Объединение микроорганизмов в группу анаэробных имеет лишь одну основу — анаэробный тип дыхания

Возбудители анаэробных инфекций. Микробиологическая диагностика  анаэробных инфекций. Возбудители зоонозных инфекций. Микробиологическая диагностика зоонозных инфекций.

 

Объединение микроорганизмов в группу анаэробных имеет лишь одну основу — анаэробный тип дыхания. Таксономическое положение анаэробных бактерий, вызывающих заболевания у че­ловека, различно.

 

1. Грамположительные  образующие споры  анаэробы — клостридии — включены   в   род   Clostridium,   возбудители   столбняка — С.    tetani,   ботулизма — С.   botulinum   и   группа    воз­будителей анаэробной раневой инфекции  (газовой гангрены) —С. perfringens, С. novyi, С. septicum и др.

 

2. Грамотрицательные не образующие спор анаэробы, вызывающие у человека воспалительные процессы различной локали­зации, — бактероиды   образуют   род   Bacteroides   и   фузобактерии — род Fusobacterium.

 

3. Грамположительные не образующие спор анаэробные палочки    включены    в    роды    Propionibacterium    и    Eubacterium.
При   предрасполагающих   для   возникновения   патологического процесса  условиях вызывают гнойно-воспалительные  заболева­ния в органах и тканях.

 

4. Грамположительные шаровидные не образующие спор бак­терии составляют роды Peptococcus и Peptostreptococcus.  Ана­эробные   кокки   способны   вызывать   воспалительные   процессы чаще всего во внутренних органах.

 

5. Грамотрицательные не образующие спор шаровидные бак­терии   включены   в   род   Veillonella.   Эти   бактерии   вызывают гнойно-воспалительные процессы обычно в ассоциации с другими микроорганизмами.

 

КЛОСТРИДИИ

Клостридии столбняка

Возбудитель столбняка — Clostridium tetani — был обнару­жен в 1883 г. Н. Д. Монастырским и в 1884 г. А. Николайером. Чистая культура получена в 1889 г. С. Китазато.

 

 

 

Морфология,     физиология.

Клостридии столбняка — грам-положительные прямые палоч­ки, размером 2,5—5X0,5—1,0 мкм. Образуют споры круглой формы, расположенные терми­нально. Размеры спор превы­шают поперечник бактерии, что придает клетке со спорой вид барабанной палочки. Перитрихи, капсулу не образу­ют. Строгие анаэробы, культи­вируются     в     безкислородных условиях на сахарном кровяном агаре, где образуют на 2—4-й день роста нежные прозрачные или несколько сероватые колонии с компактным центром и зоной гемолиза вокруг колоний. В высо­ком столбике агара С. tetani дают колонии двух видов: похожие на пушинку с плотным центром (S-форма) и чечевицеподобные (R-форма). В среде Китта — Тароцци эги анаэробы образуют равномерную муть.

 

C. tetani

 

Колонии C. tetani

 

 

С. tetani не обладают сахаролитическими ферментами, не образуют каталазу и оксидазу, протеолитические свойства сла­бо выражены.

Антигены. С. tetani имеют О- и Н-антигены. По Н-анти-генам дифференцируются на 10 сероваров. Но, что сущест­венно, все они продуцируют идентичный по антигенным свойст­вам экзотоксин.

Экология и распространение. Средой обитания для клост­ридии столбняка является кишечник животных и человека. С испражнениями вегетативные клетки попадают в почву, где обра­зуют споры, сохраняющиеся в течение длительных сроков. Столб­няк развивается при наличии ран, загрязненных землей, с ко­торой клостридии попадают на раневую поверхность. Особенно опасны рваные и колотые раны, в которых создаются анаэроб­ные условия.

У новорожденных столбняк возникает вследствие заражения через пупочный канатик, а у рожениц — через слизистую оболоч­ку матки.

Патогенность возбудителя и патогенез столбняка. С. tetani продуцируют сильные токсины, действие которых на организм и ткани больного определяют особенности патогенеза и клиническую картину болезни. Токсин представляет собой белок, выде­ляющийся из продуцирующей его клетки и освобождающийся при аутолизе бактерий. По механизму действия различают тетаноспазмин,  вызывающий  непосредственное прямое поражение нервной ткани, следствием чего является спазматическое сокращение поперечнополосатых мышц, и тетанолизин — секретируемый токсин, лизирующий эритроциты;

В анаэробных условиях, чаще при получении колотых ран, споры С. tetani прорастают, микроорганизмы размножаются и выделяют образуемые ими токсины. Из места размножения бак­терий токсины поступают в кровь, достигают нервной ткани и вызывают ее поражение — появляются клинические симптомы болезни. У человека столбняк развивается по так называемому нисходящему типу: первыми симптомами (вне зависимости от места проникновения и размножения микроорганизмов) являют­ся тонические сокращения жевательных и мимических мышц — появляется «сардоническая» улыбка, а затем — тоническое напряжение и спазм мышц затылка, спины. Тело человека во время приступа сокращения мышц принимают вид дуги. Смерть наступает от асфиксии и поражения жизненно важных центров при полном сохранении сознания.

 

 

 

 

Клинические проявления при поражении столбнячным токсином

 

 

Лабораторная диагностика. Выраженность картины болезни обычно не требует лабораторного подтверждения клинического диагноза. Исследования на наличие возбудителя столбняка, его спор проводятся с целью проверки стерильности перевязочного материала, а также препаратов, предназначенных для паренте­рального введения. Противоэпидемический надзор за объектами окружающей среды включает исследование почв на наличие и количественное содержание спор С. tetani в местах размещения детских садов, санаториев, спортивных площадок и т. д.

При лабораторных исследованиях материал делят на две части: из одной делают посевы и питательные среды для полу­чения культуры возбудителя, другую используют для биологичес­кой пробы — вводят внутримышечно мышам в бедро задней лап­ки. У мышей, получивших исследуемый материал, содержащий С. tetani или токсин из питательной среды, где размножались микроорганизмы, развивается столбняк, протекающий по типу восходящего, — сначала наступает судорожное сокращение мышц конечностей, хвоста, а затем туловища. Мыши, получив­шие исследуемый материал с противостолбнячной сывороткой, остаются здоровыми.

Профилактика и лечение. Специфическую профилактику столбняка проводят путем активной иммунизации столбнячным анатоксином, который входит как компонент в вакцины АКДС и АДС. АКДС и АДС вакцинами иммунизируют детей с 3-месячно­го возраста по разработанной схеме, предусматривающей ревак­цинации. Антитоксический противостолбнячный иммунитет соз­дается и у военнослужащих, некоторых категорий работников (сельскохозяйственного труда, строителей, мелиораторов), дея­тельность которых проходит в зонах с высоким инфицированием почвы спорами С. tetani.

Людям, получившим травмы, сразу после хирургической обработки ран вводят столбнячный анатоксин  (для стимуляции

активного иммунитета)   и противостолбнячный иммуноглобулин для создания быстрого пассивного иммунитета.

Антитоксическую противостолбнячную сыворотку (или имму­ноглобулин) используют и для лечения больных столбняком (в больших дозах). Более эффективен противостолбнячный иммуно­глобулин, полученный от людей, иммунизированных анатоксином. Параллельно с введением готовых антител против токсинов С. tetani применяют антибиотики (пенициллин, цефалоспорин) для предупреждения вторичной инфекции.

 

 

Клостридии анаэробной раневой инфекции

Анаэробная раневая инфекция — полимикробное заболевание. В его возникновении и развитии принимают участие несколько видов клостридии в ассоциации с аэробными бактериями (стафилококками, стрептококками и др., легко инфицирующими раны). Основными возбудителями анаэробной раневой инфекции являются С. perfringens, С. novyi, С. septicum. В патогенезе заболевания участвуют и другие клостридии — С. histolyticum, С. sordellii, С. bifermentans, С. fallax, а также непатоген­ные для человека — С. sporogenes, С. tertium.

Основной возбудитель анаэробной раневой инфекции С. per­fringens чаще других обнаруживается в патологических очагах. Микроорганизм был открыт в 1892 г. У. Уелчем и М. Нетталом, а его способность вызывать газовую гангрену установлена О. Лиденталем. Кроме анаэробной раневой инфекции (газовой гангрены), он может вызвать пищевую токсикоинфекцию, если попадает в пищевые продукты и размножается в них.

