Методична вказівка
до практичних занять для студентів медичного факультету
з циклу 2. «Фізіологія крові»
ЗАНЯТТЯ № 2 (практичне 6 годин)
Тема: 1. ФІЗІОЛОГІЯ ЛЕЙКОЦИТІВ (2 години).
2. ЛЕЙКОЦИТАРНА ФОРМУЛА (2 години).
3. ГРУПИ КРОВІ (2 години).
Мета: набути знань про функції лейкоцитів, механізми регуляції лейкопоезу, навчитися визначати кількість лейкоцитів у периферичній крові, навчитися підраховувати лейкоцитарну формулу та аналізувати її, набути знань про антигенні системи, їх роль і значення в фізіологічному розвитку організму, фізіологічну дію на організм перелитої крові і кровозамінників та правила їх перелвиння, навчитися визначати групи крові за стандартними сироватками, резус-фактора пробірковим методом.
Професійна орієнтація студентів: лейкоцити – клітини крові, які мають характерну структуру та складний внутрішньоклітинний метаболізм. Це високоспеціалізовані клітини, які володіють різними захисними функціями.
Кількість лейкоцитів у крові змінюється під впливом різних зовнішніх факторів, а також при різних фізіологічних станах організму (вікові зміни, вагітність, фази менструального циклу тощо) і різноманітних патологіях. Тому дослідження кількості лейкоцитів у крові – найрозповсюдженіше в лабораторній практиці.
Зміни лейкоцитарної формули супроводжують багато захворювань і нерідко є специфічними. Підрахунок лейкоцитарної формули має діагностичне значення, так як дає уяву про важкість стану, ефективність терапії.
Знання антигенних систем і вміння визначення їх є фундаментальною основною для майбутньої лікарської діяльності при вирішенні питань батьківства, донорства, судово-медичній експертизі.
1. ПРОГРАМА САМОПІДГОТОВКИ СТУДЕНТІВ ДО ЗАНЯТТЯ
Тема 1. ФІЗІОЛОГІЯ ЛЕЙКОЦИТІВ.
1. Фізіологічна оцінка білої крові:
а) загальні функції білокрівців;
б) кількість лейкоцитів та їх зміни;
в) лейкоцитопоез.
2. Значення лейкоцитів у забезпеченні імунітету:
а) фізіологічна роль Т-лімфоцитів;
б) функціональне значення В-лімфоцитів;
3. Система мононуклеарних фагоцитів (СМФ):
а) походження СМФ;
б) розповсюдження в організмі;
в) функції СМФ.
Тема 2. ЛЕЙКОЦИТАРНА ФОРМУЛА.
1. Загальна характеристика лейкоцитарної формули:
а) види лейкоцитів, основа їх поділу;
б) визначення поняття “лейкоцитарна формула” та її кількісне вираження;
в) індекс ядерного зсуву, його інтерпретація.
2. Функціональні особливості лейкоцитів:
а) нейтрофілів;
б) еозинофілів;
в) базофілів;
г) моноцитів.
Тема 3. ГРУПИ КРОВІ
1. Еритроцитарні групи крові:
а) визначення поняття “група крові”;
б) антигени і антитіла системи АВ0;
в) антигенний набір системи резус;
г) механізми розвитку резус-конфлікту при вагітності;
д) методи визначення груп крові в системах АВ0 і CDE за стандартними гемаглютинуючими і антирезусними сироватками і моноклональними антитілами.
2. Лейкоцитарні групи крові:
а) загальні антигени лейкоцитів;
б) антигени гранулоцитів, лімфоцитів.
3. Сироваткові групи крові:
а) імуноглобулінів;
б) альбумінів, глобулінів.
4. Переливання крові та кровозамінників:
а) проба на індивідуальну сумісність;
б) проба на резус-сумісність;
в) біологічна проба;
г) фізіологічні ефекти перелитої крові;
д) класифікація кровозаміників.
5. Склад крові новонароджених та людей похилого віку:
а) лейкоцитарний склад;
б) імуногенетичні особливості.
2. Зразки тестових завдань та ситуаційних задач:
1. Як зміниться кількість лейкоцитів після прийому їжі, при вагітності, виражених емоціях? Як називається такий стан?
2. Які з перерахованих нижче клітин не відносяться до зрілих лейкоцитів?
А. Базофіл; В. Лімфоцит; С. Моноцит; D. Еозинофіл; Е. Метамієлоцит.
