Гаструляція. Гісто- та органогенез. Позазародкові органи. Критичні періоди розвитку.
Користуючись лекціями (на web-сторінці кафедри розміщені презентації та текст лекцій), підручниками, додатковою літературою та іншими джерелами, студенти повинні підготовити такі теоретичні питання:
1. Визначення гаструляції. Способи гаструляції у хребетних.
2. Перша фаза гаструляції у людини. Способи утворення зародкових листків і розвитку провізорних органів.
3. Друга фаза гаструляції. Джерело утворення зародкової мезодерми і осьового комплексу зачатків органів.
4. Диференціація зародкових листків: екто-, енто- і мезодерми.
5. Гісто- і органогенез
6. Джерела розвитку амніона, жовткового мішка, алантоїса і хоріона.
7. Утворення, будова та функціональне значення жовткового мішка.
8. Розвиток, будова та функція амніона.
9. Алантоїс, його розвиток і значення.
10.Формування хоріона, первинні та вторинні ворсинки, їх морфологічні особливості.
11.Утворення та будова пуповини.
Морфогенез
Морфогенез – формування просторової організації організму і його частин. Багатоклітинний організм розвивається з заплідненої яйцеклітини (зигота) не тільки шляхом збільшення кількості клітин (проліферація) і збільшення маси зародка (зростання). Одночасно визначається доля клітин, що утворюються, тобто клітина «вибирає» один з багатьох можливих шляхів розвитку. Цей процес відомий як «детермінація». Детерміновані клітини спеціалізуються (диференціювання), тобто набувають певну структуру і виявляються здатними виконувати конкретну функцію. Одночасно здійснюється морфогенез – клітини координованим чином формують органи і архітектуру просторової організації тіла. Формування просторової архітектури зародка (організму) і його частин (органів) здійснюється при реалізації наступних морфогенетичних процесів: спрямована міграція клітин (у тому числі спрямований зростання частин клітин, наприклад, відростків нервових клітин), загибель клітин. Таким чином, проліферація, ріст, детермінація, диференціювання, морфогенез, міграції клітин та їх загибель – важливі події (морфогенетичні процеси) при розвитку багатоклітинного організму.
Все різноманіття клітин організму (різні типи клітин) розвивається з однієї єдиної (зиготи). Говорячи формально, всі клітини організму – клон, родоначальником якого є запліднена яйцева клітина. Клон, за визначенням, сукупність ідентичних клітин, що розвинулися з єдиною клонообразующей клітини. Однак, для організму, що розвивається це не так: існує безліч різних клітинних типів, що виникають в результаті різної – диференціальної – активності генів. У чому ж причина різноманіття при початковій ідентичності? По суті, у нас одна відповідь – ендогенна програма різноманіття у вигляді ядерного геному зиготи. Отже, генетична програма – джерело різноманітності клітин. Таке твердження тривіальне, але вірне для одноклітинного зародка. І це ж твердження стає неочевидним для багатоклітинного зародка, хоча б у силу їх різної взаємної позиції (наприклад, на поверхні зародка або в глибині, в лівій або правій частині зародка, у верхній або нижній його частині). Отже, для багатоклітинного зародка зобов’язані існувати зовнішні по відношенню до конкретної клітці зародка фактори, що визначають диференціальну активність генів в різних клітинах зародка. Розгляд такої можливості визначає гіпотеза позиційної інформації в термінах «морфогенетическое поле», «ліве-праве», «гомеобокс», «гомеозісние гени». Іншими словами, виникнення різноманітності різних клітин в багатоклітинному зародку зміщується в площину міжклітинних взаємодій («індукція», «індукційні взаємодії», «фактори індукції»). Іншими словами, диференціальна активність генів визначається позицією конкретної клітини і реалізується за допомогою різного типу міжклітинних взаємодій.
В ембріогенезі з’являються відмінності між клітинами: виникають різні клітинні типи. Конкретні типи клітин утворюють тканини. З клітин різної тканинної приналежності формуються органи. Визначення шляху розвитку тотипотентних клітин концептуса і поліпотентних клітин концептуса, ембріона, плода при внутрішньоутробному розвитку і організму в постнатальному онтогенезі відбувається в ході детермінації – процесу, в результаті якого “компетентна клітинна система вибирає один з багатьох можливих шляхів розвитку”. Така потенційна можливість розвиватися в різних напрямках позначається як проспективна потенція.
Диференціація – зовнішнє вираження детермінації. У ході спеціалізації конкретного клітинного типу (діфферон) формуються різні фенотипи клітин. Результат диференціювання – спеціалізована клітина конкретної морфології, що виконує певну функцію (стан термінальної диференціювання). У міру диференціювання поступово обмежуються потенції клітин розвиватися в різних напрямках. Диференціація необоротна і здійснюється тільки в одному напрямку – від менш диференційованою до більш диференційованої структурі. При диференціюванні клітини експресують строго певну при детермінації частина генома: транскрибують специфічні РНК і синтезують специфічні білки, що і визначає морфологічні та функціональні ознаки спеціалізації клітин. Отже, відмінності між клітинами, що володіють однаковим набором генів, визначає диференціальна активність генів.
Гени заплідненої яйцеклітини репресовані. Початок розвитку супроводжується дерепресія певних груп генів (в першу чергу генів, контролюючих проліферацію і загальний метаболізм клітини). Перші тканеспеціфіческіе гени активуються на стадії гаструляції. Пізніше, коли відбувається координована складання складних структур (органогенез), включаються інші гени. Різні клітинні типи експресують різні гени.
Обмеження проспективних потенцій (комітування). У міру диференціювання поступово обмежуються потенції клітин розвиватися в різних напрямках.
Наприклад, клітини несегментованої мезодерми мають потенції до диференціювання в різних напрямках і утворення міогенного, хондрогенного, остеогенного і інших напрямів диференціювання. Клітини міотома сомітов детерміновані до розвитку тільки в одному напрямку, а саме до утворення міогенного клітинного типу (поперечнопосмугована м’язова тканина скелетного типу).
Проліферація і диференціювання
Суттєва риса диференціювання полягає в тому, що диференціювання зазвичай настає після проліферації клітин. Клітини, які швидко розмножуються, як правило, є малодиференційованими (наприклад, клітини базального шару епітелію шкіри або мезенхімні клітини). Навпаки, високодиференційовані клітини, як правило, втрачають здатність до проліферації (наприклад, еритроцити і нейрони).
Диференціація є незворотна і здійснюється тільки в одному напрямку – від менш диференційованою до більш диференційованої структури. Для нетрансформованих клітин, а також для стовбурових клітин в умовах in vitro не слід застосовувати термін дедиференціювання (як правило, мова при цьому йде про межі клітинного типу і його пластичності).
Морфогенез здійснюється при реалізації різних морфогенетичних процесів: зростання, міжклітинні взаємодії, індукція, спрямована міграція клітин, спрямований зростання частин клітин (наприклад, відростків нервових клітин), загибель клітин.
Ріст – збільшення маси і, як правило, лінійних розмірів за рахунок збільшення кількості клітин, морфо-функціональних одиниць органів, самих органів, систем органів і т.д. Збільшення маси без клітинних поділів спостерігають при гіпертрофії клітин в нормальних (наприклад, гіпертрофія хрящових клітин, гіпертрофія міометрія при вагітності) і патологічних умовах. У організмі виробляються численні гуморальні фактори, що стимулюють зростання, а також проліферацію різних клітинних типів, – фактори росту.
Міжклітинні взаємодії і індукція. Спеціалізацію клітин і утворення нових структур направляють міжклітинні взаємодії та індукція. Природу клітинних взаємодій у морфогенез пояснює концепція позиційної інформації.
Загальний план тіла визначається дуже рано. Пізніше, протягом усього періоду формування органу або цілого організму, деталі морфогенезу уточнюються за допомогою сигналів позиційної інформації. Згідно концепції позиційної інформації, клітина «знає» своє місце розташування в координатної системі зачатка органу і диференціюється відповідно до цього положення. Позиційну інформацію клітина отримує від інших клітин. Більше того, клітина досягає стану термінальної диференціювання тільки за умови своєчасного отримання нею серії послідовних сигналів позиційної інформації. Зона, в межах якої ефективно діють сигнали позиційної інформації, називається морфогенетическим полем. Протягом ряду наступних клітинних поділів клітини морфогенетичного поля «пам’ятають» про своє початковому призначенні. Постійне активність гомеозисних генів визначає в клітці пам’ять про позиційної інформації.
У 1969 р. Люіс Вольперт запропонував модель позиційної інформації («французького прапора»), згідно якої положення клітини в морфогенетичному поле визначається відповідно з існуючою системою координат. Модель передбачає наявність спеціальних позиційних хімічних сигналів, або морфогенное, які продукуються клітинами-джерелами і формують у позаклітинному просторі дифузійні градієнти. Клітини-мішені реєструють градієнти морфогенное і інтерпретують їх для визначення своєї локалізації в морфогенетичному полі. Існують і інші уявлення про механізм, визначальному положення клітин в морфогенетичному полі. Так, відповідно до моделі послідовної передачі сигналу від клітини до клітини (sequential cell context model), передбачається послідовна індукція різних сигналів у розташованих поруч групах клітин з подальшим їх спільною дією на експресію специфічних генів в інших докладають клітинах.