Морфология, физиология. Все клостридии — возбудители ана­эробной раневой инфекции — крупные грамположительные па­лочки с субтерминально расположенными спорами.

 

 

С. perfringens имеет размеры 3—9 X 1 —1,3 мкм, не обладает жгутиками. В организме животных и человека образует капсу­лу, которая утрачивается при пересевах на питательные среды.

С. novyi — наиболее крупные из всех возбудителей ана­эробной инфекции палочки, размерами 10—22 X 1—2,5 мкм, прямые или слегка изогнутые. Капсул не образуют, имеют жгутики, как и все остальные возбудители этого заболевания.

С. septicum — полиморфные, размерами 3—14 X 1 —1,5 мкм, в культурах могут иметь нитевидные формы.

Остальные клостридии — возбудители анаэробной раневой инфекции — небольшие палочки, размерами 1,5—3 X 1 —1,5 мкм.

Культивируют клостридии в средах, разработанных для раз­множения анаэробных споровых микроорганизмов. Чувствитель­ность к кислороду у этих бактерий различна. Если С. perfringens (равно как и С. histolyticum и С. sordellii) могут расти и в присутствии небольшого количества кислорода, то С. novyi и

С. septicum не выносят даже малого количества кислорода (строгие анаэробы).

Клостридии дифференцируют по культуральным признакам. На сахарно-кровяном агаре С. perfringens образует гладкие сероватые с ровными краями и плотным возвышением в центре колонии; С. novyi — шероховатые колонии с признаками гемо­лиза; С. septicum образует сплошной нежный налет, перепле­тающиеся нити на фоне гемолиза, С. histolyticum — небольшие блестящие колонии с ровными краями и небольшой зоной ге­молиза вокруг, С. sordellii — сероватые колонии с небольшим гемолизом.

В жидких средах клостридии дают диффузное помутнение, затем хлопьями оседают на дно пробирки. С. perfringens в сре­де Китта — Тароцци растет с обильным газообразованием, но более характерен тест в молоке, которое при культивирова­нии микроорганизма быстро и интенсивно свертывается. Образу­ется при этом губка, пронизанная пузырьками газов, подбрасы­вается под самую пробку пробирки.

В столбике агара колонии С. perfringens выглядят либо в виде комочков ваты (R-форма), либо в виде чечевицы (S-форма). С. novyi образует колонии, похожие на нежные хлопья ваты, С. septicum — чечевицеобразные колонии.

Ферментативная активность клостридии различна у отдель­ных видов, что используется в дифференциации. С. perfrin­gens обладает большим набором сахаролитических ферментов сбраживает многие углеводы с образованием кислоты и газов, протеолитические ферменты разжижают желатину, свернутую сыворотку. При росте в питательном бульоне образуется масля­ная, уксусная кислоты и большое количество газов (СО2, FbS, NH₃).

С. novyi сбраживает небольшое число углеводов, разжижает желатину, но не свернутый белок, не образует сероводорода и уреазы.

С. septicum обладает выраженной сахаролитической актив­ностью и разжижает желатину, но не гидролизует казеин, не образует индола.

С. histolyticum не ферментирует углеводы, но обладает выраженной протеолитической активностью: разжижает желати­ну, гидролизует казеин, кусочки мяса в жидкой среде быстро лизируются и при этом образуется большое количество сероводорода.

С. sordellii ферментирует некоторые углеводы, обладает протеолитической активностью: разжижает желатину, свернутую сыворотку, гидролизует казеин, образует индол.

Антигены. Изучение микробных антигенов всех клостридии — возбудителей анаэробной раневой инфекции при дифференциа­ции выделенных культур не нашло практического использова­ния. Определяют серовары С. perfringens (А, В, С, D, E, F), отличающиеся по антигенным свойствам вырабатываемого ими

токсина, и биовары С. novyi (различают 3 биовара по биологи­ческим свойствам и токсинам), поскольку в патологии человека значение вариантов этих видов неодинаково.

Экология и распространение. Естественной средой обитания клостридии является кишечник животных, особенно травоядных и свиней. С фекалиями эти микроорганизмы попадают в почву, где и сохраняются в виде спор или размножаются при благопри­ятных условиях. Возбудители анаэробной раневой инфекции, кро­ме почвы, обнаруживаются на различных предметах окружаю­щей среды. Заражение происходит через почву и инфицирова-ные предметы (белье, одежда и др.).

Развитие анаэробной раневой инфекции зависит от характера ранения (чаще при осколочных ранах, с массивным поврежде­нием мышечных тканей, чаще нижних конечностей), а также сро­ков и качества оказанной хирургической помощи. Иногда ана­эробная инфекция возникает как осложнение хирургических опе­раций, внебольничных абортов, когда возбудителей заносят в раны нестерильными инструментами.

Устойчивость вегетативных форм клостридии к действию фак­торов окружающей среды равноценна таковой других видов бактерий. Споры клостридии отличаются большой устойчивостью к различным воздействиям. Так, споры С. perfringens поги­бают при кипячении лишь в течение 15—30 мин (особенно споры сероваров А и F). Споры С. novyi кипячение выносят в течение 1—2 ч, а в окружающей среде сохраняются до 20—25 лет. Споры С. septicum менее устойчивы к воздействиям фак­торов окружающей среды по сравнению со спорами других кло­стридии — возбудителей анаэробной раневой инфекции, и при ки­пячении погибают в течение нескольких минут.

Патогенность возбудителей и патогенез заболеваний челове­ка. В организм человека возбудители анаэробной раневой инфекции попадают в раны с почвой, кусочками одежды, ин­фицированными этими бактериями или их спорами. Развиваю­щееся заболевание характеризуется быстро наступающим рас­пространенным некрозом и распадом тканей с образованием газов при отсутствии воспалительных явлений и тяжелой инток­сикацией.

Клиническая картина анаэробной раневой инфекции обус­ловлена действием токсинов и ферментов, образующихся при размножении возбудителей в ранах. С. perfringens серовар А, наиболее часто являющийся возбудителем этого заболевания, продуцирует несколько токсинов, основным из которых является а-токсин (фосфолипаза С). Этот белок гидролизует фосфоли-пиды, входящие в состав мембран клеток, оказывая некроти­ческое и гемолитическое действие. Другие токсины (в-гемолизин, лейкоцидин, р-некротизирующий токсин) выделяются клостриди-ями различных сероваров, реже встречающимися в патологиче­ских очагах при анаэробной инфекции. Кроме токсинов, клостри­дии   этого   вида   выделяют   ряд   ферментов,   играющих   роль  в патогенезе: коллагеназу, желатиназу, гиалуронидазу, ДНК-азу, нейраминадазу, протеиназу.

С. novyi (биовары А и В) также образуют несколько типов токсинов. Действие а-токсина на ткани приводит к образо­ванию отека, р-токсин обладает некротической, гемолитической и лецитиназной активнвстью.

С. histolyticum выделяет а-токсин, оказывающий летальное и некротическое действие при прямом повреждении тканей. Этот яд избирательно лизирует клетки поджелудочной железы. Кроме того, клостридии этого вида образуют протеолитические ферменты: желатиназу, протеиназы, разрушающие желатин, казеин, эластин, что проявляется в расплавлении тканей.

В развитии анаэробной раневой инфекции играют роль многие факторы, среди которых большое значение имеет характер раны, состояние организма, интенсивность и характер микробного за­грязнения. Образуемые микроорганизмами токсины и ферменты повреждают соединительную ткань и мышечные волокна, приво­дят к тяжелой общей интоксикации, всасываясь в кровь вместе с продуктами распада тканей.

 

Иммунитет. Восприимчивость к анаэробной раневой инфек­ции связана не только с уровнем антитоксических, антифермен­тных антител. Она зависит от общего состояния организма. Перенесенное заболевание  не  оставляет  прочного  иммунитета.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат кусочки пораженной ткани, взятые при обработке раны, экссудат из раны, кровь. Бактериоскопическое исследование приводится в реакции иммунофлюоресценции с использованием иммунной сыворотки к основным возбудителям анаэробной ране­вой инфекции.

