они имеют вид овоидных, круглых или удлиненных клеток, а также нитевидных образований. Самые мелкие клетки проходят через бактериальные фильтры. Такое морфологическое разнообразие объясняется отсутствием клеточной стенки, вместо которой микоплазмы окружены трехслойной мембраной. Большинство микоплазм неподвижны.

 

Mycoplasma pneumoniaе

 

Микоплазмы — хемоорганотрофы и неспособны к синтезу стеринов, который необходим для их роста. В качестве главного источника энергии большинство микоплазм используют глюкозу или аргинин. По типу дыхания они относятся к факультативным анаэробам.

Размножаются микоплазмы несколькими путями: бинарным делением, почкованием, фрагментированием нитевидных форм на дочерние элементы. Микоплазмы культивируются на искусственных питательных средах с триптином и добавлением сыворотки и углеводов. Поскольку микоплазмы лишены клеточной стенки, они растут только в изотонических или гипертонических средах. На плотных средах по прошествии нескольких суток образуются очень мелкие колонии, напоминающие яичницу-«глазунью» — круглые с куполообразным врастающим в среду центром и плоской просвечивающей периферической зоной.

 

Колонии микоплазм

Наряду с питательными средами для культивирования микоплазм можно использовать культуры тканей.

Биохимические свойства позволяют выявлять как родовые, так и видовые признаки микоплазм. При дифференциации видов, входящих в род Мусорlasma, учитывают их способность расщеплять глюкозу, маннозу, аргинин, желатину, казеин и др. Характерным родовым биохимическим признаком уреаплазм яв­ляется их способность вызывать гидролиз мочевины. Этот дифференциальный признак используется, в частности, при конструировании дифференциально-диагностических сред, содержащих в качестве индикатора гидролитического расщепления мочевины сульфат марганца. На такой среде уреаплазмы в отли­чие от представителей рода Mycoplasma дают колонии корич­невого цвета.

Патогенность микоплазм и уреаплазм сочетается со способ­ностью этих микроорганизмов вызывать агглютинацию эритроцитов животных разных видов.

Антигены. Трехслойная мембрана микоплазм содержит видоспецифические антигены, определение которых используется для дифференциации 69 видов этого рода. Наиболее специфич­ным методом серологической идентификации микоплазм является тест угнетения роста. Он основан на подавлении размножения микроорганизмов на питательной среде, куда внесена гомоло­гичная для данного вида иммунная сыворотка. Другие серологические реакции (ИФ, РСК, РИГА) также применяются для этих целей, но они не столь точны. Уреаплазмы отличаются от микоплазм антигенными свойствами, у них в большей степени выражена типовая специфичность. Так, например, вид U. urealy–ticum представлен 14 сероварами.

Экология и распространение. Жизнедеятельность микоплазм проходит в организме животных и человека. Многие виды являются сапрофитами и обитают в полости рта, желудочно-кишечном тракте. Часть видов патогенны для животных и только единичные виды обладают способностью вызывать заболевания у человека. К ним относятся: М. pneumoniae, этиологическая роль которых в возникновении заболевания дыхательных путей доказана; М. hominis — условно-патогенные возбудители негонорейных уретритов, простатитов, сальпингитов, пиелонефритов и других заболеваний урогенитальной сферы; М. fermentans, выделенные впервые при вульвовагините, считают причастными также и к развитию иммунопатологических состояний, в част­ности ревматоидного артрита; в этиологии последнего определенную роль играет и М. arthritidis. Из уреаплазм патогенными являются U. urealyticum, вызывающие острые и хронические воспалительные процессы урогенитальной сферы.

Попадая во внешнюю среду, микоплазмы быстро погибают, так как очень чувствительны к изменению осмотического давле­ния, рН среды, повышению температуры, действию ультрафиолетовых лучей, дезинфицирующих веществ. Лишенные клеточной стенки, эти микроорганизмы устойчивы к пенициллину, но проявляют чувствительность к антибиотикам тетрациклинового ряда, а некоторые виды — к эритромицину.

