МЕТОДИЧЕСКОЕ УКАЗАНИЕ ДЛЯ СТУДЕНТОВ 5 КУРСА

МЕТОДИЧЕСКОЕ УКАЗАНИЕ ДЛЯ СТУДЕНТОВ 5 КУРСА

фармацевтического факультета

ЗАНЯТИЕ № 7 (ПРАКТИЧЕСКОЕ – 6 час.)

Тема: ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ неэквивалентность ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

 

Цель занятия: Изучить влияние технологических факторов на скорость растворения таблеток и стабильность инъекционных растворов, а также терапевтической эквивалентности лекарственных препаратов.

 

Профессиональная ориентация студентов: Эффективность лечебного средства зависит не только от природы и дозы лекарственного вещества, но и от технологических стадий его производства и оборудования. Важное значение имеет и человеческий фактор. Технологический процесс обусловливает выбор вспомогательных веществ, придающих лекарственному препарату определены свойства. Он также связан с лекарственной формой. Поэтому необходимо рассматривать их во взаимосвязи друг с другом.

В качестве объекта исследования по изучению влияния технологического процесса на фармакотерапию были выбраны таблетки, теперь наиболее часто применяемой лекарственной форме (40% всех ГЛС). Их эффективность напрямую зависит от технологии. Сложный многостадийный процесс изготовления таблеток, сопровождаемый различными технологическими операциями, способен изменить скорость и полноту высвобождения действующих веществ. Для получения таблеток используются различные вспомогательные вещества. Они добавляют таблетированной массе определенные свойства, обеспечивают точность ее дозирования, необходимую прочность и распад. Определение растворимости таблеток начальный этап изучения биологической доступности.Таблетки, как правило, является устойчивой при сохранении врачебной форме, чего нельзя сказать о жидкие лекарственные препараты, в частности, о растворах для инъекций, приготовление которых часто требует стабилизации.

Последние были выбраны в качестве объекта исследования стабильности лекарственных препаратов.

При нарушении их технологии, условий и сроков хранения возможные изменения лекарственных веществ, что в свою очередь, приводит к снижению терапевтической активности и проявление, в ряде случаев, отрицательного побочного действия.

Терапевтическая неэквивалентность характерна как для лекарственных препаратов, выпускаемых различными фирмами, так и серий тех же фирм. Наличие терапевтической неэквивалентности не укладывается в обычные представления и противоречит тем, что количества действующих веществ в идентичных лекарственных формах, изготовленных различными производителями при соответствии их требованиям технической научной документации, оказывают различное терапевтический эффект. Контроль биоэквивалентности является одной из основных проблем фармации из-за поступления в страны огромного количества генериков (фармацевтических аналогов).

 

Методика выполнения практической работы.

Работа № 1. Установить терапевтическую неэквивалентность таблеток, выпускаемых различными производителями, методом «in vitro».

Найти влияние некоторых фармацевтических факторов на терапевтическую эквивалентность лекарственных препаратов можно, используя наиболее распространенные лекарства, такой как таблетки анальгина, стрептоцида, ацетилсалициловой кислоты, выпускаемых различными производителями.

Объектом исследования служат таблетки анальгина по 0,5, выпускаемых фирмой «Дарница», «Здоровье», «Красная звезда», таблетки ацетилсалициловой кислоты фирм «Вауеr», «Дарница» по 0,5, стрептоцид по 0, 3 – «Дарница» и «Фармак». В опытах можно использовать таблетки, выпускаются и другими фирмами.

Перед выполнением задачи ознакомьтесь с алгоритмом экспериментальной работы (приложение 14).

Приложение 14

АЛГОРИТМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ РАБОТЫ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РАСТВОРИМОСТИ исследуемый ТАБЛЕТОК

 

 

Методика экспериментальной работы изложена в занятии № 3, работа   № 1.

Изучение растворения и высвобождения действующего вещества из таблеток анальгина, выпускаемых различными производителями

Содержание анальгина (Х,%) рассчитывают по формуле:

Х = (V · T · КП · 100) / 5, где

V – количество 0,1 н раствора йода, израсходованного на титрование анализируемого препарата (мл);

Т – титр 0,1 н раствора йода, 1 мл 0,1 н раствора йода соответствует 0,01667 анальгина;

КП – поправочный коэффициент.