 

 

 

 Бактериологическое исследование позволяет вы­делить возбудителей, идентифицировать их по биологическим свойствам.

 

                                                                  Зоны гемолиза вокруг

                                                                  колоний C. perfringens                    Колонии C. novyi на агаре

 

Дифференциация основных видов патогенных клостридий

Вид	Подвижность	Леци-тиназа	Проте-олиз	Ф е р м е н т а ц и я
				глюкоза	лактоза	манит	крахмал
C. perfringens	–	+	±	+	+	–	+
C. novyi	+	+	–	+	–	–	–
C. septicum	+	–	–	+	+	–	–
C. histolyticum	+	–	+	–	–	–	–
C. sordellii	+	+	+	+	–	–	–
C. bifermentans	+	–	+	+	–	–	–
C. fallax	+	–	–	+	–	–	–
C. difficile	+	–	–	+	–	+	–

 

Вид микроорганизма и выделяемые им токсины опре­деляют в реакции нейтрализации с диагностическими антиток­сическими сыворотками. Биологической пробой вызывают у жи­вотных анаэробную инфекцию и определяют токсины в исследу­емом материале.

Ускоренный метод — газожидкостная хроматография — поз­воляет в течение нескольких минут определить наличие клост­ридии (но не видовую их принадлежность) в раневом отде­ляемом или в питательной среде, где размножались микроорга­низмы, на основе выявления продуктов метаболизма (различ­ные жирные кислоты).

Профилактика и лечение. Предупреждение развития анаэроб­ной раневой инфекции состоит прежде всего в своевременной и полноценной хирургической помощи раненым. Параллельно с первичной обработкой ран вводится антитоксическая сыворотка, содержащая антитела против токсинов клостридии, чаще всего вызывающих это заболевание.

Для лечения анаэробной инфекции применяют ту же анти­токсическую сыворотку, но в значительно больших дозах. Если

идентифицирован возбудитель, выделенный из патологического материала, вводят сыворотку против токсинов данного возбуди­теля. Используются и антимикробные препараты (пенициллин, канамицин и сульфаниламиды), подавляющие жизнедеятель­ность не только клостридий — возбудителей, но и сопутствую­щих микроорганизмов, предотвращая развитие вторичной инфек­ции.

 

Клостридии ботулизма

Возбудитель ботулизма — С. botulinum — описан впервые Э. ван Эрменгемом в 1896 г. во время расследования вспышки ботулизма. Микроорганизм был выделен из ветчины, послужив­шей источником отравления людей, и из органов умерших. Затем было установлено, что вид С. botulinum включает серовары (А, В, Ci, C2, D, E, F, Q), различающиеся по антигенной структуре образуемых ими токсинов. Каждый из ток­синов клостридий ботулизма может быть нейтрализован только гомологичной сывороткой.

Морфология, физиология. С. botulinum — палочки, размерами 4—9 X 0,6—1,0 мкм, перитрихи, образуют субтерминально рас­положенные споры. Палочка со спорой напоминает теннисную пакетку. Капсулу не образуют

Возбудитель ботулизма — строгий анаэроб. Размножается на глюкозо-кровяном агаре, образуя неправильной формы колонии с отростками или ровными краями, зоной гемолиза вокруг коло­ний. В столбике агара колонии С. botulinum напоминают комочки ваты или чечевицу. В жидких средах образуется рав­номерная муть, а затем на дно пробирки выпадает компакт­ный осадок.

  

             C. botulinum                                    Колонии C. botulinum типа А

 

Ферментативная активность непостоянна и в идентификации не используется.

Антигены. При идентификации возбудителя ботулизма опре­деляют только антигенную специфичность образуемых им токси­нов.

Экология и распространение. Естественной средой обитания С. botulinum является кишечник многих животных, рыб, мол­люсков, а также почва, куда микроорганизмы постоянно по­падают с испражнениями. В почве, как и в организме животных, клостридий ботулизма не только сохраняются длительное время, но и размножаются. Вегетативные формы С. botulinum мало­устойчивы в окружающей среде, в отличие от спор выдержи­вают длительное высушивание, замораживание до —253 °С, ки­пячение от 1 до 6 ч. В 5 % растворе фенола сохраняют жизнеспособность до 1 сут.

Ботулинический токсин при кипячении разрушается в течение 10 мин. Он обычно накапливается в пищевом продукте при размножении в нем С. botulinum. Такими продуктами являются,

как   правило,   консервы   домашнего   приготовления   (овощные, грибные, рыбные, мясные).

Патогенность возбудителя и патогенез ботулизма. Боту­лизм — тяжелая пищевая интоксикация, развивающаяся в ре­зультате употребления продуктов, содержащих токсины возбу­дителя и сами микробные клетки. Попав в анаэробные условия, размножающиеся клостридии ботулизма выделяют в среду ток-сины.

Один из них — нейротоксин — является основным, опреде­ляющим клиническую картину болезни. Нейротоксин клостридии ботулизма самый сильный из всех известных биологических ядов. Он получен в кристаллическом виде и 1 мг содержит до 100 млн смертельных доз для белой мыши. У человека смерть наступает после приема не более 0,001 мг нейротоксина.

Токсин устойчив к действию пищеварительных ферментов. Из верхних отделов желудочно-кишечного тракта токсин быстро всасывается в кровь и попадает в нервно-мышечные синапсы. Этот яд, состоящий из двух субъединиц, связывается одной из них с мембраной синаптосомы, а другая проникает в нервную клетку путем эндоцитоза. Механизм действия яда состоит в ин-гибиции Са-зависимого освобождения ацетилхолина, блокаде функциональной активности нейрона. Клиническим проявлением действия токсина в первую очередь являются поражения буль-барных нервных центров. После короткого инкубационного пе­риода (обычно 2—12 ч) развиваются явления общей интоксика­ции и появляются первые признаки поражения органов зрения — расстройство аккомодации, двоение в глазах, поражения глаз­ных мышц, расширение зрачков. Вместе с этим затрудняется глотание, появляются афония, головная боль, головокружение, иногда рвота. Летальность высока (до 60 %).

Лабораторная диагностика. Материалом для лабораторного исследования на предмет обнаружения токсинов и возбудителя ботулизма, определения серовара служат рвотные массы, про­мывные воды желудка, испражнения, кровь. Для установления источника инфекции исследуются подозреваемые продукты, ко­торые употребляли заболевшие. Исследования ведут параллельно на обнаружение токсина и выделение культуры возбудителя. Для обнаружения токсина используют белых мышей, которым подкожно или внутрибрюшинно вводят вместе с поливалентной антитоксической противоботулиническои сывороткой (А, В, С, Е) исследуемый материал, а другая группа мышей получает мате­риал без сыворотки. В том случае, когда животные второй груп­пы погибают, ставят развернутую реакцию нейтрализации для определения типа токсина.

Для получения культуры возбудителя исследуемый материал засевают в жидкие питательные среды. Выделенную культуру идентифицируют, а культуральную жидкость испытывают в реак­ции нейтрализации на наличие в ней ботулинического токсина определенного серотипа.

 

Профилактика и лечение. При появлении первых признаков ботулизма необходимо как можно раньше ввести противоботу-линическую сыворотку. Это единственное средство, которое при своевременном применении может спасти жизнь больному. До установления серотипа токсина, который вызвал болезнь, вво­дят поливалентную сыворотку против токсинов А, В, С, Е. Коли­чество сыворотки и необходимость повторного введения опреде­ляет клиницист. Лицам, которые принимали пищу, явившуюся источником ботулизма, но еще не заболевшим, с профилактиче­ской целью можно ввести ту же антитоксическую противоботу-линическую сыворотку.

 

В настоящее время зарегистрирован как возбудитель заболевания человека представитель рода клостридий — С. difficile.

Это грамположительная палочка, размерами 6—8 X 0,5 мкм, образующая овальные субтерминально расположенные споры. Микроорганизм был выделен из фекалий новорожденных в 1935 г. Халлом и О’Тулом. Долгое время С. difficile считали нормальным обитателем кишечника. Теперь все чаще выделя­ют эти клостридий из патологического материала при различных гнойно-воспалительных заболеваниях человека, иногда — при анаэробной раневой ин­фекции.