Источником микоплазм, способных вызвать заболевания человека, всегда являются больные люди. Путь распространения самого частого микоплазменного возбудителя — М. pneumoniae — воздушно-капельный. Заражение происходит при близком и длительном контакте. Это связано с малой устойчивостью микоплазм в окружающей среде. Инфекции, вызванные мико-плазмой пневмонии, широко распространены во всех странах мира.

Патогенность микоплазм и патогенез микоплазмоза. В осно­ве патогенетического действия этих микроорганизмов лежат их уникальные свойства мембранных паразитов. Механизм мембранного паразитирования включает тесный контакт мембран микроорганизма с клетками эпителия или других тканей с по­мощью особых концевых структур липопротеиновой природы, взаимодействующих с рецепторами клеток макроорганизма. При этом липидные компоненты мембран микоплазм диффундируют в мембрану клетки, а холестерин клетки макроорганизма поступает в мембрану микоплазм. Заканчивается этот процесс либо откреплением микоплазм от клетки, либо поглощением их клеткой вследствие фагоцитоза. В последнем случае микоплазмы размножаются внутриклеточно, чему способствуют специальные ферментные системы этой группы бактерий.

В составе фагоцитирующих клеток микоплазмы из первичного очага поражения могут попадать в другие органы, а также длительно персистировать в организме. Токсинов микоплазмы не выделяют, их повреждающее действие на пораженные клетки реализуется через такие слаботоксичные продукты обмена, как ионы аммония или перекись водорода, которые оказывают неблагоприятное действие на мембраны пораженных клеток толь­ко в силу тесного контакта с этими микроорганизмами. Подобный характер мембранного и внутриклеточного паразитирования приводит к тому, что микоплазмоз нередко приобретает хрони­ческое или латентное течение, а антигенная мимикрия, присущая возбудителю, создает для этого дополнительные условия.

В патогенезе микоплазмоза определенную роль играет и способность микоплазм стимулировать пролиферацию окружающих их клеток макроорганизма. Благодаря этому они могут способ­ствовать непрямому повреждению тканей, вызывая усиление клеточных иммунных реакций (ГЗТ), а также повышая чувстви­тельность клеток к вирусам, так как вирусы интенсивно раз­множаются именно в делящихся клетках.

Могут возникать бессимптомные формы микоплазмоза; нередки сочетания микоплазмоза с респираторными вирусными инфекциями. Условно-патогенные микоплазмы могут вызывать заболевания у лиц с иммунодефицитными состояниями. Это эндогенные инфекции, вызванные ассоциациями микоплазм с другими микроорганизмами.

Особенно тяжело протекает микоплазменная инфекция в дет­ском возрасте. У детей микоплазмоз, вызванный М. pneumoniae, сопровождается преимущественным поражением органов дыхания и нервной системы. Часто имеет место генерализация про­цесса с развитием патологических очагов в других внутренних органах. Наиболее тяжелое течение болезни наблюдается у ново­рожденных и недоношенных детей. Велика роль патогенных микоплазм и в развитии внутриутробных инфекций плода. У детей дошкольного и младшего школьного возраста 10—20 % пневмоний имеют микоплазменную этиологию.

Иммунитет. Наиболее ранняя ответная иммунная реакция организма при микоплазмозе носит клеточный характер, гумо­ральный иммунитет развивается несколько позднее и обусловлен наряду с сывороточными антителами IgA слизистых оболочек по месту локализации возбудителя. При этом продолжительность приобретенного иммунитета зависит от интенсивности и формы инфекционного процесса. Например, микоплазменные пневмонии завершаются формированием выраженного клеточного и гумо­рального иммунитета длительностью 5—10 лет.

Лабораторная диагностика. Наиболее эффективным способом лабораторной диагностики является серологическое исследование с использованием РСК, ИФА, РНГА и др. В последнее время интенсивно разрабатываются методы, основанные на регистрации клеточной иммунной реакции при микоплазмозе.