Время растворения твердых лекарственных форм и процент высвобождения действующих веществ внесите в таблицу

Пример расчета

1. Время полного растворения, в мин.:

(25 + 26 + 26 + 26 + 27): 5 = 26 (мин).

Расчет ошибки опыта:

Количественное определение анальгина

Растворы, полученные при определении теста «растворение», фильтруют, отмеряют 2,5 мл фильтраты, помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят до объема спиртом этиловым 95%, переносят в коническую колбу емкостью 100 мл и титруют 0,1 н раствором йода до появления желтой окраски йода, не исчезает в течение 30 секунд.

Количественное определение кислоты ацетилсалициловой

5 мл фильтрата взбалтывают с 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта этилового 95% в течение 10 мин. Жидкость охлаждают при температуре 8-10 ° С и титруют с тем же индикатором 0,1 н раствором натрия гидроксида до розового окрашивания. Содержание кислоты ацетилсалициловой рассчитывают по формуле, описанной выше. Титр 0,1 н раствора натрия гидроксида 0,01802 г.

Количественное определение стрептоцида

В мерную колбу на 100 мл вносят 10 мл анализируемого фильтрата и 2,5 мл 10% раствора кислоты соляной. Колбу помещают на 10 минут в ванну со льдом, затем добавляют 5 мл 0,5% свежеприготовленного раствора натрия нитрата. Через 5 минут добавляют 1 г мочевины и взбалтывают. После 15 минут добавляют 1 мл 0,5% свежеприготовленного раствора тимола в 10% растворе натрия гидроксида и 5 мл 10% раствора натрия гидроксида. Через 10 минут доводят водой до метки. Содержание стрептоцида определяют на фотоэлектроколориметре КФМ-Ц-2 с синим светофильтром (максимум пропускания 400 нм) в кювете с толщиной слоя 10 г. В качестве контроля используют смесь всех реактивов, обработанную аналогично.

Фотоэлектроколориметр КФМ-Ц-2 предварительно калибруют по стандартному растворе.

Приготовление стандартного раствора

В мерную колбу на 1000 мл вносят 0,05 м (точное навески) стрептоцида, растворяют в 10 мл спирта и доводят водой до метки. В 1 мл раствора содержится 0,05 мг стрептоцида.

В мерную колбу на 100 мл вносят 6 мл приготовленного раствора стрептоцида, добавляют 4 мл дистиллированной воды и далее поступают, как указанный в методике количественного определения стрептоцида.

Приготовленный стандартный раствор используют для калибровки Фотоэлектроколориметр   КФМ-Ц-2, устанавливая масштаб таким образом, чтобы показания прибора численно совпадали с концентрацией вещества в границах ± 2 единицы счета (0,3 ± 0,02).

Расчет количества стрептоцида (Х, мг), освободившегося от таблеток за определенный промежуток времени, проводят по формуле:

Х = (С _n * V ₁₎ / V) + Y _n

С _n         – Содержание стрептоцида в 2 мл диализата найденное показаниям прибора (мг);

V          – Объем диализата, отобранного для анализа (мл);

V ₁         – Объем диализата в ячейки камеры (мл);

Y _n         – Количество стрептоцида, содержащейся в ранее отобранном диализате (мг) Y ₁ = 0, Y ₂ = C _1, Y ₃ = C ₁ + C _2.

Полученные данные внесите в табл. № 17.

Таблица 17

Динамика растворения таблеток анальгина, ацетилсалициловой кислоты, стрептоцида и их высвобождение

№ п / п	Наименование препарата	Время полного растворения, с	Время отбора проб, с	Высвобождение действующего вещества,%
1.	Таблетки анальгина по 0,5 фирмы «Дарница»
2.	Таблетки анальгина по 0,5 фирмы «Здоровье»
3.	Таблетки аспирина по 0,5 фирмы «Красная звезда»
4.	Таблетки аспирина по 0,5 фирмы «Bayer»
5.	Таблетки ацетилсалициловой кислоты по 0,5 фирмы «Дарница»
6.	Таблетки стрептоцида 0,3 ОАО «Фармак»
7.	Таблетки стрептоцида 0,3 фирмы «Дарница»

После выполнения задачи сформулируйте выводы о наличии терапевтической неэквивалентности в лекарственных препаратов, выпускаемых различными производителями.

Работа 2. Установить терапевтическую неэквивалентность мазей, выпускаемых различными производителями, методом «in vitro».