3. Які переваги визначення груп крові за цоліклональними антитілами порівняно з методом визначення за стандартними сироватками?
4. При обстеженні хворого була виявлена недостатня кількість імуноглобулінів. Які з перелічених клітин виробляють імуноглобуліни?
А. Плазматичні. В. Т-лімфоцити. С. Моноцити. D. Лімфобласти. E. Плазмобласти.
5. Обстежувана Ж., 25 років, звернулася до лікаря зі скаргами на погіршення зору в сутінках. Такий стан спостерігається вже 2 роки. Яка загальна кількість лейкоцитів у неї, якщо інших захворювань не виявлено?
А. 3 Г/л. В. 5 Г/л. С. 10 Г/л. D. 15 Г/л. E. 23 Г/л.
3. Правильні відповіді на тести і ситуаційні задачі:
1. Зросте. Лейкоцитоз. 2. Е. 3. Швидкість виконання роботи. 4. А. 5. В
4. ДЖЕРЕЛА ІНФОРМАЦІЇ
А. Основні:
1. . Нормальна фізіологія /За ред. В.І. Філімонова. – К., 1994. – С. 252, 255-261, 263-276, 284-287.
2. . Посібник з нормальної фізіології /За ред. В.Г. Шевчука, Д.Г. Наливайка. – К., 1995. – С. 106-113, 126-138.
3. Фізіологія людини: підручник / В.І. Філімонов. – К.:ВСВ «Медицина», 2010. – С. 444 – 464.
4. . Основи функціональної діагностики (навчальний посібник) /Вадзюк С.Н.. – Тернопіль, 2001. – С. 8-9, 30-32.
5. . Довідник основних показників життєдіяльності здорової людини /За ред. проф. С.Н.Вадзюка – Тернопіль, 1996. – С. 3-9.
6. . Лекційні матеріали.
7. Веб-сторінка університету >Інтранет > На допомогу студентам > Матеріали для підготовки до практичних занять > Кафедра нормальної фізіології > Медичний факультет > Цикл 2: Фізіологія крові > Фізіологія лейкоцитів. Лейкоцитарна формула. Групи крові.
8. Веб-сторінка університету > Інтранет > На допомогу студентам > Презентації лекцій > Кафедра нормальної фізіології > Медичний факультет > Цикл 2: Фізіологія крові > Фізіологія лейкоцитів. Групи крові.
В. Додаткові:
1. Физиология человека /Под ред. Г.И. Косицкого. – М., 1985. – С. 212-213, 217-222, 226-229, 231-237.
2. Физиология человека /Под ред. Р. Шмидта и Г. Тевса. – М.: Мир, 1996. – Т. 2. – С. 431-439.
5. МЕТОДИКА ВИКОНАННЯ ПРАКТИЧНИХ РОБІТ
– 9.00 – 12.00.
Тема: 1.
Робота 1. Підрахунок загальної кількості лейкоцитів.
Набрати в змішувач для лейкоцитів до позначки 0,5 кров і до позначки ІІ 3 % розчину оцтової кислоти, забарвленої генціанвіолетом. Частіше розведення проводять в пробірці. У суху чисту пробірку відміряти 0,4 мл 3 % розчину оцтової кислоти, забарвленої генціанвіолетом і 0,02 мл крові. Отриманою сумішшю заповнити камеру Горяєва, як при підрахунку еритроцитів.
Лейкоцити підрахувати у 100 великих квадратах, згрупованих по 4, при малому збільшенні мікроскопа, в затемненому полі зору.
Кількість лейкоцитів визначити за формулою:
х = [(А · 20) : 1600] · 4 · 109, де
х – кількість лейкоцитів у
А – кількість лейкоцитів, підрахованих у 100 великих квадратах
20 – розведення крові
1600 – кількість малих квадратів у 100 великих.
У протоколі схематично зобразити сітку Горяєва з розміщеними над нею лейкоцитами.
У висновку вказати чи відповідає встановлена кількість лейкоцитів фізіологічній нормі. Якщо ні, то розкрити можливу причину цього відхилення.
Тема 2. ЛЕЙКОЦИТАРНА ФОРМУЛА
Робота 1. Підрахунок лейкоцитарної формули.