Для ранней диагностики может быть использован ИФА мазков из бронхиальных и носоглоточных смывов, а также из другого материала.

 

Дифференциальные признаки патогенных для человека микоплазм

 

Профилактика и лечение. Профилактика микоплазмозов сводится к своевременному выявлению больных как источников микоплазм и их изоляции.

Вакцинная профилактика к настоящему времени не разработана. Для лечения  используют антибиотики тетрациклинового ряда, эритромицин

 

Дополнительный материал

Тропические (невенерические) трепонематозы – фрамбезия, беджель, пинта – вызываются подвидами трепонем семейства Spirochetaceae, близкими по морфологическим и антигенным свойствам Tr. pallidum. От венерического сифилиса они отличаются путями передачи, эпидемиологией и клиническими проявлениями. Подобно венерическому сифилису для них характерно хроническое рецидивирующее течение с преимущественным поражением кожи.

ФРАМБЕЗИЯ

Фрамбезия – инфекционное невенерическое заболевание, которое поражает в основном детей. Наиболее распространенный эндемический трепонематоз, проявляющийся поражением кожи, слизистых оболочек и костной системы. Заболевание встречается в странах с тропическим климатом (экваториальные страны, расположенные в лесистых районах, прибрежных зонах морей и океанов). Распространению заболевания способствуют плохие жилищные условия, скученность населения, низкий санитарно-гигиенический уровень. Эндемичными по заболеванию являются страны Карибского бассейна, Латинской Америки, Центральной Африки, Южной Азии, Океании и северной части Австралии. По данным ВОЗ, только в странах Экваториальной Африки насчитывается более 50 млн больных пианом.

Этиология и патогенез. Заболевание вызывается Tr. pallidum subsp. pertenue, передается через кожу при прямом контакте. В течении фрамбезии различают инкубационный период (34 недели), первичный, вторичный и третичный периоды.

Клиническая картина. Первичный период начинается с появления на месте внедрения возбудителя пианомы – зудящей папулы, которая нагнаивается и превращается в пустулу. Наиболее часто первичный аффект отмечается на нижних конечностях и ягодицах на месте различных микротравм. По вскрытии пустулы образуется язва без признаков склероза, со дна которой развиваются вегетации, напоминающие ягоду малину. Пианома сопровождается регионарным лимфаденитом, а иногда и лимфангитом.

Вторигный период, развивающийся через несколько недель или месяцев после появления пианомы, характеризуется высыпанием фрамбезидов эритематозных, везикулезных, пустулезных, язвенных, папулезных. Длительно существующие папулы приобретают сходство с пианомой, однако меньше по размерам; характерно вовлечение в процесс ладоней и подошв в виде ги-перкератотических образований с трещинами.

Третичный период. Поздняя фрамбезия развивается примерно у 10 % больных через несколько лет после начала заболевания. Для этого периода характерны гуммозные поражения кожи, костей и суставов в виде узлов, подвергающихся изъязвлению, деформаций костей и суставов.

Характерна периодичность течения. После инкубационного периода, составляющего в среднем 3—4 нед, развивается первичный период заболевания, сменяющийся вторичным, а затем третичным (поздние проявления).

Первичный период начинается с язвенного образования — пианического шанкра, локализующегося в 95\% случаев на нижних конечностях. В исключительно редких случаях шанкр появляется на лице, верхних конечностях и очень редко на наружных половых органах. Вначале это округлая папула розового цвета, которая в течение 1—2 сут эрозируется, а затем изъязвляется. Развившийся пианический шанкр — это округлая или овальная язва мясо-красного цвета, безболезненная при пальпации. В отличие