Патогенность С. difficile обусловлена секретируемыми термолабильными ток­синами (цитотоксином и энтеротоксином) и проявляется специфическим тяже­лым псевдомембранозным колитом, возникающим на фоне дисбактериоза у людей, леченных антибиотиками.

Для лечения этого заболевания применяют ванкомицин и метронидазол.

 

 

ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ НЕ ОБРАЗУЮЩИЕ СПОР АНАЭРОБНЫЕ БАКТЕРИИ

 

Бактероиды

В род Bacteroides включено более 40 видов, из которых на­иболее часто возбудителями воспалительных процессов у челове­ка являются В. fragilis и В. melaninogenicus.

Морфология, физиология. Бактериоды — полиморфные, под­вижные и неподвижные, средних размеров (0,8 X 1,5 мкм) па­лочки, располагающиеся поодиночке или парами. Это — строгие анаэробы.

 

B. fragilis

 

 Для размножения, кроме бескислородных условий, требуют специальных питательных сред, присутствия 10 % СО₂ и витамина К- Для их выделения применяют среды, содержа­щие кровь (гемин стимулирует рост бактероидов), пептонный бульон с дрожжевым экстрактом и глюкозой. Устойчивость бактероидов к желчи используют для дифференциации их от дру­гих микроорганизмов, которые в средах с желчью не растут. Размножение бактероидов идет медленно, посевы инкубируют не менее 5 дней.

В. fragilis образует на кровяной среде небольшие выпуклые непигментированные колонии, В. melaninogenicus дает пигмен­тированные колонии черного или темно-коричневого цвета. От­дельные штаммы обладают гемолитической активностью.

 

 

Культуральные свойства B. fragilis

 

Бактероиды сбраживают многие углеводы, ферментируют пеп­тон. Продукты метаболизма включают сукцинаты, ацетаты, лак-таты, пропионаты, что используется в газожидкостной хрома­тографии при обнаружении этих микроорганизмов в патологи­ческом материале.

 

Ферментативные свойства

 

Антигены. Известно, что бактероиды антигенно неоднородны и антигенная структура их вариабельна.

Экология и распространение. Бактероиды обитают в кишеч­нике и в других биотопах, входят в состав нормальной микро­флоры.

Патогенность возбудителей и патогенез заболеваний челове­ка. Отношение к бактероидам как условно-патогенным микро­организмам оправдывается тем, что даже при значительном их количестве и распространении в организме человека заболева­ния возникают лишь при определенных условиях, обычно у лиц с иммунодефицитными состояниями. Чаще всего заболевания, вызванные бактероидами, носят гнойно-воспалительный харак­тер, а патологический процесс может локализоваться в любых органах и тканях.

Факторы, обусловливающие болезнетворные свойства бакте­роидов, связаны с их липопротеидами и белками наружной мемб­раны, которые проявляют себя как эндотоксин. У В. fragilis ча­ще, чем у других бактероидов, вызывающих заболевания чело­века, имеется капсула, обеспечивающая бактероидам антифаго­цитарные свойства. Кроме того, этот вид образует нейрамини-дазу более высокого уровня, чем другие виды бактероидов, фибринолизин, ДНК-фазу.

Иммунитет. При некоторых формах инфекционного процесса, вызываемого бактероидами (сепсис, воспаление в области уроге-нитальной сферы), обнаруживаются антитела, титр которых пре­вышает содержание этих антител у здоровых людей. После пере­несенного заболевания титр антител постепенно снижается в те­чение нескольких месяцев. Значение выявляемых антител в со­здании невосприимчивости неизвестно.

Лабораторная диагностика. Для лабораторного исследования используют кровь, гной и другие материалы в зависимости от локализации патологического процесса. Важным является со­блюдение правил взятия исследуемого материала. Посевы, ин­кубация проводятся в строго анаэробных условиях. Выделенную культуру идентифицируют, определяют чувствительность к анти­микробным препаратам. Обычно бактероиды чувствительны к пе­нициллину (но многие штаммы В. fragilis резистентны, так как продуцируют р-лактамазу), к карбенициллину, хлорамфениколу, метранидазолу. Эти антибиотики используют для лечения забо­леваний, вызванных бактероидами.

 

Фузобактерии

Представители рода Fusobacterium могут вызывать у человека гнойно-воспа­лительные процессы с некротизацией тканей. Название Fusobacterium (веретено-

образная палочка) дано в 1892 г. М. Кнором. Такую’форму имеют F. nueleatum. Другие фузобактерии — полиморфные микроорганизмы: палочки с закругленными или заостренными концами различной длины — от почти кокков до нитей, длиной 10 мкм.

 

F.necrophorum

 

Обитают фузобактерии в полости рта, кишечника здоровых людей. Один из давно известных видов F. necrophorum был выделен при некротическом поражении слизистой оболочки глотки. Данный вид может вызывать воспали­тельные процессы в верхних дыхательных путях, в области урогенитального тракта.

Фузобактерии обладают сахаролитической активностью, протеолитическая — выражена слабо. Главный продукт ферментации — масляная кислота.

В жидких средах образуют осадок, культуры издают гнилостный запах.

Культуральные свойства

 

Липополисахариды клеточной стенки фузобактерии являются эндотоксином. F. necrophorum образует экзотоксин, поражающий лейкоциты и вызывающий гемолиз. Синергизм сопутствующих микроорганизмов увеличивает патогенное действие фузобактерии. Известны постоянные сочетания фузобактерии и спиро­хет при ангине Симановского — Плаута — Венсана.

Пропионибактерии и эубактерии

Род Propionibacterium и род Eubacterium включают грамположительные ана_г эробные палочки, не образующие спор, не обладающие жгутиками. Сходны по мор­фологии с коринебактериями — полиморфны, на концах имеют вздутия. Бихими-чески активны, конечный продукт расщепления — пропионовая кислота. Пропио­нибактерии обитают на коже, в кишечнике здоровых людей, а при предрас-пологающих условиях могут вызывать гнойно-воспалительные процессы различ­ной локализации. P. acnes в ассоциации с эпидермальным стафилококком вызывает появление угрей.

           

Пептококки и пептострептококки

Бактерии родов Peptococcus и Peptostreptococcus — грамположительные ша­ровидные анаэробы, не образующие спор, не имеющие жгутиков. Отдельные ви­ды обитают в кишечнике здоровых людей, их обнаруживают и в полости рта, в носоглотке, мочеполовых путях. При воспалительных процессах (аппендицит, плеврит, абсцессы мозга) эти микроорганизмы выделяют в ассоциации с други­ми бактериями, как возбудителей смешанных инфекций.

Пептострептококки

 

   

  Колонии пептококков                                            Peptococcus anaerobius

 

При лабораторной диагностике из гноя, кусочков пораженной ткани, крови выделяют культуру и идентифицируют.

Лечение   проводят   обычно   пенициллином,   карбециллином,   левомицетином.

Вейллонеллы

Род Veilonella включает 7 видов, три из которых паразитируют в полости рта, желудочно-кишечном тракте, дыхательных путях человека и других живот­ных. Это — анаэробные грамотрицательные кокки, размерами 0,3—0,6 мкм. Спор не образуют, жгутиков не имеют.

Размножаются на молочном агаре, где образуют звездообразной формы блестящие, как алмазы, колонии диаметром 1—3 мм. Вейллонеллы не образуют оксидазу и каталазу, не ферментируют углеводы, не разжижают желатин, не изменяют молоко, не продуцируют индол, но редуцируют нитраты. Виды вейлло-нелл различают по антигенным свойствам.

Патологические процессы, при которых выделяют вейллонеллы (обычно в ассоциации с другими микроорганизмами), это — абсцессы мягких тканей, ра­невые инфекции, сепсис.

 

Иерсинии

Род Yersinia содержит 7 видов, среди которых Y. pestis — возбудитель чумы и Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, чаще всех остальных вызывают заболевания у человека.