Найти влияние некоторых фармацевтических факторов на терапевтическую эквивалентность лекарственных препаратов можно, используя наиболее распространенные лекарства, такой как мазь стрептоцидовые, левомицетиновый, борная выпускаемых различными производителями.

Объектом исследования служат мазь стрептоцидовая 10% выпускаемых различными производителями «Тернофарм», «Виола», «Красная звезда». В опытах можно использовать мази, выпускаемые и другими производителями.

Перед выполнением задачи ознакомьтесь с алгоритмом экспериментальной работы.

Алгоритм экспериментальной работы по определению ступення дисперсности стрептоцида на процесс его высвобождения из мазей методом «агаровых пластинок».

	Приготовленный агаровых пластинок в чашках Петри				Взять мазей Стрептоцидовая 10%
		Внесение мазей в лунки агаровых пластинок
		Инкубирование чашек Петри при температуре 37 ° С в термостате
		Измерение диаметра окрашенной   зоны через 0,5, 1, 2 часа от начала опыта
		Статистическая обработка результатов опыта
			Выводы

Приготовление геля и агаровых пластинок

Агаровой гель готовят 2% концентрации в предварительно старований   стеклянном сосуде, плотно закрытой крышкой. Измельченный агар (ГОСТ 6470 – 53) заливают очищенной водой и оставляют на 30 мин для набухания.

Разбухший агар нагревают   до кипения, доводят до необходимой массы и к теплому геля добавляют 5% реактива Эрлиха. Соединение реактива Эрлиха: п-диметиламинобензальдегида 0,5 млконцентрированной серной кислоты и этанола 95% по 15 мл, н-бутанола – 90 мл.

Приготовленный агарный гель разливают в чашки Петри (диаметр 98 – 100 мм , Высота 20 мм ), Расставляют на столе, предварительно выверенному по горизонтальном уровне с помощью ватерпаса. Агар разливают в чашки двумя порциями по 10 и 15 мл. После застывания первой порции агара на ее поверхность в каждую чашку помещают три цилиндра из нержавеющей стали или стекла (внешний диаметр 8 мм , Высота до 10 мм ) И заливают второй слой агара. После застывания агара цилиндр осторожно вынимают.

Определение скорости высвобождения лекарственных веществ из мазей

Мази, содержащие лекарственное вещество с разной степенью дисперсности, помещают в лунки двух чашек с агаром. Чашки нумеруют или указывают степень измельчения. Мазь в лунки вносят с помощью стеклянной палочки, осуществляя контроль за тем, чтобы был хороший контакт с агаром. Чашки помещают в термостат с температурой 37 ° С.

Лекарственное вещество, высвобождаясь из мази, диффундирует в агарный гель, взаимодействуя с реактивом Эрлиха образуя окрашенную зону. Через 0,5, 1 и 2 часа с помощью линейки измеряют диаметр окрашенной зоны. В случае образования эллипса измеряют больший и меньший диаметр и определяют среднее значение диаметра окрашенной зоны.

Статистическую обработку полученных результатов проводят по методу Монцевичюте-Ерингене (1964).

Ошибку среднего арифметического вычисляют по формуле:

т = ± Σ а • k,    где

т – ошибка среднего арифметического диаметров окрашенных зон;

Σ – сумма;

а – цифровые значения отклонений диаметров зон среднего арифметического со знаком «плюс» или «минус»;

k – величина, зависящая от числа вариантов, то есть количества опытов (п) для каждого образца мази (табл. 1).

Пример расчета

МАЗЬ № 1 (ds = 0, l мм)

1:00

d ₁ = 20 мм

d ₂ = 20 мм                             d _сp = 20,3 (мм)

d ₃ = 21 мм

№ опыта	A
1	20,3 – 20 = +0,3
2	20,3 – 20 = +0,3
3	20,3 – 21 = – 0,7

a = + 0,3 + +0,3 + – 0,7 = l, 3 (значение «а» добавляются без учета алгебраических знаков)

m = 1,3 • 0,29004 = 0,38

d = 20,3 ± 0,38 (мм)

Полученные данные внесите в табл. № 1

Таблица 1

Диффузия стрептоцида с различной степенью дисперсности из мазей

 

Программа самоподготовки студентов

1.     Физико-химические свойства лекарственных препаратов.

2.       Таблетки. Технология и методы изготовления.

3.       Стабилизаторы принципы их подбора.

4.       Мази. Технология и методы получения мазей. Гомогенизация.