от сифилитического шанкра в основании пианического шанкра не определяется уплотнения. Поверхность язвы обычно покрыта тонкой корочкой либо пленкой в виде папиросной бумаги, напоминающей пленку при дифтерии. В отличие от сифилитического пианический шанкр может сопровождаться чувством зуда. За счет периферического роста шанкр постепенно увеличивается в размерах, достигая 5 см и более в диаметре. Дно язвы покрывается вегетациями и папилломатозными разрастаниями, напоминающими малину. Отсюда название заболевания «фрамбезия» — от франц. framboise — малина. Слово «яво на Корсике также означает дикую, горную малину. Иногда вокруг первичного аффекта появляются мелкие папулы — это явление получило название пианомизации шанкра. Пианический шанкр, как и сифилитический, сопровождается регионарным лимфаденитом. Лимфатические узлы плотно-эластической консистенции, безболезненны, не спаяны между собой и с окружающими тканями, не абсцедируют и не вскрываются. Через 2—6 мес шанкр разрешается рубцеванием. На его месте остается атрофиче-ский депигментированный рубец, окруженный по периферии гипер-пигментированным венчиком.

В сыворотке раздражения (reitz-serum) шанкра обнаруживают большое число трепонем.

.Первичный период обычно не сопровождается общими симптомами, хотя иногда может повышаться температура тела, развивается астеническое состояние.

Вторичный период начинается после заживления первичного аффекта, в среднем через 2—4 мес после начала заболевания. Указанные сроки являются условными, так как проявления вторичного периода могут наблюдаться при незарубцевавшемся первичном аффекте либо по истечении нескольких месяцев с момента заражения. Общее состояние больных обычно не страдает, хотя в отдельных случаях возможны головные боли, астения, ревматоидные боли в костях, суставах, температурная реакция. Проявления вторичного периода полиморфны; наиболее характерными являются папилломатозные, вегетирующие высыпания — пианомы (фрамбе-зиомы). Пианома начинается с везикулопустулы, на дне которой развиваются вегетации, папилломатозные разрастания, напоминающие малину. Отдельная пианома представляет собой вегетирующее розовое образование мягкой консистенции, она безболезненна, ее поверхность покрыта геморрагическим экссудатом либо такой же корочкой. Количество пианом может быть различным — от единичных высыпаний до нескольких сотен. Излюбленная локализация пианом — волосистая кожа головы, кожные складки и зона вокруг естественных отверстий. Иногда пианомы группируются, образуя различные фигуры, кольца, дуги.

При локализации высыпаний на ладонях и подошвах формируются участки гиперкератоза, напоминающие псориаз, точечную форму ладонно-подошвенной кератодермии, кратерообразные омозоле-лости. Характерно, что между высыпаниями сохранена видимо не пораженная кожа. Образующиеся глубокие трещины на участках гиперкератоза причиняют болезненность при ходьбе. Поэтому больные щадят эти участки и стараются опираться на наружные поверхности стоп, что делает походку своеобразной («пиан-краб», «краб-яво>).

Пианомы на слизистых оболочках встречаются редко, отсутствие таких высыпаний служит критерием при дифференциальной диагностике фрамбезии от сифилиса или беджеля; при последних слизистые оболочки поражаются довольно часто. Слизистые оболочки вовлекаются в процесс вторично в результате диссеминации кожных высыпаний. Чаще поражается внутренняя поверхность губ, щек, межъягодичная складка или складка препуциального мешка. В пи-аномах, локализующихся как на коже, так и на слизистых оболочках, обнаруживается большое количество трепонем.

Пианомы могут локализоваться в околоногтевых пространствах, вызывая дистрофические изменения ногтевых пластинок — пиани-ческую онихию.