Індукційні взаємодії. В органогенезі – координованій збірці різних тканинних структур – важливе значення мають індукційні взаємодії між ембріональними зачатками. В ході індукції клітини одного зачатка (джерело) впливають на клітини іншого зачатка (мішень). Джерело інструктує мішень до диференціювання в конкретну структуру або дозволяє диференціювання. Виникла структура надає індукуючий вплив на іншу мішень, і з’являється нова структура і т.д. Ембріогенез – суцільна низка індукційних взаємодій.
Первинна ембріональна індукція – вплив хордомезодерми на дорсальну ектодерму; результат – утворення зачатка нервової системи.
Закладка кінцівок. В результаті індукційного впливу клітин латеральної мезодерми на ектодерму виникає локальне потовщення ектодерми, разом зі скупченням мезодермальні клітин формує зачаток кінцівки.
Гаструляція
Гаструляція — період ембріогенезу, коли виникають три зародкові листки: ектодерма,ентодерма і мезодерма.В основі гаструляції лежить складний процес хімічних і морфогенетичних перетворень, який супроводжується розмноженням, ростом, керованим переміщенням і диференціацією клітин.
За часом гаструляція поділяється на дві фази: ранню і пізню.
В ранній фазі відбувається утворення зовнішнього (ектодерми)і внутрішнього (ентодерми) зародкових листків.
Пізня фаза полягає у формуванні мезодерми (середнього зародкового листка). В кінці гаструляції відбувається утворення осьових зачатків органів: нервової трубки, хордомезодермального зачатка і кишкової трубки.
Способи гаструляції
Гаструляція здійснюється такими способами: іміграції, інвагінації, епіболії та делямінації.
Іміграція полягає в активному виселенні частини бластомерів у бластоцель. Розрізняють уні-та мультиполярну іміграцію. За уніполярної іміграції виселення бластомерів відбувається лише з однієї певної ділянки бластодерми. За мультиполярної іміграції виселення бластомерів відбувається з усієї поверхні бластодерми. Бластомери, які виселились в бластоцель утворюють первинний внутрішній листок (ентодерму), а бластомери, які залишились на місці формують первинний зовнішній листок — ектодерму. Такий спосіб творення гаструли характерний для рептилій, птахів.
Інвагінація полягає у вп’ячуванні бластодерми вегетативного полюсу в напрямку до анімального. Внаслідок цього зародок із одношарового стає двохшаровим: має первинну ектодерму і ентодерму. Внаслідок інвагінації вегетативного полюсу до анімального бластоцель витискується і зберігається лише у вигляді щілини. Утворюється нова порожнина — гастроцель або порожнина первинної кишки. Гастроцель відкривається первинним ротом або бластопором. Краї бластопора називаються губами. Дорсальна губа, яка відповідає спинній стороні зародка, вентральна або черевна і ті, що лежать між ними, називаються боковими губами бластопора. Такий спосіб гаструляції характерний для ланцетника, голкошкірих та нижчих хордових.
в г
Схема механізмів ранньої гаструляції, а — інвагінація,
б — епіболія, в — іміграція, г — делямінація.
Епіболія — обростання дрібними бластомерами анімального полюсу великих бластомерів вегетативного, які переповнені жовтком. Такий спосіб гаструляції характерний для амфібій.
Делямінація — тангенціальне розщеплення поверхневого шару бластомерів на два: первинного зовнішнього (ектодерму) і первинного внутрішнього (ентодерму). Такий спосіб гаструляції властивий птахам та вищим хребетним.
У деяких хребетних гаструляція може здійснюватись за допомогою комбінації двох або трьох способів, але з перевагою одного із них (наприклад делямінація та міграція).
Після утворення двох зародкових листків починається формування осьових зачатків органів і одночасно творення третього зародкового листка — мезодерми. Наступає друга фаза гаструляції — пізня гаструляція.
Поперечний розріз зародка ланцетника під час
гаструляції (взято із І.Станека).
1 — первинна кишка, 2 — ектодерма, 3 — ентодерма, 4 — мезодерма (заштрихована), 5 — хорда, 6 — нервова пластинка або трубка, 7 — целом, 8 — кишка, 9 — первинні сегменти, 10 — міотом, 11 — міоцель, 12 — шкірна пластинка, 13 — вентральна мезодерма, 14 — вена, 15 — вісцеральний листок спланхнотома, 16 — парієтальний листок спланхнотома, 17 — бокова пластинка мезодерми, 18 — спланхноцель.
У ланцетника нервова пластинка виділяється із первинного зародкового листка, утворюючи по довжині зародка рівчак, який поглиблюється у вентральному напрямку. Потім відбувається змикання країв — виникає нервова трубка, а та, зовнішня частина зародкового листка, що залишилась, змикається і стає шкірною ектодермою. Так само, але в протилежному напрямку із хордомезодермального зачатка виділяється хордальна пластинка, яка формує трубку, і, зразу після цього, перетворюється у клітинний тяж-хорду. Отже, у формуванні нервової та хордальної пластинок у ланцетника приймає участь дорсальна губа бластопора, одначе, нервова пластинка розвивається із первинної ектодерми, а хордальна — із первинної ентодерми.
Утворення мезодерми у ланцетника пов’язане з дрібноклітинним матеріалом крайової зони, який вростає в ентодерму у вигляді двох стрічок і лягає з обох сторін хордальної пластинки. Цей матеріал вип’ячується в дорсальному напрямку у вигляді двох кишень між екто-і ентодермою. Спочатку ці кишені відкриваються в гастроцель, а потім відокремлюються у вигляді двох замкнутих складок, розміщених вздовж осі зародка між первинним зовнішнім і первинним внутрішнім листками гаструли. Дрібноклітинний матеріал ентодерми, який утворює замкнуті складки і є новоутвореним середнім зародковим листком — мезодермою. Спосіб творення мезодерми — ентероцельний.
У тварин з помірнотелолецитальними яйцеклітинами (амфібії) рання гаструляція відбувається шляхом поєднання епіболії та інвагінації, з перевагою епіболії. Наслідком цих процесів є утворення гаструли з двома листками: екто- і ентодермою. Одначе, майже весь дрібноклітинний матеріал крайової зони бокових губ бластопора, який не увійшов до складу ентодерми, проростає між первинним зовнішнім і первинним внутрішнім листками з обох боків від хорди. Скупчення цього дрібноклітинного матеріалу дістало назву телобластів. Останні розмножуються і утворюють мезодерму. Спосіб творення мезодерми — телобластичний.
У птахів рання гаструляція відбувається шляхом делямінації бластодиску, до якої приєднується іміграція. Друга фаза гаструляції протікає так: бластодиск зародка дуже розростається, в його центрі виділяється зародковий щиток, матеріал якого використовується для побудови тіла зародка. Та частина дискобластули, яка обмежує зародковий щиток, репрезентує позазародковий матеріал. Світле поле розміщене навколо зародкового щитка і побудоване із клітин, які відділились від жовтка підзародковою порожниною. Темне поле займає периферійну частину дискобластули і складається із клітин, які щільно прилягають до жовтка і ростуть по його поверхні.
Клітинний матеріал зародкового щитка зазнає складних переміщень. Клітини зародкового щитка починають рухатись спереду назад двома потоками — справа і зліва. Обидва потоки клітин зустрічаються в центрі на задньому кінці зародкового щитка, зливаються і переміщуються допереду по його середині. В результаті утворюється потовщений тяж клітин, який отримав назву первинної смужки. На передньому кінці первинної смужки формується первинний (гензенівський) вузлик.
Схема переміщення клітинного матеріалу в бластодискові зародка птахів на стадії закладки осьових органів (за А.Г.Кнорре).
А — утворення первинної смужки і первинного вузлика, Б — утворення хордомезодермального зачатка; 1 — ектодерма, 2 — матеріал майбутньої нервової пластинки, 3 — матеріал майбутньої хорди, 4 — первинний (головний) вузлик, 5 — первинна ямка, 6 — первинна смужка, 7 — первинна боріздка, 8 — хорда, 9 — мезодерма. Суцільні стрілки показують напрямок переміщення матеріалу в складі зовнішнього, а – пунктиром — в складі середнього зародкового листка.
Частина бластомерів, яка розміщується допереду від первинного вузлика, рухається в напрямку до нього і підвертається під ектодерму і формує зачаток хорди, який росте допереду між ектодермою і ентодермою.
Бластомери задньої половини зародкового щитка зміщуються до первинної смужки і через цю ділянку занурюються під ектодерму, розміщуючись у порожнині між ектодермою і ентодермою з обох боків від хорди. Цей матеріал утворює мезодерму — третій зародковий листок. У міру того як проходить виселення клітин з первинної смужки для закладки хорди і мезодерми на поверхні гаструли залишається матеріал ектодерми та нервової пластинки, яка входить до її складу. Найбільш глибоко розміщується зачаток кишкової ентодерми, який безпосередньо прилягає до поверхні жовтка.
Таким чином, первинна смужка і головний вузлик у птахів за своїм значенням відповідають бластопору ланцетника, так як у цьому місці відбувається переміщення зародкового матеріалу, яке приводить до утворення трьох зародкових листків: ектодерми, ентодерми і мезодерми. На кінець гаструляції в тілі зародка є усі зачатки, з яких виникає типовий для хордових комплекс осьових органів. Описані особливості гаструляції зберігаються і у ссавців.