У мазку крові здорової людини, під імерсійним об’єктивом знайти 100 лейкоцитів, переміщаючи поле зору зигзагоподібною лінією (лінією меандра). З отриманих результатів вивести співвідношення між окреми видами лейкоцитів і це подати у вигляді таблиці, а також схематично зобразити виявлені лейкоцити.
|
Одиниці |
Види лейкоцитів |
||||||
Нейтрофіли |
Базо-філи |
Еозино– філи |
Лімфо– цити |
Моно- цити |
|||
|
юні |
паличко– ядерні |
сегменто– ядерні |
|||||
|
Умовні |
|
|
|
|
|
|
|
|
Абсолютні |
|
|
|
|
|
|
|
У висновку вказати, чи відповідає лейкоцитарна формула фізіологічній нормі.
Робота 2. Визначення індексу ядерного зсуву нейтрофілів.
Індекс ядерного зсуву нейтрофілів (ІЯЗ) розрахувати за формулою:
ІЯЗ = (М + Ю + П) : С, де
М – мієлоцити; Ю – юні; П – паличкоядерні; С – сегментоядерні.
У висновку вказати, чи відповідає лейкоцитарна формула, індекс ядерного зсуву фізіологічній нормі. Якщо ні, то розкрити можливу причину цих відхилень.
Тема 3. ГРУПИ КРОВІ.
Робота 1. Визначення груп крові в системі АВ0 за стандартними сироватками
На чисту білу площину, після відповідних записів склографом, нанести стандартні сироватки першої, другої і третьої груп крові двох серій. У кожну з крапель стандартної сироватки, кутом чистого предметного скла, внести в десять разів меншу кількість крові, а через 2-3 хвилини додати по одній краплі фізіологічного розчину. За появою аглютинації спостерігати протягом 5 хвилин. Встановити групу крові. У випадку четвертої групи крові, провести додаткове визначення із стандартною сироваткою цієї групи.
У протоколі схематично зобразити отримані результати.
Робота 2. Визначення груп крові в системі АВ0 за цоліклональними антитілами
Чисту білу площину склографом розділити на 2 сектори: анти-А, анти-В. Нанести у відповідний сектор по 1 краплі цоліклонів анти-А та анти-В. Куточком предметного скла внести в десять разів меншу кількість крові в обидві краплі цоліклонів. Спостереження за перебігом реакції провести, погойдуючи тарілку протягом 2,5 хвилини.
Отримані результати зобразити схематично.
У висновку до проведених робіт вказати, до якої групи в системі АВ0 належить досліджувана кров і що лежить в основі використаних методик.
Робота 3. Визначення резус-фактора за цоліклональними антитілами
Нанести на чисту білу площину 1 краплю цоліклону анти-D. Куточком предметного скла внести в десять разів меншу кількість крові. Спостереження за перебігом реакції провести, погойдуючи тарілку протягом 2,5 хвилини.
Отримані результати зобразити схематично.
У висновку вказати, резус-позитивна, чи резус-негативна досліджувана кров і на чому грунтується визначення резус-фактора.
Робота 4. Визначення індивідуальної сумісності крові
У пробірку внести 1 мл крові реціпієнта і процентрифугувати для розділення плазми і клітин. Потім взяти краплю плазми і додати в 10 разів менше крові донора, змішати. Через 5 хвилин оцінити результат. Відсутність аглютинації вказує на сумісність крові донора і реціпієнта.
У висновку вказати сумісна чи несумісна крові реціпієнта з кров‘ю донора, на виявлення чого направлена дана проба.
6. Семінарське обговорення теоретичних питань і практичної роботи:
– 12.30 – 14.00.
7. Година самостійної роботи студентів:
виконується шляхом розв’язування ситуаційних задач з кожної теми, завдань тестових ліцензійних іспитів „Крок” і конструктивних запитань.
-14.15 – 15.00.
8. Студент повинен знати
1. Значення лейкоцитів.
2. Поняття про систему мононуклеарних фагоцитів.
3. Групи крові: поняття, класифікацію, групи кровозамінників.
9. Студент повинен вміти.
1. Визначати кількість лейкоцитів.
2. Підрахувати лейкоцитарну формулу.
3. Визначити групи крові в системі АВ0 і СДЕ.
Методичну вказівку склав – ас.Татарчук Л.В.
Обговорено та затверджено
на засіданні кафедри 13 червня 2013 року, протокол №11
Переглянуто і затверджено на засіданні кафедри
29 серпня 2013 р. протокол № 1