Помимо пианом, при фрамбезии могут быть пятнистые, чаще депигментированные, пятнисто-сквамозные мелкие папуллезные высыпания по типу фолликулярных или гиперкератотических папул. Эти высыпания получили названия «пианиды». Последние склонны к группировке, нередко образуя фигурные кольцевидные высыпания. Эти сыпи не изъязвляются, не мацерируются; они сухие и имеют питириазиформный, псориазиформный или лихеноидный характер. Сходство с псориазом усиливается при локализации таких высыпаний на коже разгибательной поверхности локтевых и коленных суставов. Могут быть также узловатые высыпания по типу узловатой эритемы, локализующиеся в области голеней. Пианиды могут наблюдаться одновременно с пианомами либо существовать изолированно. В ряде случаев пианиды принимают экссудативный характер, нагнаиваются, эрозируются, на их поверхности появляются папил-ломатозные разрастания, происходит их трансформация в пианомы. В пианидах редко обнаруживаются трепонемы; эти высыпания, как правило, не заразны.

При вторичной фрамбезии могут развиться оститы, периоститы, у детей — дактилиты. Клинически эти изменения характеризуются припухлостью, болезненностью, главным образом трубчатых костей. Периостит и остит выявляются также рентгенологически, причем остеопериостит большой берцовой кости клинически ничем не отличается от «саблевидных голеней», наблюдаемых при сифилисе. Гипертрофия костей носа — гунду («большой нос») встречается редко. Этот симптом наблюдается исключительно в Африке. Иногда обнаруживаются артриты, бурситы, синовиты. Характерно, что все костно-суставные проявления вторичного периода рецидивируют в течение нескольких месяцев, но в конечном итоге разрешаются бесследно.

Поздние, или третичные, проявления развиваются сразу после вторичного периода либо через несколько лет по истечении латентного периода (в нелеченых случаях до 10 лет). Поздняя фрамбезия проявляется гуммозными поражениями и по клиническим проявлениям и тяжести течения соответствует третичному периоду сифилиса. Пианические гуммы протекают без воспаления кожи. Образовавшиеся язвы имеют округлую или полициклическую форму с инфильтрированными краями. Заживление их идет медленно, с образованием обширных рубцов. В ряде случаев глубокие язвы вызывают фагоденизацию.

В этот же период иногда развивается ладонно-подошвенная кератодермия. В отличие от кератодермии вторичного периода при третичном пиане гиперкератоз более выраженный, более обширный и залегает глубже. В дальнейшем на месте кератодермии развивается стойкая де- или гиперпигментация, иногда незначительная атрофия кожи.

Характерным проявлением позднего периода фрамбезии являются костно-суставные симптомы. В отличие от раннего периода эти проявления нередко приводят к необратимым изменениям костей и суставов. При локализации гуммозного процесса в центральной части лица разрушению подвергаются кости носа, твердое небо и близлежащие мягкие ткани. Этот характерный для пиана симптом называется «гангоза». Остеопериостит костей голеней сопровождается секвестрацией костной ткани и уродующей деформацией голеней — «саблевидные голени». В отличие от полидактилита при ранних стадиях фрамбезии в третичном периоде развивается деформирующий монодактилит. Как и при сифилисе, в позднем периоде может наблюдаться синдром Луща—Жансельма: наличие уплотненных опухолевидных образований размером от горошины до мандарина, локализующихся обычно в области разгибательных поверхностей локтевых и коленных суставов. В отличие от сифилиса в этот период не наблюдается поражения внутренних органов, отсутствуют врожденные формы заболевания.

Диагноз. При постановке диагноза учитывают характерную клиническую картину болезни: экстрагенитальная локализация пиани-ческого шанкра, сопутствующий лимфаденит (первичный период); пианомы, пианиды, остеопериоститы, гунду, полидактилиты (вторичная, или ранняя, фрамбезия); деформирующие костно-суставные изменения, «саблевидные голени», гангозы, гуммозные, бугорковые высыпания, отсутствие висцеральных поражений (третичный период, или поздняя фрамбезия). Лабораторная диагностика фрамбезии не отличается от таковой при сифилисе (обнаружение трепонем в темном поле, положительные серологические реакции на сифилис). При гистологическом исследовании первичного аффекта выявляются акантоз, папилломатоз, интраэпидермальное скопление нейтрофилов з виде микроабсцессов. В дерме обнаруживаются плазматические клетки, встречаются эозинофилы, нейтрофилы, лимфоциты, гистиоциты и фибробласты. В отличие от сифилиса при пиане не бывает эндоваскулита. Гистопатология пианом существенно не отличается от таковой широких кондилом. Гуммозные, язвенные проявления пиана не отличаются от сифилитических.