Иерсинии чумы

Y.   pestis  был   открыт  в   1894   г.  А.   Иерсеном   в   Гонконге.

Морфология, физиология. Y. pestis — грамотрицательные по­лиморфные мелкие, размером 1—2х0,3—0,7 мкм, неподвижные палочки с закругленными концами. Спор не образуют. В орга­низме больного и при размножении на питательных средах об­разуют капсулу. В мазках из патологического материала (мок­рота, гной бубона, кровь), окрашенных метиленовой синькой, выявляется биполярность. При размножении на плот­ных средах преобладают удлиненные формы иерсинии.

Палочки чумы — факультативные анаэробы. Размножаются на простых питательных средах, но лучше при добавлении гемо-лизированной крови. Оптимальная температура культивирования 28 °С, но могут размножаться при температуре от 2 до 42 °С. На плотных средах при посеве большого числа (10 000 и более бактерий) через 8—12 ч можно обнаружить при микроскопиро-вании начальный рост колоний в виде «битого стекла», которые через 18—20 ч становятся светлыми с неровными краями, а через 48 ч образующийся фестончатый край колоний придает им вид «кружевного платочка». R-формы колоний характерны для виру­лентных  штаммов,  S-формы  содержат  авирулентные  бактерии.

В жидких питательных средах палочки чумы образуют пленку на поверхности и спускающиеся вниз нити, похожие на сталакти­ты, и хлопьевидный осадок.

Биохимическая активность характеризуется способностью расщеплять ряд углеводов (фруктозу, галактозу и др.) с образо­ванием кислоты. Протеолитическая активность выражена сла­бо — желатину не разжижают, молоко не свертывают.

 

                                                                                                                 Палочки   чумы   в   гное   из бубона.

Антигены. Палочки чумы содержат комплекс антигенов, среди которых имеются общие с представителями семейства Fntero–bacteriaceae и эритроцитами людей О-группы. Антигенная специфичность иерсиний связана с капсульным веществом. F, поверхностный белковый тер­молабильный антиген исполь­зуется в РНГА как диагностикум в серологических исследо­ваниях при чуме. V– и W-ан-тигены обладают антифагоци­тарной активностью. Другие антигены из 10 известных изу­чены недостаточно хорошо.

Патогенность.  Вирулентные штаммы чумной палочки характеризуются следующими свойст­вами: наличием F-антигена, а также V– и W-антигена, обладаю­щих антифагоцитарной активностью, образованием пестицинов, способностью ассимилировать гемин и синтезировать пурины, продуцировать токсин — «мышиный яд» (к нему наиболее чувствительны белые мыши), блокирующий действие ряда мета­болитов и гормонов.

Экология и распространение. Основными хозяевами иерсиний чумы в природе являются грызуны  (суслики, тарбаганы и др.).

Чума — зоонозное природно-очаговое заболевание. Очаги чумы распространены на территориях всех стран мира. Они раз­личаются носителями возбудителя и биологическими свойствами иерсиний, распространенных в определенной зоне. По биохими­ческой характеристике и соответствию с местом распространения различают 3 биовара.

Заражение человека в природных очагах чумы происходит трансмиссивным  (переносчики — блохи), контактным и алиментарным путями. Люди, больные легочной формой чумы, зара­жают окружающих аэрогенным путем.

Попадая из организма больных животных и человека в окру­жающую среду, иерсинии чумы могут длительно сохранять жизнеспособность. Они хорошо переносят низкие температуры, при О °С сохраняются до 6 мес, в замороженных трупах, бло­хах — 1 год и более, в воде, почве, на одежде — от 1 до 5 мес; в течение 4—6 дней — в хлебе, на овощах и фруктах.

Бактерии чумы чувствительны к УФ-облучению, высушиванию и действию высокой температуры. Они погибают при кипячении в течение 1 мин, а при нагревании до 60 °С в течение 1 ч. Губи­тельное действие дезинфектантов проявляется при воздействии 3 % раствора фенола через 5—10 мин, 5 % раствора лизола через 2—10 мин.

Патогенез чумы. Клинические проявления чумы в значитель­ной степени зависят от входных ворот инфекции. Различают кожно-бубонную, первично- и вторично-септическую, первично-и вторично-легочную формы чумы. Недостаточная барьерная функция регионарных лимфатических узлов, сопровождающаяся обычно незавершенным фагоцитозом иерсинии чумы и их уси­ленным размножением, приводит к развитию первично-септичес­кой формы чумы. Вторично-септическая форма развивается на фоне бубонной или легочной.

Бубон

 

Иммунитет. После перенесенного заболевания остается проч­ный продолжительный иммунитет. Основная роль в защите от чумы принадлежит фагоцитирующим бактерии клеткам, завер­шенному фагоцитозу.

Лабораторная диагностика. Чума — особо опасная инфекция. Работа с материалами, содержащими возбудителя болезни, проводится в специальных режимных лабораториях, подготов­ленным персоналом.

 

 

Исследуемый материал (гной из бубонов, отделяемое язвы, мокрота и др.) бактериоскопируют, подвергают ИФА, засевают на питательные среды и проводят биопробу на морских свинках.

Yersinia pestis в крови

 

Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфоло­гическим, культуральным, биохимическим, антигенным свойст­вам, чувствительности к чумному бактериофагу. Дифференциру­ют от других видов иерсинии по признакам, перечисленным в таблице.

 

 Колонии Υ. Pestis

 

Дифференциация возбудителей чумы, псевдотуберкулезау и кишечного  иерсиниоза

 

В материалах из загнивших трупов возможно выявить чум­ной антиген реакцией термопреципитации.

Профилактика и лечение. В природных очагах постоянно ведется наблюдение за поголовьем грызунов. При распростра­нении  инфекции  проводится дератизация и дезинсекция.

Невосприимчивость к чуме создается иммунизацией людей живой (штамм EV) или химической чумной вакциной. Применяется живая сухая вакцина. После однократного подкож­ного или накожного введения создается относительно стойкий иммунитет   на   6   мес.   При   опасности   заражения   проводится

антибиотикопрофилактика стрептомицином, который применяют и при лечении больных чумой наряду с противочумным имму­ноглобулином.

Иерсинии псевдотуберкулеза

Yersinia pseudotuberculosis — возбудитель псевдотуберкуле­за — был обнаружен и описан Малассе и Виньялем в 1883 г. Заболевания, этиологически связанные с псевдотуберкулезными иерсиниями, определяются как гастроэнтерит, мезентеральный лимфаденит,” полиартрит, регионарный илеит и др.

С 1959 г. во Владивостоке и его окрестностях возникали заболевания, протекавшие с лихорадкой, интоксикацией, мелко­точечной скарлатиноподобной сыпью, которая получила название «дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка».

Морфология, физиология. Y. pseudotuberculosis — коккобактерии, не образующие спор, грамотрицательные, имеют жгути­ки и капсулу. Факультативные анаэробы. Хорошо размножаются на простых питательных средах при оптимальной для них темпе­ратуре 20—28 °С, но и при 0—4 °С идет интенсивное размно­жение. Биохимическая активность отражена в таблице.

Антигены. Псевдотуберкулезные бактерии обладают Н-жгу-тиковыми и О-соматическими антигенами. По О-антигену разли­чают 10 сероваров. Заболевания у человека вызывают чаще всего иерсиний сероваров I, III и IV.

Экология и распространение. Псевдотуберкулезные бактерии распространены во многих странах. Заболевания, ими вызывае­мые, регистрируются в странах Азии, Африки, Европы. На Дальнем Востоке России, в Сибири, на Украине, в Европейской части России, в Грузии и других географических зонах.

Источником возбудителя являются грызуны  (полевки, домовые мыши, крысы, зайцы). Заражение людей происходит али­ментарным путем, при употреблении пищевых продуктов (глав­ным образом овощей, фруктов), загрязненных фекалиями и мочой животных.

Способность иерсиний псевдотуберкулеза размножаться при температуре 4—6 °С приводит к массивному накоплению их в пищевых   продуктах,   длительно   хранящихся   в   холодильнике.

Патогенез заболеваний человека. После попадания в желу­дочно-кишечный тракт иерсиний псевдотуберкулеза проникают в слизистую оболочку кишечника, где (преимущественно в подслизистом слое) образуются множественные гранулемы и гемор­рагии — возникают симптомы гастроэнтерита. Попадание микро­организмов в лимфатические узлы приводит к развитию мезентериального лимфаденита — в эпигастральной области усили­ваются боли, появляются симптомы раздражения брюшины, в илеоцекальном углу определяется инфильтрат. Возможна бак­териемия, которая сопровождается сыпью, артралгией и другими проявлениями  генерализации  патологического  процесса.