Диференціація зародкових листків. Мезенхіма
Зародкові листки (ектодерма, ентодерма і мезодерма) є ембріональним джерелом розвитку тканин (гістогенез). Ембріональний гістогенез — процес виникнення тканин (епітеліальних, сполучних, м’язових і нервової) із низькодиференційованих клітин ембріональних зачатків, із сукупності і взаємодії тканин розвиваються органи (органогенез).
Ембріональний гістогенез — складний процес, в основі якого лежить клітинне розмноження, ріст, міграція, структурна і функціональна диференціація, підвищення ступеня інтегративності за рахунок встановлення міжклітинних та міжтканинних взаємодій, а також загибель клітин.
Виділяють чотири основних етапи диференціації:
1 — овотипова, яка реалізується на рівні заплідненого яйця. Здійснюється активний перерозподіл цитоплазматичного матеріалу зиготи (овоплазматична сегрегація), внаслідок чого формуються прєзумптивні зони — ділянки цитоплазми, з яких ймовірно виникнуть ті чи інші зачатки зародка;
2 — бластомерна — відмінність в клітинному матеріалі встановлюється дуже рано: бластомери відрізняються один від одного (наприклад, у бластоцисті розрізняють трофобласт і ембріобласт);
3 — зачаткова диференціація (під час гаструляції утворюються зародкові листки: ектодерма, ентодерма і мезодерма);
4 — гістогенетична (під час пізньої гаструляції виникають зачатки тканин).
Дорсальний відділ мезодерми спочатку ділиться на с о м і т и , починаючи з головного кінця. В кожному соміті із зовнішньої частини диференціюється дерматом — джерело сполучнотканинної основи шкіри, із медіальної — склеротом — джерело хрящової і кісткової тканин, із центральної — міотом, — джерело скелетної м’язової тканини.
Із сегментних ніжок (нефротома) закладаються епітелії нирок і гонад.
Утворення осьових зачатків у зародка курки (за А.Г.Кнорре).
1 — нервова трубка, 2 — ектодерма, 3 — хорда, 4 — соміти мезодерми, 5 — вісцеральний листок спланхнотома, 6 — парієтальний листок спланхнотома, 7 — кишкова ентодерма.
Вентральна мезодерма — спланхнотом — розщеплюється на парієтальний і вісцеральний листки, що обмежують порожнину — целом.
В процесі розвитку зародка дуже рано утворюється мезенхіма, яка представлена нагромадженням клітин з відростками, що заповнюють проміжки між зародковими листками. У хребетних головним джерелом мезенхіми є мезодерма, хоча в її утворенні беруть участь і екто- і ентодерма.
Кожний зародковий листок диференціюється в певних напрямках і в більшості хребетних відбувається подібно.
Позазародкові (провізорні) органи
Провізорні (тимчасові) органи виникають на ранніх стадіях розвитку і створюють сприятливі умови для життя, росту та розвитку власне зародка. Вони функціонують лише під час ембріонального періоду. До провізорних органів відносяться: 1. жовтковий мішок; 2. амніон; 3. серозна оболонка; 4. алантоїс; 5. плацента; 6. пуповина (рис. 12а).
У хордових тварин позазародкові органи вперше появляються в риб. Це жовтковий мішок. Останній виникає на стадії ранньої гаструли і в його формуванні беруть участь позазародкова ектодерма, позазародкова ентодерма та вісцеральний і парієтальний листки позазародкової мезодерми.
Зародок підноситься над жовтком і відмежовується від нього за допомогою тулубової складки. Зародкова ентодерма згортається в кишкову трубку. Після формування тулубової складки жовтковий мішок залишається зв’язаним із кишковою трубкою за допомогою жовткового стебельця. Функції жовткового мішка: трофічна і кровотворна.
З виходом тварин на сушу з’являються нові позазародкові органи: амніон, серозна оболонка, алантоїс, плацента. Амніон настільки характерний для рептилій, птахів і ссавців, що всіх їх об’єднують під загальною назвою а м н і о т .
Схема утворення амніотичних та тулубових складок
Так, у птахів, одночасно з тулубовою складкою навколо тіла зародка закладаються амніотичні складки. Амніотичні складки утворюються за рахунок позазародкової ектодерми і парієтального листка позазародкової мезодерми. Ці складки ростуть в напрямку дорсальної поверхні зародка назустріч одна одній і зростаються: ектодермальний листок з ектодермальним, мезодермальний з мезодермальним. Внаслідок цього навколо тіла зародка утворюється дві оболонки: внутрішня — амніотична, зовнішня — серозна.
Функція амніотичної оболонки полягає в створенні водного се-седовища, необхідного для розвитку зародка, а серозна оболонка виконує функцію дихання.
Алантоїс утворюється як виріст вентральної стінки заднього відділу первинної кишки, який покриває вісцеральний листок позазародкової мезодерми. Функція газообміну і виділення.
У ссавців у зв’язку з переходом до внутрішньоутробного розвитку провізорні органи формуються набагато раніше, ніж у птахів. Уже на стадії бластоцисти диференціюється трофобласт, який формує хоріон. Хоріон, вростаючи в слизову оболонку матки, формує плаценту (дитячу сторону). Функції плаценти: трофічна, депонуюча, дихальна, видільна, ендокринна і захисна.
Жовтковий мішок у більшості ссавців виконує, в основному, кровотворну і лише частково трофічну функції, в його стінці також формуються первинні статеві клітини — гонобласти.
Алантоїс служить провідником судин від зародка до плаценти (алантохоріон) і частково виконує екскреторну функцію.
Амніон в усіх ссавців досягає значного розвитку, секретуючи амніотичну рідину, створює водне середовище для розвитку зародка і захищає його від механічних пошкоджень.
Ембріональний розвиток людини
Для зародка людини, як і всіх плацентарних, характерним є ранній розвиток позазародкових органів і, в першу чергу, трофобласта. Клітини трофобласта активно розмножуються і на 7-у добу з одношарового трофобласт перетворюється у двохшаровий. Внутрішній шар зберігає клітинну будову і називається цитотро-фобластом, зовнішній шар має неклітинну організацію і називається синцитіотрофобластом. В останньому виявляється висока активність гідролітичних ферментів.
Перша фаза гаструляції протікає з 7-ої до 14-ої доби і полягає в утворенні зовнішнього (ектодерми) та внутрішнього (ентодерми) зародкових листків. Перша фаза гаструляції в ембріона людини відбувається шляхом делямінації. Від вентральної частини зародкового вузлика відщеплюється тонкий шар клітин — гіпобласт. Одночасно серед клітин зародкового вузлика над гіпобластом відбувається кавітація — процес утворення порожнини за рахунок нагромадження рідини у центрі вузлика. Клітини, що оточують порожнину, набувають епітеліоподібної форми. Пухирець, який утворився шляхом кавітації, називається амніотичним пухирцем. Краї гіпобласта підвертаються вниз і формують жовтковий мішок.
Прилеглі одна до одної частини обох пухирців: дно амніо-тичного і дах жовткового утворюють зародковий щиток або ембріональний диск. Зародковий щиток складається із первинної зародкової ектодерми — епібласта, який є дном ам-ніотичного пухирця, та первинної ентодерми, або гіпобласта, який є дахом жовткового пухирця. Інші частини амніотичного пухирця, крім його дна, формують позазародкову ектодерму.
З гіпобласта (первинної ентодерми) утворюється лише позазародкова ентодерма. Інтенсивно проліферуючі клітини гіпобласта переміщуються до внутрішньої поверхні трофобласта і формують стінку жовткового мішка.
Е п і б л а с т (первинна ектодерма) — клітини зародкового вузлика, які залишились після утворення гіпобласта. З епібласта розвивається зародок, а також позазародкова ектодерма.
Зародковий щиток — основна структура, яка бере участь у гаструляції. Він складається із епібласта, який контактує з гіпобластом. Із зародкового щитка на 8-му добу розвитку починається виселення клітин в порожнину бластоцисти, які формують позазародкову мезодерму (мезенхіму). Стінки обох пухирців обростають мезенхімою, яка утворює сполучнотканинну основу амніона і жовткового мішка. Підростаючи до трофобласта мезенхіма формує хоріон і амніотичну ніжку. Остання закладає основу майбутньої пуповини і утворює тяж клітин позазародкової мезодерми від амніотичного та жовткового пухирців до трофобласта.
На 13-у-14-у добу зародок має таку будову. Трофобласт разом із позазародковою мезенхімою утворює хоріон. В тому місці, де зародок повернений в глибину стінки матки, розміщуються амніотичний і жовтковий пухирці, які прилягають один до одного. Вони прикріплюються до хоріона за допомогою амніотичної ніжки. В місці прилягання дна амніотичного і даху жовткового пухирців утворюється зародковий щиток. Потовщене дно амніотичного пухирця — це епібласт, а все решта — позазародкова ектодерма. Дах жовткового пухирця — гіпобласт, формує стінку жовткового пухирця (позазародкова ентодерма).
Таким чином, у людини в ранні періоди ембріогенезу найбільшого розвитку досягають позазародкові органи — хоріон, амніон і жовтковий мішок.
Друга фаза гаструляції починається на 14-у-15-у добу і продовжується до 17-ої доби розвитку. її реалізація стає можливою після вище описаних процесів формування позаза-родкових органів і встановлення гематотрофного способу живлелня.