БЕДЖЕЛЬ

Беджель – хроническое инфекционное заболевание кожи, костей и хрящей у детей преимущественно в возрасте от 2 до 15 лет. Распространенный главным образом в странах Ближнего Востока (Ирак, Иран, Иордания и др.), степных, пустынных районах Африки (Мавритания, Сенегал, Нигер, Мали, Верхняя Вольта и др.) и Северной Австралии. На африканском континенте беджель наиболее часто встречается у кочевников (туареги, беллахи, пель).

Этиология и патогенез. Возбудитель – Tr. pallidum subsp. endemicum. Передается при прямом контакте через кожу, поцелуи, через посуду. Распространению заболевания способствует низкий санитарно-гигиенический уровень населения, особенно некоторых кочевых племен.

Клиническая картина. Первичные поражения обычно просматриваются. Для вторичного периода характерны высыпания

похожие на вторичные сифилиды, но сохраняются они значительно длительнее (8-12 месяцев). Третичный период развивается через 6 месяцев – несколько лет после инокуляции возбудителя. Характерны гуммозные поражения кожи, которые могут изъязвляться, и костей. Изменения костей связаны с деструкцией твердого нёба и носовой перегородки.

Проявления беджеля напоминают клинические проявления сифилиса, но в отличие от последнего при беджеле отсутствуют первичные, висцеральные проявления, врожденная форма (см. табл. 5). Различают ранние и поздние симптомы беджеля. Ранний период начинается сразу после инкубационного, длящегося от нескольких недель до 3 мес. Минуя первичные проявления, появляются папулезные высыпания типа эрозивных папул и широких кондилом, локализующихся главным образом на слизистой оболочке рта, половых органов, вокруг заднего прохода. Высыпания на слизистых оболочках представлены округлыми или овальными, легко кровоточащими при дотрагивании эрозиями. Постепенно в основании и по краям эрозий формируется мягкий инфильтрат, сами эрозии покрываются сероватой пленкой. Иногда на эрозиях развиваются папилломатозные вегетирующие разрастания. Высыпания могут локализоваться также в межъягодичной складке, венечной борозде, комиссурах больших и малых половых губ, на промежности. Сыпь нередко носит характер кондиломатозных разрастаний. В складках подмышечных, паховых, локтевых, подколенных областей поражение может быть в виде папилломатозных разрастаний.

Иногда кожные высыпания эритематовезикулезного характера в виде дуг, колец напоминают микотические поражения гладкой кожи, мигрирующую эритему. Все ранние проявления беджеля заразные, в высыпаниях содержится большое количество бледных трепонем. Помимо высыпаний на слизистых оболочках и коже, при раннем беджеле могут наблюдаться остеиты, остеопериоститы. Наиболее часто поражаются длинные трубчатые кости голеней и предплечий. Как и при раннем пиане, костная симптоматика раннего беджеля разрешается бесследно, без деструктивных изменений и рубцевания.

Общее состояние при раннем беджеле не страдает, патологии в цереброспинальной жидкости не обнаруживается.

Диагноз. Ранний беджель диагностируют на основании приведенных ранее клинических проявлений заболевания, обнаружения бледных трепонем и положительных серологических реакций на сифилис, которые позитивны при раннем беджеле в 100\% случаев.