Иммунитет, его механизмы при псевдотуберкулезе не изуче­ны. Антитела к возбудителю появляются в течение болезни, но они не обладают протективными свойствами. Описаны случаи повторных заболеваний псевдотуберкулезом.

Лабораторная диагностика проводится бактериологическим и серологическим методами. Культуры возбудителя выделяют из испражнений, мокроты и других материалов, дифференцируют от других иерсиний и сходных бактерий иных родов.

ИФА применяют для выявления возбудителя в материалах от больных и индикации в окружающей среде.

В серодиагностике используют реакцию агглютинации и РИГА.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют тетрациклины, левомицетин, стрептомицин.

 

Возбудитель кишечного иерсиниоза

Yersinia enterocolitica был выделен от животных (зайцев, кроликов, обезьян, свиней). Изучение иерсиниоза началось с 1964 г.

Морфология, физиология. Y. enterocolitica грамотрицательные подвижные палочки, не образующие спор и капсул.

Культивируются на простых питательных средах при темпе­ратуре 20—26 °С. Ферментативные свойства отражены в табл. 20.7. Различают 5 биоваров, из которых 3-й и 4-й патоген­ны для человека.

Антигены. По специфичности О-антигена иерсиний энтероко­лита распределены на 30 сероваров. У человека чаще всего вызывают заболевания серовары 03 и 09.

Патогенность.    Иерсиний   энтероколитика — факультативные внутриклеточные паразиты.

Патогенность их связана с инвазивными свойствами и действием цитотоксинов, вирулентные штам­мы обладают устойчивостью к фагоцитозу и бактерицидному действию сыворотки. Эти свойства кодируют гены плазмид. Маркерами вирулентности являются кальцийзависимость и ауто-агглютинация.

Экология и распространение. Y. enterocolitica широко рас­пространены: их выделяют от больных людей и животных, обна­руживают в окружающей среде. В открытых водоемах они не только выживают, но и размножаются. Устойчивы к низким температурам. В молоке способны размножаться как при комнат­ной температуре, так и в условиях холодильника. Овощи, фрук­ты, мороженое, контаминированные иерсиниями, в условиях хра­нения их в холодильнике оказываются массивно обсемененными этими микроорганизмами.

Основной источник Y. enterocolitica — животные и люди (больные и носители). Путь заражения — алиментарный. Забо­левания регистрируются в виде вспышек или спорадических случаев.

Патогенез заболеваний человека и иммунитет. Заражение человека Y. enterocolitica реализуется по-разному: от бессимп­томного носительства и легких форм до тяжелых и генерализо­ванных, септических, которые чаще возникают у пожилых лиц, страдающих хроническими заболеваниями (цирроз печени, диабет). Иерсинии этого вида могут быть причиной возникнове­ния полиартрита, нодозной эритемы.

В течение болезни накапливаются антитела к возбудителю. Титр их в реакции агглютинации бывает не выше 1:800. Роль в формировании иммунитета неясна.

Лабораторная диагностика иерсиниоза осуществляется бакте­риологическим и серологическим методами. Из исследуемого материала (испражнения больного, смыв из носоглотки, кровь, моча) выделяют культуру, идентифицируют, определяют серовар.

Серодиагностика проводится в реакциях агглютинации, не­прямой гемагглютинации, с помощью иммунофлуоресцентного анализа.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Лечение больных кишечным иерсиниозом проводят антибиотиками (чаще назначают стрептомицин, гентамицин, тет­рациклин, ампициллин) и сульфаниламидами.

Video: Биооружие (чума)

 

БРУЦЕЛЛЫ

Бруцеллы — возбудители бруцеллеза человека и животных включены в род Brucella. Впервые возбудитель этого забо­левания обнаружил Д. Бюрне в 1886 г. в селезенке умершего человека, а в 1887 г. выделил в чистой культуре. Данный вид бруцелл получил наименование В. melitensis. Другой вид воз­будителя В. abortus выделили Б. Банг и Б. Стрибольт из околоплодной жидкости при аборте коровы. Третий вид бруцелл В. suis в 1914 г. Ж. Траум выделил от свиней. Все три вида бруцелл вызывают заболевание у человека.

Морфология, физиология. Бруцеллы — мелкие грамотрицательные коккобактерии размером 0,6—1,5X0,5—0,7 мкм. Жгути­ков не имеют. Спор не образуют. Свежевыделенные штаммы мо­гут образовывать нежную капсулу.

 

 

Бруцеллы требовательны к питательным средам. Для их культивирования используют специальные среды с добавлением сыворотки, крови, глюкозы, тиамина, биотина. Выделяемые из организма больных они размножаются очень медленно, рост мо­жет быть обнаружен только через 1—3 нед после посева исходно­го материала. Многократное пересевание в лабораторных услови­ях делает культуры способными расти в течение 1—2 дней. На плотных питательных средах бруцеллы образуют мелкие, выпук­лые, бесцветные с перламутровым блеском колонии S-формы, которая легко диссоциирует в мукоидную и шероховатую. В жид­ких средах возникает равномерное помутнение. Под влиянием ан­тибиотиков образуют   L-формы.

 

 

Бруцеллы строгие аэробы. В. abortus в первых генерациях нуждаются в повышенной концентрации (5—10%) углекислого газа.

Биохимическая активность бруцелл характеризуется способ­ностью расщеплять глюкозу и некоторые другие углеводы, разла: гать мочевину и аспарагин, гидролизовать белок, пептоны, ами­нокислоты, выделять каталазу, гиалуронидазу, пероксидазу, липазу, фосфатазу и другие ферменты. Внутри видов бруцелл различают биовары. Их дифференциация основана как на биохи­мических различиях, так и на способности расти на средах с фуксином и тионином, лизабельности фагом Т6, агглютинабельности моноспецифическими сыворотками.

Антигены. Бруцеллы содержат поверхностно расположенный Vi-антиген и соматические видоспецифические антигены А и М, количественное соотношение которых различно у разных ви­дов. У В. melitensis преобладают М-антигены. у В. abortus и В. suis — А-антиген. Для идентификации бруцелл по антигенным свойствам используют реакцию адсорбции агглютининов по Кастеллани или монорецепторные сыворотки.

Экология и распространение. Бруцеллез — зоонозная инфек­ция. Возбудители разных видов циркулируют среди опреде­ленного круга животных, от которых заражаются и люди. В. mеlitensis вызывает заболевания мелкого рогатого скота, В. abor­tus — крупного рогатого скота, В. suis — свиней. Среди лесных крыс циркулируют В. neotomae, непатогенные для человека. Другие виды бруцелл, также не вызывающие заболевание у людей, поражают баранов и овец — В. ovis, собак — В. canis.

Бруцеллы характеризуются большой устойчивостью к дейст­вию факторов окружающей среды. Они длительно сохраняют жизнеспособность при низкой температуре. В почве, моче, ис­пражнениях животных, больных бруцеллезом, в навозе, сенной трухе возбудители выживают 4—5 мес, в шерсти овец — 3— 4 мес, в пыли — 1 мес. В брынзе, масле остаются жизнеспособ­ными в течение 4 мес, в замороженном мясе — до 5 мес. К высо­кой температуре и дезинфицирующим веществам бруцеллы высо­кочувствительны: при 60 °С погибают за 30 мин, при кипяче­нии — мгновенно. Все дезинфектанты губят бруцелл в течение нескольких минут.

Патогенность бруцелл и патогенез бруцеллеза. Проникно­вение возбудителя бруцеллеза в организм человека возможно алиментарным, контактным и воздушно-капельным путями. Али­ментарный путь заражения связан с употреблением в пищу про­дуктов животноводства (брынзы, масла, молока, мяса), получен­ных от больных животных. Контактным путем заражаются чаще ветеринары, зоотехники, работники мясокомбинатов при уходе за больными животными, обработке сырья. Заражение возможно при работе с инфицированной шерстью, ветошью, когда имеет место распыление, попадание бруцелл в воздух. Для человека наиболее патогенными являются В. melitensis — возбудитель бо­лезни мелкого рогатого скота  (овец, коз).