Формування зародкової мезодерми здійснюється так: клітини епібласта починають інтенсивно ділитись і рухатись (імігрувати) двома потоками у краніокаудальному напрямку. Обидва потоки клітин зустрічаються в центрі на задньому кінці епібласта, зливаються і переміщуються допереду з формуванням серединного потовщення — так званих первинної смужки та первинного (гензенівського) вузлика.
Розвиток зародка людини, (взято з Carlson В.).
А — бластоциста, Б — рання гаструляція, В — ембріон на 9 добу; 1 — ембріобласт, 2 — гіпобласт, 3 — бластоцель, 4 — епібласт, 5 — трофобласт, 6 — амніон, 7 — синцитіотрофобласт.
Клітинний матеріал епібласта, який розміщується допереду від первинного вузлика вздовж серединної лінії зародка, мігрує через головний кінець первинної смужки в ділянці гензенівського вузлика у напрямку до майбутньої головної частини і формує осьову струну заодка — хорду . Таким чином, хорда є похідним мезодерми. Одночасно клітини первинної смужки через первинну борозенку вселяються у проміжок між екто- і ентодермою і розростаються в латеральному та краніальному напрямках у вигляді мезодермальних крил навколо хорди (див. формування у птахів). Первинна смужка появляється на 14-у добу і її чітко видно з 15-ої-16-ої доби розвитку.
Ентодерма зародка — клітини, що складають цей листок, мігрують з епібласта через первинну смужку.
Ектодерма зародка утворюється за рахунок клітин, які не виселились із епібласта.
Таким чином, на кінець пізньої гаструляції зародок складається із трьох зародкових листків (екто-, енто- та мезодерми), які утворились із первинної ектодерми або епібласта.
Простір між зародковими листками заповнює ембріональна сполучна тканина — мезенхіма. Джерелом утворення мезенхіми служить мезодерма, у меншій мірі екто- і ентодерма.
З 15-ої доби в амніотичну ніжку із задньої частини кишкової ентодерми вростає пальцевидний виріст — алантоїс. Таким чином, на кінець другої фази гаструляції завершується утворення трьох зародкових листків і всіх позазародкових органів (рис. 21).
З 17-ої до 20-ої доби триває так званий пресомітний період, в якому відбувається відокремлення тіла зародка від позазародкових органів шляхом утворення тулубової складки і за вершения формування осьових зачатків.
Нейруляція і утворення сомітів
В результаті гаструляції сформувались зародкові листки, частини яких, впливаючи один на одного, індукують утворення нових структур. Приклад: первинна (нейральна) ембріональна індукція, результатом якої є утворення із дорсальної ектодерми нервової трубки.
Нейруляція — процес формуваня нервової трубки. Вона починається з 16-ої доби і завершується до 22-ої-23-ої доби.
Стадії нейруляції:
1. Утворення нервової плистинки із дорсальної ектодерми під впливом індуктора — хордомезодерми;
2. Утворення нервового рівчака;
3. Поява нервових валиків;
4. Формування нервового гребеня і виселення із нього клітин;
5. Злиття валиків і утворення нервової трубки;
6. Змикання ектодерми над нервовою трубкою.
На 20-у добу ембріонального розвитку починається сомітний період. Дорсальні ділянки мезодерми зародка діляться на окремі сегменти, які лежать по обидва боки від хорди — с о м і т и .
Утворення сомітів віідбувається від головного до хвостового кінця зародка паралельно з регресією гензенівськом вузлика. Нова пара сомітов утворюється ззаду від останньої вже сформованої пари через певний проміжок часу. Цей інтервал становить у середньому 6,6 години. В сомите існує порожнина, обмежена клітинами, пов’язаними між собою за допомогою щільних контактів. В кожному соміті розрізняють склеротом, дерматом і міотом; їх клітини мають свої шляхи міграції і служать джерелом для різних структур.
Утворення соміта і наступне виселення з нього клітин. Зліва – мезодермальні клітини зосереджені латеральніше нервового жолобка навколо невеликої порожнини; праворуч – клітини вентральної та медіальної частини сомита, розташованого латеральніше нервової трубки, починають мігрувати в напрямку хорди; сукупність цих клітин – склеротом.
Склеротом. Під впливом хорди і нервової трубки клітини вентромедіальної ділянкиі сомітов (склеротом) інтенсивно розмножуються і виселяються з сомита, оточуючи хорду і вентральнy частинy нервової трубки. Виселені клітини диференціюються в хрящові і утворюють хребці, ребра і лопатки.
Міотом і дерматом. У дорсолатеральній частині соміта виділяють міотом (внутрішній шар клітин, який утворює згодом кісткову мускулатуру) і дерматом (зовнішній шар, зачаток сполучнотканинної частини шкіри).
На 22-у добу розвитку в ембріона є 7 пар сегментів, а на 35-у добу — 43–44- пари.
Латеральна мезодерма не сегментується, а розщеплюється на парієтальний (дорсальний) і вісцеральний (вентральний) листки спланхнотома. Невелика ділянка мезодерми, яка зв’язує соміти із спланхнотомом називається нефротом, з якого утворюється зачаток сечовидільної і статевої системи.
На 4-му тижні завершується нейруляція і диференціація мезодерми, починається утворення тканин. Гістогенез відбувається паралельно з органогенезом і системогенезом, але процес їхнього росту і становлення функцій продовжується у плодовому і постнатальному періодах.
Органогенез. На 4-му тижні завершується нейруляції, починається активна закладка органів – органогенез. На цьому терміні з’являються зачатки кінцівок і закладаються основні системи органів, але процес їх росту і становлення функцій продовжується в плодовому та постнатальному періодах. Згідно клональної теорії розвитку, будь-яка тканина і орган беруть початок з невеликої групи клонів, кожен з яких утворюється зі своєї стовбурової клітини. Наприклад, фоторецепторні клітини обох очей формуються з 20 клонів, проксимальні канальці нирок відбуваються з 4-5 клітин. На ранніх стадіях становлення загального плану тіла важливу роль відіграє мезодерма, що служить носієм позиційної інформації. Вирішальне значення в органогенезу мають індукційні взаємодії між клітинами.
Формування цілого органу здійснюється в ході складних морфогенетичних процесів, які, в свою чергу, грунтуються на молекулярно-генетичних подіях. Беруть участь у формуванні цілого органу молекулярно-морфогенетичні системи, які запускаються декількома або навіть одним геном. Активація цих генів призводить до включення и тканині органоспецифічних синтезів, що визначають специфіку даного органу.
провізорні органи людини
Уже на ранніх стадіях ембріогенезу людини відбувається закладання провізорних органів: хоріона, амніона, жовткового мішка і алантоїса. Вони утворюють оболонки зародка, зв’язують його з організмом матері і виконують певні спеціальні функції.
Амніон — розташована навколо плода суцільна оболонка, заповнена амніотичною рідиною (плідний міхур). Амніотична оболонка складається з двох частин — внутрішньої епітеліальної та зовнішньої сполучнотканинної. До 3-го місяця пренатального онтогенезу епітелій амніона одношаровий плоский, а після 3-го місяця — призматичний у ділянці прилягання амніона до хоріона, а в інших ділянках — кубічний. Призматичний епітелій плацентарного диска продукує навколоплідні води, а кубічний (позаплацентарний) епітелій здійснює їх резорбцію. Наявність амніотичної оболонки забезпечує оптимальні умови розвитку плода у водному середовищі, захищає його при струсах, дозволяє рухатись і попереджує злипання плода з навколишніми тканинами.
В ділянці пупкового кільця амніон переходить на пуповину і далі на плодову частину плаценти, утворюючи їх епітеліальний покрив. Зародковий (ембріональний) і плодовий періоди розвитку людини відбуваються всередині плодового міхура.
Утворення амніона. Одночасно з розшаруванням внутрішньої клітинної маси на епібласт і гіпобласт утворюється амніотична порожнина, обмежена епібласт івнезародишевой (амніотичної) ектодермою. У ході гаструляції клітини позазародкової мезодерми обростають амніотичну ектодерму, формуючи зовнішній шар амніону.
Амніотичні складки. На краніальному кінці амніон утворює головну амніотичну складку. Із збільшенням розмірів зародка його голова росте вперед в амніотичну складку, увігнутий край якої зміщується в каудальному напрямку. Бічні амниотические складки формуються по обидві сторони зародка за рахунок країв головний складки. Хвостова амніотична складка утворюється на каудальному кінці зародка і росте в краніальному напрямку. Головна, бічні і хвостова амніотичні складки сходяться над зародком і замикають амніотичну порожнину. Місце з’єднання амниотических складок – амніотичний шов; тут утворюється зникаючий згодом тканинний тяж.
Утворення амніотичної рідини. Сформований амніотичесний мішок наповнюється рідиною, що захищає зародок при струсі, що дозволяє плоду здійснювати рухи і запобігає злипання зростаючих частин тіла один з одним і з навколишніми тканинами. Амніотична рідина відіграє важливу роль у розвитку травної, дихальної та сечовидільної систем. На 99% амніотична рідина складається з води, 1% припадає на білки, жири, вуглеводи, ферменти, гормони, неорганічні солі. У амніотичної рідини виявлені епітеліальні клітини амніону, шкіри, кишечника, дихальних і сечовидільних шляхів, фібробласти, клітини мезенхіми. До кінця вагітності об’єм рідини становить 700-1000 мл.