5.       Принцип подбора мазевых основ.

 

Семинарское обсуждение теоретических вопросов

1.       Влияние технологического фактора на фармакотерапию.

2.       Понятие стабильности лекарственных препаратов. Роль стабилизаторов в технологии лекарственных препаратов.

3.       Влияние условий хранения лекарственных препаратов на их стабильность.

4.       Методы определения стабильности инъекционных растворов.

5.       Понятие о терапевтической неэквивалентность лекарственных препаратов и причины ее возникновения.

 

Тестовые задания и ситуационные задачи.

Выберите из ниже перечисленных препаратов хорошо растворимые в воде: норсульфазол, стрептоцид, стрептоцид растворимый, ампициллин, ампициллин натриевая соль, эритромицин, эритромицина фосфат, леворин, леворина натриевая соль, барбитал, барбитал-натрий.

Добавить необходимость выпуска этих препаратов.

 

Исходный уровень знаний и умений проверяется путем решения ситуационных задач по каждой теме, ответами на тесты и конструктивные вопросы.

 

Студент должен знать:

1.      Физико-химические свойства лекарственных препаратов и уметь находить их в НТД и справочной литературе.

2.      Знать методы приготовления таблеток и лекарственных форм для инъекций.

 

Студент должен уметь:

1.      Использовать общие принципы подбора стабилизаторов.

2.      Проводить количественное определение исследуемых препаратов.

3.      Уметь пользоваться методом “in vitro” с целью изучения роли стабилизатора в растворе новокаина для инъекций и терапевтической эквивалентности лекарственных препаратов.

4.      Пользоваться методом “искусственного старения” инъекционных растворов.

5.      Уметь пользоваться методами “in vivo” для изучения роли стабилизатора в растворе новокаина для инъекций и терапевтической эквивалентности лекарственных препаратов.

6.      Обобщать полученные данные и делать выводы о влиянии фармацевтических факторов на растворение и терапевтическую эквивалентность таблеток анальгина, стрептоцида, ацетилсалициловой кислоты, а также стабильность раствора новокаина для инъекций.

 

Правильные ответы на тесты и ситуационные задачи:

Хорошо растворимыми в воде есть соли.

 

Источники информации:

А – Основные:

1.     Биофармация: Учеб. для студ. фарм. вузов и фак. / А. И. Тихонов, Т.Г. Ярных, И.А. Зупанец, А. С. Данькевич, Е. Е. Богуцкая, Н.В. Бездетко, Ю. Н. Азаренко; Под ред. А. И. Тихонова. – М.: Изд-во НФаУ; Золотые страницы, 2003. – 240 с.: 18 ил.

2.     А.И.Тихонов, Е.Е. Богуцкая, Т.Г. Ярных и др.; Под ред. А.И. Тихонова. – М.: ИздGво НФаУ: Золотые станицы, 2003. – 96 с.

3.     Тихонов А.И., Ярных Т.Г., Зупанец Т.Г. и др.. Биофармация – М.: “Золотые страницы», 2010. – 238 с.

4.     Фармацевтические и медико-биологические аспекты лекарств / И.М. Перцев, О.Ф. Пиминов, Н.Н. Слободянюк и др.. – Винница, 2007.

5.     Конспекты лекций

6.     Материалы для подготовки к лекциям Web-страницы

7.     Материалы для подготовки к практическим занятиям Web-страницы

8.     Презентации лекций Web-страницы кафедры http://intranet.tdmu.edu.ua/index.php?dir_name=kafedra&file_name=lectures1.php

В – Дополнительные:

1.     Вавилова Н. М.: Эверест. – 1994.-Ч.1. -507 С., Ч.2 – 475 с.

2.     Долинин И. – 1992. – № 1. – С. 16-18.

3.     Травник: Рецепты народной медицины / Сост. Б. Воробьев. – М.: МЧФ “Грампус Эйт”; Ростов-на-Дону: Изд-во “Феникс”, 1997. – 496 с.

4.     Украинский гомеопатический ежегодник / Под ред. А. П. Иванива. – М.: Черномор, 1998. – Т. 1. – 200 с.

5.     Клинченко Н. – 1992. – 322 с.

 

Методическое указание составили – проф. Соколова Л.В., доц. Козырь Г.Р., ас. Бердей И.И.

 

Обсуждены и утверждены на заседании кафедры технологии лекарств

  от 27 .0 8 .201 3 г. протокол № 1