Выраженные инвазивные и агрессивные свойства бруцелл обусловливают способность возбудителя проникать в организм через неповрежденные слизистые оболочки. После проникновения в организм бруцеллы распространяются лимфогенным путем, попадают в кровь, а из крови — в селезенку, костный мозг, лимфоузлы, где, локализуясь внутриклеточно, могут длительно сохраняться.

Болезнетворность бруцелл определяется действием эндо­токсина. Выделяющиеся ферменты (гиалуронидаза и др.) способ­ствуют распространению микробов в тканях. В патогенезе бру­целлеза имеет значение способность возбудителя размножаться в клетках лимфоидно-макрофагальной системы.

С первых дней болезни возникает реакция ГЗТ, которая со­храняется в течение всей болезни и длительное время после вы­здоровления.

Иммунитет. В основе иммунитета при бруцеллезе лежит ак­тивность системы Т-лимфоцитов. Важную роль играет фагоци­тоз и состояние аллергии. Обезвреживание бруцелл происходит при участии антител — опсонинов, агглютининов.

Лабораторная диагностика проводится бактериологическим и серологическим методами. Материалом для бактериологическо

го исследования служат кровь, испражнения и моча больных, иногда — спинномозговая жидкость. Выделением возбудителя за­нимается специальная режимная лаборатория. Наблюдения за сделанными посевами ведут 3—4 нед. Каждые 4—5 дней делают высевы. Выделенную культуру идентифицируют, определяют при этом биовары. Дифференциальные признаки видов и биова-ров бруцелл приведены в таблице.

 

Дифференциация основных видов и биоваров бруцелл

 

 

 

Бактериостатическое действие фуксина (слева) и треонина (справа) на бруцеллы  

Серодиагностику проводят с 10—12-го дня, когда появляются антитела. Их определяют в реакциях агглютинации (Райта, Хеддльсона), РСК, РНГА. Неполные антитела выявляют реак­цией Кумбса и Винера.

Схема постановки реакции агглютинации Райта

Примечание: КС – контроль сыворотки, КД – контроль диагностикума

Схема постановки пластинчатой реакции Хеддлсона

Примечание: КС – контроль сыворотки, КД – контроль диагностикума

Профилактика и лечение. Предупреждение возникновения бруцеллеза обеспечивается проведением комплекса общих и спе­цифических мероприятий ветеринарной службой. Выявляют и ли­квидируют бруцеллез среди сельскохозяйственных животных, обезвреживают продукты и сырье животного происхождения. Людей, подвергающихся опасности заражения, вакцинируют жи­вой бруцеллезной вакциной. Для лечения используют стрептоми­цин, левомицетин, тетрациклин, эритромицин как этиотропные средства.

 

 

БАКТЕРИИ ТУЛЯРЕМИИ

Возбудитель туляремии — Francisella tularensis — был от­крыт в 1912 г. Г. Мак-Коем и Ш. Чепиным. Название микроор­ганизм получил по наименованию района Туляре в Калифорнии, где исследователи выделили возбудитель.

Современной классификацией бактерии туляремии отнесены к роду Francisella.

Морфология, физиология. Возбудители туляремии — очень мелкие, размером 0,2—0,7X0,2 мкм, полиморфные, кокковидные и палочковидные грамотрицательные бактерии. Спор не образу­ют. Жгутиков не имеют. Образуют небольшую капсулу.

 

Факультативные анаэробы на простых питательных средах не растут. Для размножения требуется введение в среду цисте-ина как стимулятора роста. Культивирование возможно на пита­тельных средах, содержащих яичный желток, на кровяном агаре с добавлением глюкозы и цистеина. На плотных средах образу­ются небольшие, беловатого цвета колонии.

 

 

Ферментативная активность мало выражена, биохимические свойства нестабильны. Оксидазоотрицательны, продуцируют се­роводород.

Антигены. Соматические и локализованные в клеточной стенке антигены туляремийных бактерий индуцируют синтез аг­глютининов, преципитинов. Отмечена антигенная общность с дру­гим видом рода — Francisella novicida, непатогенным для человека, и перекрестное реагирование в реакции агглютина­ции с бруцеллами и иерсиниями.

Экология и распространение. Туляремия — зоонозное забо­левание с природной очаговостью. Естественные хозяева возбу­дителя — грызуны (водяные крысы, полевки, домовые мыши, хо­мяки, зайцы).

В окружающей среде возбудитель туляремии сохраняет жиз­неспособность долго: в трупах грызунов, в воде при 1 °С — до 9 мес, при 4 °С — 4 мес. С повышением температуры сокращают­ся сроки выживаемости — в воде при 20 °С микроорганизмы вы­живают 1—2 мес. К действию высокой температуры возбудитель туляремии малоустойчив, погибает при 60 °С через 20 мин. Гу­бительно действуют на микроорганизмы дезинфицирующие веще­ства — растворы карболовой кислоты, лизола и других дезинфек-тантов в обычных концентрациях. Чувствительны ко многим ан­тибиотикам: стрептомицину, гентамицину, канамицину, тетрацик-линам, хлорамфениколу.

Заражение человека возбудителем туляремии происходит при прямом контакте с больными животными или трупами погиб­ших, а также через инфицированную воду и пищевые продукты. Возможна передача возбудителя клещами, комарами, слепнями, которые являются переносчиками.

От человека, больного туляремией, здоровые люди практи­чески не заражаются.

Патогенез заболеваний человека и иммунитет. В организм человека возбудитель туляремии проникает через кожу и слизис­тые оболочки глаз, рта, носа, дыхательных путей и пищева­рительного тракта. Обладая высокой инвазивной способностью, микроорганизмы могут проходить через неповрежденные покро­вы. Через 2—7 дней инкубационного периода возбудитель оказы­вается в лимфатических узлах, где интенсивно размножается и появляется в крови. В зависимости от путей проникновения развиваются различные клинические формы туляремии: бубон­ная, язвенно-бубонная, глазная, ангинозно-бубонная, кишечная, легочная, может быть первично-септическая с непременным пора­жением лимфатических узлов.

Болезнетворность франциселл связана также с действием эндотоксина.

Туляремия сопровождается развитием специфической аллер­гии, возникающей уже на 3—5-й дни заболевания и сохраняю­щейся после выздоровления в течение многих лет, а иногда по­жизненно.

После перенесенного заболевания остается стойкий, длитель­но сохраняющийся иммунитет.

Лабораторная диагностика туляремии проводится серологи­ческим методом. Со 2-й недели заболевания определяют в сы­воротке крови антитела в реакциях агглютинации и РНГА. При повторных исследованиях наблюдают нарастание титра ан­тител.

 

Схема постановки обьемной реакции агглютинации

 

 

Кровянокапельная проба

Выделение возбудителя проводится в специальных режимных лабораториях. Выделить культуру посевом на среды обычно не удается. Поэтому исследуемым материалом (пунктат из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, налет из зева, мок­рота, кровь) заражают белых мышей или морских свинок. Жи­вотные погибают на 4—12-й день. Из их органов делают мазки-отпечатки и посев на свернутую желточную среду.

Антиген определяют постановкой реакции термопреципита­ции, в которой исследуемый материал — прокипяченная взвесь селезенки и печени погибшего животного.

Ранним методом диагностики туляремии является постанов­ка аллергических проб с тулярином. Проба становится положи­тельной с 3—5-го дня заболевания.

Профилактика и лечение. Профилактика туляремии прово­дится в очагах распространения возбудителя. Помимо общих противоэпидемических мероприятий (борьба с грызунами, пере­носчиками), проводится иммунизация людей живой вакциной Райского — Эльберта. • Эффективность этой вакцины высока, однократная накожная вакцинация создает иммунитет на 5—6 лет. Профилактические мероприятия в природных очагах туляре­мии позволили существенно снизить заболеваемость этой инфек­цией.

Для лечения туляремии применяют стрептомицин, тетрацик-лины и хлорамфеникол.

БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

В 1786—1788 гг. в России, на Урале были большие эпиде­мии заболевания, которое С. С. Андреевский, изучавший вспыш­ки, назвал «Сибирская язва». Другое название болезни — ан­тракс (углевик, карбункул) и наименование возбудителя В. апthracis происходит от характерного вида гнойно-воспалительного очага на коже, в центре которого образуется черный струп, по­хожий на уголь. Этиологию, профилактику сибирской язвы изу­чали Р. Кох, Л. Пастер, Л. С. Ценковский. Возбудитель описан в 1849 г. Поллендером. По настоящей классификации, этот микроорганизм отнесен к роду Bacillus семейства Bacillaceae.

Морфология, физиология. В. anthracis — грамположительная, крупная (3—8 X 1 —1.5 мкм) неподвижная палочка. Вне организма, в присутствии кислорода образует овальные споры, не превышающие диаметр микробной клетки и расположенные центрально. В организме животных и человека, на питательных средах, содержащих кровь или сыворотку, сибиреязвенные ба­циллы образуют капсулу. В окрашенных препаратах бациллы, расположенные цепочками, выглядят обрубленными на концах, так что их цепи похожи на бамбуковую трость.

 

 

Возбудитель сибирской язвы — аэроб или факультативный анаэроб. Хорошо размножаются на простых питательных средах. На поверхности агара через сутки образуются шероховатые колонии с неровными краями, напоминающие локоны или льви­ную гриву. Рост в бульоне характеризуется появлением белых хлопьев, оседающих на дно пробирки, а сам бульон при этом остается прозрачным.

               

Посев уколом в столбик желатина выявляет характерную особенность роста в виде опрокинутой «елочки» — белый тяж с отходящими отростками, уменьшающимися книзу. Биохимичес­кая активность сибиреязвенных бацилл высока: помимо разжи­жения желатины, они гидро-лизуют крахмал, казеин, раз­лагают ряд углеводов (глюко­зу, мальтозу и др.), восста­навливают нитраты. На пита­тельном агаре с пенициллином наблюдается превращение бак­терий в протопласты в виде отдельных шаров, расположен­ных цепью — феномен «жем­чужного ожерелья».

Антигены. Сибиреязвенные бациллы имеют видовой антиген белковой природы, расположенный в капсуле, и групповой, сома­тический полисахаридной природы, локализованный в клеточной стенке микроорганизма. Соматический антиген термостабилен, не разрушается при кипячении. Это свойство используется при постановке реакции термопреципитации по Асколи, которой вы­являют сибиреязвенные антигены в различных материалах (тру­пах, коже, шерсти животных) — искомый антиген извлекают экс­тракцией при кипячении.

Экология и распространение. В естественных условиях си­бирской язвой болеют животные: крупный и мелкий рогатый скот, лошади, свиньи, олени, верблюды. Они заражаются алимен­тарным путем, поглощая вместе с кормами споры возбудителя. Патологический процесс развивается в кишечнике.

Сибирская язва — зоонозное заболевание. Человек заража­ется от больных животных при непосредственном контакте, а также через инфицированные предметы, изделия из зараженного сырья (меховые, кожаные, изделия из шерсти, щетины), мясо больных животных. Возможен перенос возбудителя кровососу­щими насекомыми (слепнями, мухами-жигалками).

В окружающей среде, главным образом в почве, куда попа­дает возбудитель с испражнениями, мочой больных или трупами животных, сибиреязвенные палочки образуют эндоспоры. Они от­личаются особенной стойкостью: в почве могут сохранять жизне­деятельность десятилетиями, дезинфицирующие вещества (5 % раствор карболовой кислоты, 5—10 % раствор хлорамина) уби­вают споры только через несколько часов действия. Споры тер­моустойчивы и выдерживают даже кипячение в течение 15— 20 мин. Вегетативные формы обладают обычной для бактерий устойчивостью — гибнут при 55 °С за 40 мин, при 60 °С — за 15 мин, при кипячении — мгновенно.

Патогенность возбудителя и патогенез сибирской язвы. Сибиреязвенные бациллы образуют токсин, секретируемый в сре­ду, где размножаются микроорганизмы. Он состоит из трех ком­понентов: I — «отечный фактор», вызывающий дермонекротичес-кую реакцию у морских свинок, II — летальный токсин («мыши­ный» токсин) вызывает отек легких и тяжелую гипоксию и III — протективный антиген.

Патогенность сибиреязвенной палочки обусловливает так­же и капсула, являющаяся фактором вирулентности. Она обла­дает антифагоцитарной активностью. Бактерии, покрытые капсу­лой, фиксируются на клетках макроорганизма, бескапсульные культуры невирулентны.

В зависимости от места проникновения возбудителя и выз­ванного им первичного поражения сибирская язва у человека проявляется в трех клинических формах: кожной, кишечной и легочной.

 

 

 Чаще встречается кожная форма, при которой в месте локализации возбудителя образуется карбункул. Кишечная фор­ма проявляется тяжелой интоксикацией, тошнотой, рвотой, поносом с кровью.

Легочная — тяжелой бронхопневмонией. Две по­следние формы протекают особенно тяжело и обычно заканчи­ваются летально. При любой клинической форме у ослабленных людей может развиться сибиреязвенная септицемия со смертель­ным исходом.

Иммунитет. У переболевших сибирской язвой создается про­чный иммунитет, основную роль в котором играют фагоцитарная реакция и образующиеся антитела. В течение болезни развива­ется специфическая сенсибилизация, которую выявляют с по­мощью внутрикожной пробы с аллергеном-антраксином.

Лабораторная диагностика проводится бактериоскопическим, бактериологическим, биологическим методами. Работа про­водится в режимных лабораториях, так как сибирская язва — особо опасная инфекция.

Мазок, приготовленный из исследуемого материала, окра­шивают по Граму и другими методами, выявляющими капсулу. Эффективным является применение капсульной люминесцирующей сыворотки.

 

 

 

Выделяют чистую культуру возбудителя посевами исходного материала в жидкие и на плотные питательные среды. Иден­тификацию проводят по морфологическим, тинкториальным, культуральным признакам, а также по лизабельности специфи­ческим фагом и тесту «жемчужное ожерелье».

Помимо лабораторных методов диагностики, возможна поста­новка аллергической пробы с антраксином. Положительной ре­акция становится в первые дни болезни и сохраняется в течение многих лет после выздоровления.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики можно применять вакцину СТИ — взвесь живых спор авиру-лентных бескапсульных бактерий сибирской язвы. Вакцину вво­дят однократно накожно или подкожно, иммунитет создается на 1 год, при необходимости проводят ревакцинацию. Вакцини­руют как животных, так и людей, по роду своей деятельности связанных с сельскохозяйственными животными или продуктами животноводства, представляющими потенциальную опасность за­ражения. При установленном контакте с источником возбудителя проводится экстренная профилактика, для чего вводят противо-сибиреязвенный иммуноглобулин и пенициллин.

Для лечения сибирской язвы используют как противосибиреязвенный иммуноглобулин, так и антибиотики (пенициллин, хлортетрациклин, стрептомицин).

 

Video: Биооружие (сибирская язва)

 

http://ru.wikipedia.org/wiki/Yersinia_pestis

http://nature.web.ru/db/search.html?not_mid=1171659&words=Yersinia%20pestis

http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs267/ru/

http://elementy.ru/lib/430343/430345

http://www.sci.aha.ru/ATL/ra55i.htm

http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A2%D1%83%D0%BB%D1%8F%D1%80%D0%B5%D0%BC%D0%B8%D1%8F

http://www.adventus.info/medicine/infect/011-6.php

http://www.utro.ru/articles/2005/08/26/471409.shtml

http://www.krugosvet.ru/articles/34/1003493/1003493a1.htm

http://ru.wikipedia.org/wiki/Бруцеллёз

http://www.adventus.info/medicine/infect/011-4.php

http://medinfo.ru/sovety/zoo/03.phtml

http://www.sci.aha.ru/ATL/ra55k.htm

http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A1%D0%B8%D0%B1%D0%B8%D1%80%D1%81%D0%BA%D0%B0%D1%8F_%D1%8F%D0%B7%D0%B2%D0%B0

http://dn.kiev.ua/events/ukraine/sjazva_09.html

http://elementy.ru/news/430108