Багатоводдя (hydramnios). Збільшення кількості амніотичної рідини (2000 мл і більше) виникає при порушенні заковтування амніотичної рідини плодом. Многоводие поєднується з аненцефалією і атрезією стравоходу.
Маловоддя (oligohydramnios). Зменшення кількості амніотичної рідини (менше 400 мл) часто пов’язано з ПН. У разі агенезії нирок маловоддя обумовлено відсутністю вкладу сечі у загальний об’ємг амніотичної рідини.
Утворення і циркуляція амніотичної рідини. Хоріоамніотична мембрана. У результаті збільшення плодового міхура відбувається поступова облітерація позазародкового целома (порожнини хоріона). При цьому амніотична мембрана зливається з хоріоном, утворюючи хоріоамніотічну мембрану. Шляхом дифузії через хоріоамніотіческую мембрану з децидуальної оболонки в плодовий міхур надходить основний обсяг амніотичної рідини. Водні канали, представлені аквапоринами 1, 8 і 9, забезпечують реабсорбцію води, підтримуючи гомеостаз амніотичної рідини.
Нирки. У амніотичну рідину плід виділяє сечу, до 0,5 літра в день в останньому триместрі вагітності.
Легені. Епітелій респіраторного тракту в добу виділяє 300-400 мл рідини, що надходить в амніон. У плодовому періоді легені заповнені амніотичної рідиною, яка швидко резорбується у новонародженого.
Кишечник. Плід заковтує амніотичну рідину (до 400 мл на добу), яка таким чином потрапляє в кишечник, звідки походить її абсорбція в кров. У результаті продукти обміну, що надходять в амніотичну рідину з нирок і легень, через плацентарний бар’єр виводяться в кров матері.
Жовтковий мішок (винесена за межі зародка частина первинної кишки) — стінка його складається із двох шарів: внутрішній — позазародкова ентодерма, та зовнішній, утворений позазародковою мезодермою. Після формування тулубової складки жовтковий мішок залишається зв’язаним з кишковою трубкою за допомогою жовткового стебельця. Позазародкова мезодерма жовткового мішка є місцем ембріонального гемопоезу. Тут формуються кров’яні острівці, в яких із стовбурових кровотворних клітин диференціюються клітини крові. Позазародкова ентодерма служить джерелом первинних статевих клітин (гоноцитобластів). Вони мігрують в зачатки гонад, де і диференціюються в гамети. З 7-го-8-го тижня ембріогенезу відбувається швидкий зворотній розвиток жовткового мішка і його залишки можна знайти у складі пупкового канатика.
Диференціювання гемангіобластів. Гемангіобласти, клітини попередники стовбурової кровотворної клітини і ендотеліальних клітин судин, диференціюються з позазародкової мезодерми. Морфогени Ihh, VEGF, ретиноевая кислота секретуються клітинами позазародкової ентодерми і стимулюють диференціювання гемангіобластів, ініціюючи в клітинах експресію факторів транскрипції (GATA1, GATA2, Tal-1), факторів гемопоезу (Lmo2), рецепторів VEGF (Flk1 і Flt1), антигенів диференціювання (CD34 , CD31).
Диференціювання примордіальних статевих клітин. На другому тижні ембріонального розвитку в проксимальної частини епібласта диференціюється приблизно 40 прімордіальних статевих клітин. Морфогени BMP4 і BMP8b, секретуються клітинами позазародкової ектодерми, і BMP2, що продукується клітинами внезародишеваяентодерми, контролюють диференціювання прімордіальних статевих клітин. Репрессор транскрипції Blimp1 регулює диференціальну активність гомеозісних генів, експресуються в статевих клітинах. У ході гаструляції експресія Ifitm / mil / fragilis (індукований інтерфероном трансмембранний білок) забезпечує міграцію клітин з епібласта через первинну смужку в ентодерму жовткового мішка за принципом репульсивних (відразливого) механізму. У ході міграції статеві клітини «цураються» клітин мезодерми, також експресують Ifitm / mil / fragilis. На 4-му тижні розвитку прімордіальние статеві клітини з жовткового мішка по ходу брижі мігрують у напрямку статевих валиків.
Дивертикул Меккеля. Приблизно в 2% випадків (частіше у чоловіків) частину жовткового стеблинки, прилегла до кишки, утворює дивертикул Меккеля – сліпий відросток клубової кишки.
Схематичне зображення походження позазародкових органів у ранньому ембріогенезі. Зародок знаходиться в порожнині амніону. Жовтковий мішок пов’язаний з зачатком травної системи, а з каудальної її частин виростає аллантоїс. Всі ці структури знаходяться в ендоцеломічній порожнині. Хоріон топографічно і структурно поділяється на гладкий і ворсинчастий.
Алантоїс. Вентральна тінка жовткового мішка до 16-го дня розвитку формує невеликий виріст – алантоїс (грец. аllas, ковбасовидниї), утворений позазародковою ентодермою і мезодермою. Устя алантоїса відкривається в клоаку, а його дистальна частина проникає в ніжку тіла. У людини алантоїс є рудиментом, він не функціонує як орган дихання або резервуар для остаточних продуктів обміну у тварин, але має важливе значення в ембріональному кровотворенні і ангіогенезі. На 3-5-му тижні розвитку в стінці алантоїса відбувається гемопоез і формуються кровоносні судини пупкового канатика (дві пупкові артерії і одна пупкова вена). Клітини позазародкової мезодерми експресують специфічні для гемопоезу фактори транскрипції (GATA1, GATA2, Tal-1), рецептори VEGF. На 7-му тижні ембріогенезу уроректальная перегородка розділяє клоаку на пряму кишку і сечостатевий синус , з’єднані з алантоїсом (див. РИС. 12-42). ТОМУ Проксимальний відділ алантоїса має відношення до утворення сечового міхура, що слід враховувати при аномаліях розвитку цього органу. На 2-му місяці ембріогенезу алантоїс дегенерує, а на його місці з’являється урахус – щільний фіброзний тяж, що тягнеться від верхівки сечового міхура до пупочного кільця. У постнатальному періоді урахус організується в серединну пупкову зв’язку.
Аномалії урахуса. Пупкові міхуреві свищі. При повному незарощенні просвіту урахуса зберігається його зв’язок з порожниною сечового міхура, що є причиною виділення сечі з пупка.
Кіста урахуса. Часткова облітерація урахуса призводить до утворення замкнутих порожнин, заповнених інфікованої сечею.
Хоріон — формується внаслідок підростання позазародкової мезодерми до трофобласта. У становленні хоріона розрізняють три періоди: до утворення ворсинок — передворсинковий (до 7-ГО-8-ГО дня розвитку), період утворення ворсинок (до 50-го дня розвитку) і період котиледонів (з 50-го до 90-го дня розвитку).
Передворсинковий період характеризується утворенням трофобласта в бластоцисті. Під час імплантації клітини трофобласта проліферують і утворюють цитотрофобласт. Після розчинення прозорої оболонки бластоцисти трофобласт диференціюється на два шари: цитотрофобласт (клітинна структура) і синцитіотрофобласт (неклітинна структура). Цитолітична активність трофобласта зростає по мірі його взаємодії з ендометрієм матки. В тканині ендометрію, яка розміщується навколо трофобласта, появляються порожнини (лакуни), заповнені материнською кров’ю. Лакуни розділені перегородками із клітин трофобласта (первинні ворсинки). Після появи лакун бластоциста дістала назву плодового пухирця. В процесі розвитку послідовно формуються первинні, вторинні та третинні ворсинки.
Ворсинки хоріона — деревоподібні розгалужені вирости трофобласта в місці його контакту з відпадною (децидуальною) оболонкою. Первинні ворсинки побудовані лише із трофобласта (цито- та синцитіотрофобласта), клітини мають неправильну форму і світлу цитоплазму.
Схема формування ворсинок хоріона
А – первинна ворсинка, Б – вториннна ворсинка, В третинна ворсинка хоріона.
Вторинні ворсинки починають формуватись з 12-ої-13-ої доби розвитку, коли у первинні ворсинки вростає позазародкова мезодерма. Вторинні ворсинки рівномірно розподілені по всій поверхні хоріона. Вторинні ворсинки мають найбільшу довжину в базальної частини децидуальної оболонки. Епітелій вторинних ворсинок представлений світлими клітинами округлої форми з великими ядрами. Над епітелієм розташований синцитій з нечіткими межами, темної зернистою цитоплазмою, щіткової облямівкою і поліморфними ядрами. На стадії вторинних ворсинок в клітинах трофобласта зменшується число мітозів, і починається їх васкуляризація.