Поздний беджель проявляется через несколько лет после начала заболевания. Латентный период длительный, единственным проявлением его являются положительные серологические реакции. Симптомы позднего беджеля не отличаются от симптомов третичного сифилиса. В этот период могут быть бугорковые и гуммозные высыпания. Особенностью бугорковых высыпаний можно считать наличие псориазиформного гиперкератоза на поверхности бугорков, маскирующего истинный характер эффлоресценций. Поставить правильный диагноз помогают положительные серологические реакции и наличие других клинических проявлений беджеля. При позднем беджеле могут наблюдаться остеиты, периоститы, гуммозное поражение костной ткани, сопровождающееся их деструкцией. Как и у больных фрамбезией, в этот период могут развиться околосуставные узловатости, участки де- и гиперпигментации кожи. Необходимо иметь в виду, что при беджеле не поражаются нервная и сердечно-сосудистая системы, а также не встречается врожденных форм заболевания. Диагноз позднего беджеля ставят на основании описанной симптоматики и положительных серологических реакций на сифилис.

 

ПИНТА

Пинта – заболевание, поражающее только кожу лиц любого возраста, которое встречается исключительно в Западном полушарии.

Этиология и патогенез. Возбудитель – Tr. Carateum. Заболевание передается преимущественно в семье путем прямого и непрямого контакта – как при непосредственном контакте с больными, так и через насекомых, которые могут быть переносчиками этой инфекции. Это подтверждается тем, что пинта чаще встречается у населения, живущего по берегам рек, в водах которых размножаются личинки насекомых. В этих районах пинта поражает одинаково часто как взрослых, так и детей, в то время как в других районах чаще болеют дети. Особенно велика роль насекомых в передаче трепонематоза в Колумбии, Венесуэле, Эквадоре, Перу, Бразилии, Боливии, Гондурасе, Сальвадоре и Никарагуа.

Клиническая картина. Инкубационный период 7 дней – 2 месяца. Первичный период характеризуется плоской зудящей папулой на месте инокуляции возбудителя. В течение месяца элементы увеличиваются в диаметре до 10-12,5 см.

Вторичный период развивается через месяцы и годы после начала заболевания. Для него характерны так называемые пинтиды, представляющие собой мелкие папулы, покрытые чешуйками, склонные к слиянию и образованию псориазиформных папул.

Для третичного периода характерно развитие депигментированных очагов на теле, кистях, локтях и лодыжках.

Основными клиническими проявлениями трепонематоза являются дисхромии и гиперкератоз, что объясняется локализацией трепонем в клетках росткового слоя эпидермиса и в дальнейшем исчезновением меланоцитов. Заражение происходит через кожу открытых участков тела. Инкубационный период длится 6—8 нед, затем на месте входных ворот появляется небольшая папула, которая в течение нескольких недель трансформируется в эритематосквамозное пятно. Центральная часть этого элемента запавшая, окружена возвышающимся валиком.

Клинические проявления первичного аффекта не отличаются от симптомов поверхностной трихофитии гладкой кожи. Через несколько месяцев первичный аффект разрешается самопроизвольно, на его месте остается атрофическая дисхромия кожи. Затем наступает вторичный период, характеризующийся диссеминацией ахроматичных и гиперхромных пятен. Гиперхромные пятна имеют голубоватый оттенок, а гипохромные — розоватый. Указанные пигментные и ахроматические высыпания (пинтиды) формируют диссеминированную лейкомеланодермию. Характерно, что пинтиды всегда сопровождаются сильным зудом. Затем свежие высыпания перестают появляться и наступает длительный (в течение нескольких лет) латентный период. Скоро трепонематоз переходит в третью стадию — третичную, или позднюю, пинту. Поздняя пинта проявляется ви-тилигоподобными участками поверхностной атрофии кожи. Излюбленная локализация этих высыпаний — верхние и нижние конечности. Эти дисхромии стойкие, остаются на всю жизнь. Характерно, что при пинте не бывает поражения внутренних органов и костей, а также врожденных форм болезни.

Диагностика невенерических трепонематозов основана на клинической картине и данных лабораторного исследования (серодиагностика невенерических трепонематозов идентична серодиагностике венерического сифилиса и не позволяет различить фрамбезию, беджель, пинту и сифилис).