З третього тижня розвитку появляються третинні ворсинки,в мезенхіму яких вростають судини алантоїса. Цей період називають плацентацією. Ворсинки, звернені до базальної частини децидуальної оболонки, кровоснабжаются не тільки з судин, що походять з хориальной мезодерми, але і з судин аллантоиса. Період з’єднання гілок пупкових судин з місцевою мережею кровообігу збігається з початком серцевих скорочень (21-й день розвитку), і в теоретичних ворсинках починається циркуляція ембріональної крові. Васкуляризація ворсинок хоріона закінчується, як правило, на 10-му тижні вагітності. До цього терміну формується плацентарний бар’єр. Не всі ворсинки хоріона розвинені однаково добре. Ворсинки, звернені до капсулярної частини відпадає оболонки, розвинені слабко і поступово зникають. Тому хоріон в цій частині називають гладким. Строма гладкого хоріона, зверненого до капсулярної частини децидуальної оболонки, бідна кровоносними судинами. Період з’єднання місцевої сітки кровообігу з гілками пупкових судин співпадає з початком серцевих скорочень плода і в третинних ворсинках починає циркулювати кров ембріона. Але не всі ворсинки хоріона розвинуті однаково. Ворсинки, які повернуті до сумочної частини відпадної оболонки, розвинуті погано і поступово щезають. У зв’язку із цим хоріон у цій частині стає гладким або лисим. Розгалужений хоріон формують дуже добре розвинуті ворсинки, які вростають у базальну частину основної децидуальної оболонки. Епітелій, що покриває ворсинки — одношаровий кубічний, — цитотрофобласт, останній вкритий симпластом, — синцитіотрофобластом. В ме-зенхімній стромі ворсин є колагенові та еластичні волокна, а серед клітин — клітини Кащенко-Гофбауера, які володіють фагоцитарною активністю, а також фібробласти.
За функцією ворсинки діляться на якірні або стовбурові і кінцеві або трофічні. Якірні ворсинки вростають у септи материнської частини плаценти і скріплюють обидві частини: дитячу і материнську. Кінцеві або трофічні вільно звисають у лакунах і омиваються материнською кров’ю, здійснюють трофічну функцію.
Ворсинки хоріона впродовж внутрішньоутробного розвитку піддаються постійній перебудові. Так, на другому місяці вагітності цитотрофобласт витончується і заміщується синцитіотрофобластом, а у другій половині вагітності він зникає з частини ворсинок і їхню поверхню вкриває фібриноїд Ланґганса.
Період котиледонів. Котиледон — структурно-функціональна одиниця плаценти. Останній відповідає території розгалуження однієї стовбурової ворсинки, яку омиває материнська кров. У плаценті нараховується близько 200 котиледонів.
Котиледон утворений стовбуровою ворсинкою і її розгалуженнями, що містять судини плода. До 140-го дня вагітності в плаценті сформовано 10-12 великих, 40-50 дрібних і до 150 рудиментарних котиледонів. До 4-го місяця вагітності формування основних структур плаценти закінчується (рис. 3-26). Лакуни повністю сформованої плаценти містять близько 150 мл материнської крові, повністю замещаемой 3-4 рази на хвилину. Загальна поверхня ворсинок сягає 14м 2, що забезпечує високий рівень обміну між вагітною і плодом.
Плацента. Зі збільшенням терміну вагітності ворсинки стають більш галузистими. У сформованій плаценті присутні скупчення ворсинок – котиледони. Частина ворсинок (що закріплюють, або якірні) більш тісно пов‘язана з материнською тканиною.
Децидуальна (відпадна) оболонка утворюється на всьому протязі ендометрію, але раніше вона розвивається в ділянці імплантації. До кінця другого тижня ендометрій повністю заміщується децидуальної оболонкою, в якій розрізняють базальну (decidua basalis), капсулярну (decidua capsularis) і пристінкову (decidua parietalis) частини. Децидуальна оболонка навколо хоріона утворює базальну і капсулярну частини. В інших ділянках порожнину матки вистеляє пристенкова децидуальна оболонка. У децидуальній оболонці виділяють губчасту (спонгіозну) і компактну зони. Більш пухка губчаста зона містить залишки залоз ендометрію.
Децидуальна оболонка матки і плацента. Порожнину матки вистилає пристінкова частина децидуальної оболонки. Капсулярна і базальна її частини покривають хоріон. Базальна частина децидуальної оболонки, звернена до ворсинчастого хоріона, входить до складу плаценти.
Базальна частина децидуальної оболонки входить до складу плаценти Вона відокремлює плодове яйце від міометрія. У губчастому шарі багато залоз, що зберігаються до 6-го місяця вагітності.
Капсулярна частина. До 18-го дня вагітності капсулярна частина повністю змикається над імплантованим плодовим яйцем і відокремлює його від порожнини матки. У міру розвитку плоду капсулярна частина випинається у порожнину матки та до 16-му тижні зростається з пристінковий частиною. При доношеній вагітності капсулярна частина добре помітна лише в нижньому полюсі плодового яйця (над внутрішнім зівом). Поверхневого епітелію в капсулярної частини немає.
Пристінкова частина. До 15-го тижня вагітності пристеночная частина децидуальної оболонки потовщується за рахунок компактної і губчастої зон. Пізніше в компактній зоні зникають великі децидуальної клітини. У губчастій зоні пристінкової частини децидуальної оболонки залози розвиваються до 8-го тижня вагітності. До моменту злиття пристінкової і капсулярної частин кількість залоз поступово зменшується, вони стають нерозпізнаваними. В кінці доношеної вагітності пристінкова частина децидуальної оболонки представлена декількома шарами децидуальних клітин. З 12-го тижня вагітності поверхневий епітелій пристінкової частини зникає.
Децидуальні клітини. Клітини пухкої сполучної тканини навколо судин компактної зони різко збільшені. Це молоді децидуальної клітини, подібні до фібробластів. У міру диференціювання розміри децидуальних клітин збільшуються, вони набувають округлу форму, їх ядра стають світлими, клітини тісніше прилягають одна до одної. На 4-6-му тижні вагітності переважають великі децидуальної клітини. Частина децидуальних клітин має походження з кісткового мозку мабуть, вони беруть участь в імунній відповіді. Децидуальної клітини продукують пролактин і простагландини.
Ворсинчастий хоріон. Третинні ворсинки добре розвинені на стороні, зверненій до міометрію, де утворюється ворсинчастий хоріон. У ворсинчастому хоріоні капіляри наближені до базальної мембрани трофобласта і утворюють поверхневу капілярну мережу. Серед клітинних елементів строми третинних ворсинок присутні макрофаги – клітини Хофбауера. Від вершини ворсинок в сторону децидуальної тканини відходять клітинні стовпчики (колони), що складаються з клітин цитотрофобласта, що контактують з поверхневою компактною зоною децидуальної оболонки. В області контакту формується зона коагуляційного некрозу (шар Нітабуха). Далі клітини цитотрофобласта проникають в губчасту зону ендометрію, міометрій і стінку судин матки. Вростання цитотрофобласта на 6-му тижні вагітності в стінку спіральних артерій призводить до проникнення в їх просвіт та встановлення циркуляції материнської крові між ворсинками хоріона. Ворсинки, тісно пов‘язані з материнською тканиною, називають якірними, або закріплюючими. Але більшість ворсинок в порожнинах базальної частини децидуальної оболонки лежить більш-менш вільно.
МОЛЕКУЛЯРНІ МЕХАНІЗМИ ІМПЛАНТАЦІЇ
І РОЗВИТКУ ПЛАЦЕНТИ
У передімплантаційний період клітини ендометрію експресують A-рецептори прогестерону та рецептори естрогену. Естроген, зв’язуючись зі своїми рецепторами, ініціює формування рецептивного поля для бластоцисти в ендометрії, а також стимулює утворення в ендометрії ряду ростових факторів, найбільш значущим з яких є лейкоз ингибирующий фактор (LIF, Leukemia Inhibitory Factor). LIF відіграє важливу роль у запуску і нормальному ході імплантації. LIF продукується клітинами епітелію та залоз ендометрію в середині секреторної фази менструального циклу, а під час імплантації – клітинами строми ендометрія.
Перший етап в ході імплантації – слабке і нестабільне зв’язування бластоцисти з епітелієм рецептивної ділянки премійованого гормонами ендометрію. При цьому бластоциста звільняється від прозорої оболонки, а клітини трофобласта починають експресувати L-селектин. Одночасно в епітеліальних клітинах ендометрію рецептивної ділянки активуються олігосахарідні ліганди, вони зв’язуються з L-селектином клітин трофобласта. Таке зв’язування відносно нестабільне. Потім слабке зв’язування стає міцним, що дозволяє трофобласту впроваджуватися в тканину ендометрію.
У міцному зв’язуванні з ендометрієм беруть участь інтегрини. Так, експресований трофобластом 3-інтегрин зв’язується з фібронектином і перлеканом (гепаран сульфат протеогліканів) позаклітинного матриксу ендометрію. Інтегрини експресуються також клітинами епітелію ендометрію в 19-24 добу менструального циклу, коли рецептивність ендометрію для бластоцисти оптимальна. У жінок з дефектами лютеїнової фази оваріально-менструального циклу відзначено відсутність 3 інтегринів в епітелії ендометрію, що веде до безпліддя.
LIF, фактор росту епідермісу, інтерлейкін-1, інсуліноподібний фактор росту, у присутності Hox A10 регулюють активність циклооксигенази та утворення простагландинів, необхідних для імплантації. Циклооксигеназа (COX) існує у двох ізоформах: конститувною (COX-1) і індуцибельної (COX-2). В ендометрії прогестерон і естроген пригнічують утворення COX-1 в середині лютеїнової фази оваріального циклу, тоді як освіта COX-2 зберігається. При дефектах COX-2 і відсутності простагландинів (особливо простацикліну) імплантації не відбувається. Простагландин I2, що продукується за участю COX-2, є лігандом для PPAR. Ядерний рецептор PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor) важливий для імплантації, диференціювання і функціонування трофобласта; дефекти PPAR ведуть до аномальному розвитку плаценти.
В ході імплантації продукція цитотрофобластом протеїназ (зокрема, металлопротеінази-9) і їх активність наростають; посилення утворення і активності металлопротеінази-9 сприяє ІЛ1, що продукується ендометрієм.
У ході формування ворсин плаценти клітини цитотрофобласта експресують фактор glial cells missing-1 (контролюючий перехід нейрон-глія у Drosophila).
У розвитку децидуальної реакції беруть участь інтерлейкін-11, інсуліноподібний фактор росту, Hox A10, фактор транскрипції forkhead.
У дифференціюванні цитотрофобласта та інвазії в ендометрій велику роль відіграє вміст кисню. Кисень контролює баланс між проліферацією цитотрофобласта і його диференціюванням. Ранні події розвитку плаценти відбуваються в умовах відносної гіпоксії (2-5% O2), що є сприятливою умовою для проліферації, але не диференціювання цитотрофобласта в ході імплантації; кількість клітин у складі цитотрофобласта швидко збільшується. Клітини цитотрофобласта впроваджуються глибше в стінку матки і перекривають просвіт материнських судин, підтримуючи тим самим стан фізіологічної гіпоксії. Таким чином, протягом першого триместру вагітності спостерігається переважне зростання цитотрофобласту у порівнянні з ростом плода, що зберігає порівняно невеликі розміри, тобто формування плаценти випереджає ріст плода. У другу половину вагітності, при наявності зрілої функціонуючої плаценти, відбувається швидке зростання плоду.
Реакції клітин на брак O2 контролюються індукованим гіпоксією фактором HIF (Hypoxia-Inducible Factor). Три білки сімейства HIF є факторами транскрипції bHLH, які містять Per / Arnt / Sim домен, сприяючий димеризації HIF з HIF. Гетеродимери активують транскрипцію ряду важливих генів, в промотор яких присутній HIF-чутливий елемент. У міру заглиблення в стінку матки і впростання в материнські судини клітини трофобласта отримують доступ до більшої кількості кисню, який опосередковує їх вихід з клітинного циклу і подальшу диференціацію.
До 10-12 тижнях вагітності починається потік крові в межворсінчатих просторах. У міру ендоваскулярної інвазії цитотрофобласта клітини мігрують уздовж спіральних артерій, заміщаючи ендотелій, а також проникаючи в їх м’язову оболонку. Просвіт артерій значно збільшується. Це підсилює кровопостачання, що необхідно для підтримки швидкого зростання плоду на більш пізніх термінах вагітності. Недостатність внутрішньосудинної інвазії трофобласта може призвести до аборту; нездатність до впровадження на необхідну глибину стримує зростання плоду.
Багато звичайних препаратів (наприклад, нікотин) негативно впливають на диференціювання трофобласта і взаємовідношення між матір’ю і плодом, в тому числі на плацентарний транспорт амінокислот і ріст плода. Субклінічні вірусні (наприклад, цитомегаловірус) або бактеріальні інфекції можуть інгібувати диференціювання цитотрофобласта і / або впровадження (інвазію) в ендометрій.
У разі трисомії 21 порушена здатність клітин цитотрофобласта зливатися і формувати синцитиотрофобласт. При цьому знижується інвазивна активність трофобласта і відзначено збільшення кількості його клітин, що вступають в апоптоз. Подібні дефекти можуть бути причиною аборту. В інших випадках, наприклад при плацентарном мозаїцизм, який виявлено у 2% вагітностей, що закінчилися живим плодом, відзначено часте обмеження росту плода
ПЛАЦЕНТА
Плацента — провізорний орган, за допомогою якого встановлюється зв’язок зародка з організмом матері. Плацента людини за способом трофіки відноситься до другого типу, а за морфологічними ознаками до дискоїдальних гемохоріальних. Плацента має дві складові частини — материнську та плодову.
Материнська частина плаценти утворена слизовою болонкою матки у ділянці вростання в неї ворсинок хоріона плода. Це, так звана, основна відпадна (децидуальна) оболонка. Децидуальна (відпадна) оболонка утворюється на всьому протязі ендометрію, але найшвидше розвивається в ділянці імплантації. На кінець другого тижня ендометрій цілком трансформується в децидуальну оболонку, в якій виділяють губчасту (спонгіозну) і компактну зони. У складі децидуальної оболонки виділяють ще пристінкову відпадну оболонку, вільну від хоріальних ворсинок, а також сумкову відпадну оболонку, що відмежовує зародок від порожнини матки.
1 – пуповина (плодова поверхня), 2 – хоріальна пластинка, 3 – ворсинки хоріона, 4 – котиледони (маткринська поверхня), 5 – амніон, 6 – судини в хоріальній пластинці.
Материнська частина плаценти сформована основною відпадною оболонкою, в якій розрізняють базальну пластинку і сполучнотканинні септи , які з’єднують її з дитячою частиною, а також лакуни, що заповнені материнською кров’ю. В базальній пластинці ендометрію є значна кількість децидуальних клітин. Останні є великими клітинами, які мають значні включення глікогену. На поверхні базальної пластинки та стінках лакун локалізується аморфна субстанція (фібриноїд Рора), яка відіграє суттєву роль у забезпеченні імунологічного гомеостазу в системі матиплід. Ворсинки хоріона вкриті фібриноїдом Ланґганса. Частина основної відпадної оболонки, яка розміщена між розгалуженим і гладким хоріоном по краю плацентарного диска, щільно зростається з хоріоном і формує замикальну пластинку, що не допускає витікання крові з лакун в порожнину матки.
Плодова частина плаценти утворена ворсинчастим хоріоном. В ньому виділяють: хоріальну пластинку і хоріальні ворсинки. В хоріальній пластинці розрізняють одношаровий епітелій та позазародкову сполучну тканину.
Процес формування плаценти людини протікає найбільш інтенсивно з 3-го до 6-го тижня ембріогенезу і завершується на 3-му місяці пренатального періоду. Цей період має назву плацентації та є другим критичним періодом у житті зародка.
Гемохоріальний (плацентарний) бар’єр, відмежовує кров матері від крові плода. В склад плацентарного бар’єру входять:
1) ендотелій і базальна мембрана капіляра плода;
2) сполучна тканина хоріальної ворсинки, що оточує капіляри;
3) базальна мембрана цитотрофобласта + синцитіотрофобласт;
4) фібриноїд Ланґганса.
Гемоплацентарний бар’єр забезпечує захист організму зародка від багатьох шкідливих чинників, що можуть потрапити з крові матері до плода (бактерій, високомолекулярних сполук, навіть збудник імунодефіциту людини лише в 25% випадків потряпляє до плода від інфікованої матері). Однак, необхідно пам’ятати, що плацентарний бар’єр проникливий для численних вірусів (грипу, та TORCH-інфекцій), а також для алкоголю, нікотину, наркотиків та багатьох ліків, тому вживання вагітним жінкам вище вказаних речовин потрібно виключити.
Таким чином плацента забезпечує обмін між матір’ю і плодом газами, метаболітами, електролітами реалізує пасивний транспорт, полегшену дифузію і активний транспорт. Через плаценту в організм плоду вільно проходять стероїдні гормони.
Транспорт материнських АТ здійснюється за допомогою опосередкованого рецепторами ендоцитозу і забезпечує пасивний імунітет плоду.
Ендокринна функція. Плацента – ендокринний орган. Плацента синтезує ряд гормонів та інших біологічно активних речовин, що мають важливе значення для нормального перебігу вагітності та розвитку плода (ХГТ прогестерон, хоріонічний соматомаммотропін, фактор росту фібробластів, трансферин, пролактин і релаксин). Кортіколіберін, ймовірно, визначає термін настання пологів.
Плацентарний годинник. При вивченні вмісту в крові 485 вагітних плацентарного кортіколіберіна встановлено, що вже на терміні 18 тижнів вагітності можна виділити групи з нормальними, передчасними і пізніми пологами. До очікуваного для цих груп терміну пологів вміст у крові кортіколіберіна різко зростає.
Детоксикація деяких лікарських препаратів.
Пригнічення клітинного імунітету. Згідно з однією з гіпотез, хоріон виробляє речовини, які пригнічують клітинну імунну відповідь. На користь цього припущення свідчать дані про те, що ферменти мембран, а також екстракт з синцитіотрофобласту гальмують in vitro розмноження клітин імунної системи матері.
Плацентарний бар’єр і HLA. Інший механізм захисту плоду від атакуючого впливу лімфоцитів матері пов’язують з відсутністю Аг HLA втрофобласті людини, що пригнічує розвиток цитотоксичної імунної відповіді з боку матері. Відсутність Аг HLA втрофобласті забезпечує захист фетоплацентарного комплексу від розпізнавання імунокомпетентними клітинами матері. Інші типи клітин у ворсинках плаценти людини несуть Аг HLA. Трофобласт людини, поряд з відсутністю Аг HLA, не містить також еритроцитарних Аг систем AB0 і Rh.
Таким чином ПЛАЦЕНТа виконує наступні функції:
1) трофічну;
2) екскреторну;
3) захисну;
4) орган імунологічного захисту;
5) дихальну;
6) ендокринну (виробляється хоріальний гонадотропін, прогестерон, соматотропін та ін.).
Пуповина — утворена сполучною тканиною, в середині якої проходять магістральні судини (дві артерії і одна вена), що забезпечують кровообіг між організмом плода і плацентою. В пуповині є залишки жовткового стебельця (стінка якого утворена плоским епітелієм та сполучною тканиною), а також алантоїса (має епітелій кубічний). Основну масу пуповини складає слизова сполучна тканина — вартонові драглі, в якій є значна кількість гіалуронової кислоти та численні базофіли і клітини Кащенко-Хофбауера) Слизова тканина зумовлює пружність пупкового канатика і неспадання судин пуповини, що забезпечує безперервний зв’язок між організмом матері і плода. Пуповина зверху вкрита одношаровим кубічним амніотичним епітелієм.
КРИТИЧНІ ПЕРІОДИ РОЗВИТКУ
В онтогенезі людини можна виділити низку критичних періодів розвитку, тобто періоди підвищеної чутливості організму до дії пошкоджуючих чинників внутрішнього і зовнішнього середовища.
Вперше австралійський вчений Норман Грегг сказав про це в 1944 році. Пізніше, в 1960 році, російський морфолоа Свєтлов П. обгрунтував теорію критичних періодів ембріогенезу. Він вважав, що в ході онтогенезу є деякі періоди важливих кількісних змін. Деякі негативні впливи ззовні можуть призвести до пошкодження людського організму в той момент і навіть переривати вагітність або призвести до смерті.
Такі періодами є:
1. Прогенез або гаметогенез, який характеризується специфічними змінами кількості хромосом у мейозі.
2. Запліднення – злиття гамет і відновлення диплоїдної кількості хромосом.
3. Імплантація – вростання ембріона в ендометрій (7-8 день).
4. Плацентація (3-8 тижні).
4. Гаструляція, нейруляція і утворення комплексу осьових зачатків (З-8 тиждень).
5. Посилений ріст головного мозку (15-20 тижні).
6. Органо-і системогенез (формування життєво важливі системи 20 по 24 тиждень).
7. Народження.
8. Період новонародженості і перший рік життя.
9. Статеве дозрівння (11-16 років).
10. Менопауза.
ЕКСТРАКОРПОРАЛЬНЕ ЗАПЛІДНЕННЯ
В медичній практиці багатьох країн світу для лікування чоловічої та жіночої неплідності широко застосовують так зване штучне (екстракорпоральне) запліднення. Суть методу полягає в тому, що отримані і відповідним чином підготовлені яйцеклітини та сперматозоїди інкубуються у спеціальних живильних середовищах, де відбувається їх злиття і утворення зиготи. Дроблення контролюється мікроскопічно. Концептус, який розвивається нормально, вводять у матку, де здійснюється його подальший розвиток. Операція успішна в 20-40 % випадків. При проведенні екстракорпорального запліднення можливим є вибір статі майбутньої дитини.
БАГАТОПЛІДНА ВАГІТНІСТЬ
В утробі жінки, як правило, розвивається один плід, однак приблизно в 1 % випадків розвивається і народжується одночасно декілька плодів. У 1997 році американка народила одночасно сім плодів, однак багатоплідні вагітності з трьома і більше плодами є надзвичайно рідкісним явищем.
Є два основних різновиди багатоплідної вагітності: однояйцева і дво- (або багато) яйцева. Однояйцеві близнюки розвиваються з однієї заплідненої яйцеклітини. Виникнення однояй-цевих близнюків відбувається, найбільш вірогідно, на стадії двох бластомерів, де кожен із них є тотипотентним. Деякі ембріологи вважають, що однояйцева двійня може виникнути на етапі зародкового щитка, шляхом поділу на дві симетричні половини (рання гаструляція).
Однояйцеві близнюки завжди однієї статі, мають спільну плаценту, спільні або окремі амніотичні оболонки, вони надзвичайно близькі за фізичними даними, але в психічному відношенні один із них більше розвинутий.
Двояйцеві (або багатояйцеві) близнюки виникають при одночасному заплідненні двох або більше яйцеклітин. Обидва зародки імплантуються в окремі ділянки ендометрію, мають власну плаценту, амніон і розвиваються самостійно. Вони подібні між собою як брати і сестри, можуть бути одно- або різностатевими.
Організація провізорних органів у близнюків має ряд особливостей. Якщо близнюки різнояйцеві (дизиготні, 70% всіх близнюків), то в цьому випадку кожен зародок має власні амніон, хоріон і плаценту; плаценти іноді зливаються. Oднояйцеві (монозиготні) близнюки зазвичай мають власні амніон і загальні хоріон і плаценту. B випадку нерозділених або не повністю розділених близнюків присутній один амніон, один хоріон і одна плацента.
Розвиток різнояйцевих близнюків.
Розвиток однояйцевих близнят.
Методика виконання практичної роботи.
Завдання І. Вивчити і замалювати такі мікропрепарати:
1. ЗАРОДОК НА СТАДІЇ ПЕРВИННОЇ СМУЖКИ ( а -тотальний препарат, б – переріз)
Забарвлення залізним гематоксиліном.
За малого збільшення бачимо первинну смужку, утворену ущільненим тяжем клітин. Латеральніше первинної смужки видно три зародкові листки, які лежать окремо: первинні ектодерма, ентодерма і розташована між ними мезодерма, що утворилася в результаті міграції клітин первинної смужки. Замалювати і позначити: 1. Первинна смужка. 2. Епібласт – первинна ектодерма. 3. Гіпобласт – первинна ентодерма. 4. Мезодерма.
P На якій стадії розвитку зародка утворюється первинна смужка?
P Який зародковий листок утворюється із первинної смужки?
2. ЗАРОДОК НА СТАДІЇ ЗАКЛАДКИ ОСЬОВИХ ОРГАНІВ (хорда, нервова трубка, соміти).
Забарвлення залізним гематоксиліном.
Мікропрепарат поставити так, щоб нервова трубка була розміщена зверху. За малого збільшення можна відрізнити багатошарову ектодерму, яка покриває зародок і під нею нервову трубку. З боків видно ділянки мезодерми – соміти, нижче нервової трубки – хорда, ще нижче – шар ентодерми. Від сомітів відходять листки спланхнотома, які пов’язані з ним сегментними ніжками. Замалювати і позначити: 1. Ектодерма. 2. Нервова трубка. 3. Хорда. 4. Соміти (дорзальна мезодерма). 5. Сегментні ніжки. 6. Пристінковий (парієтальний) листок спланхнотома. 7. Нутрощовий (вісцеральний) листок спланхнотома. 8. Целомічна (вторинна) порожнина тіла. 9. Ентодерма. 10. Мезенхіма.
P На якій стадії розвитку зародка утворюється хорда, нервова трубка, соміти?
P Якими структурами на препараті представлена мезодерма?
P Як диференціюються соміти?
3.ПУПОВИНА.
Забарвлення гематоксиліном-еозином.
На препараті видно поперечний переріз пуповини, яка покрита зверху амніотичним епітелієм. Позазародкова сполучна тканина складає строму пуповини, в якій розташовані дві артерії, що несуть кров від тіла зародка і одна вена, по якій тече кров до тіла зародка. Дуже часто в складі пуповини знаходиться залишок жовткового мішка у вигляді вузької щілини, утвореної плоским епітелієм і залишок алантоіса також у вигляді невеликої порожнини, яка з середини покрита кубічним епітелієм. Замалювати мікропрепарат і позначити: 1. Амніотичний епітелій. 2. Сполучна тканина. 3.
Вена. 4. Артерії. 5. Залишок жовткового мішка. 6. Залишок алантоіса.
.
P Чому судини пуповини не спадаються?
P Які судини проходять в пуповині?
4. АМНІОН (тотальний препарат).
Забарвлення гематоксиліном-еозином.
За великого збільшення мікроскопа видно границі епітеліоцитів, які мають полігональну форму і щільно контактують між собою. Замалювати і позначити: 1.Епітеліоцити амніотичної оболонки.
P Якими тканинами утворений амніон?
P Чи є в амніоні судини?
5. ВОРСИНКИ ХОРІОНА (тотальний препарат).
Забарвлення карміном.
За малого збільшення мікроскопа знайти ворсинку хоріона, яка розгалужується. Звернути увагу, що від більшої за розмірами ворсинки відходять дрібні розгалуження, границі їх утворюють зафарбовані в червоний колір клітини трофобласта. Замалювати і позначити: 1. Розгалужена ворсинка хоріона.
P Яка тканина утворює основу ворсинки?
P Які два шари покривають ворсинку?
6. ПЛІДНА ЧАСТИНА ПЛАЦЕНТИ ЛЮДИНИ.
Забарвлення гематоксиліном-еозином.
Будова плаценти вивчається на двох гістологічних препаратах: плідній і материнській частинах. Плідна частина плаценти покрита зовні амніотичною оболонкою з амніотичним епітелієм. Під амніоном розташовується хоріальна пластинка, яка містить великі судини і утворює ворсинки. Строму ворсинок хоріона складає позазародкова мезодерма з судинами. Зовні ці структури покриті цито- і симпластотрофобластом і розташовані в лакунах, заповнених материнською кров’ю. Замалювати і позначити: 1. Амніотична оболонка. 2. Хоріальна пластинка з розгалуженими судинами пуповини. 3. Ворсинка хоріона: а) цитотрофобласт, б) симпластотрофобласт, в) строма ворсинки, г) судини.
P Якими зародковими оболонками утворена плідна частина плаценти?
P Як побудована третинна ворсинка
P Який тип плаценти людини?
7. МАТЕРИНСЬКА ЧАСТИНА ПЛАЦЕНТИ ЛЮДИНИ.
Забарвлення гематоксиліном-еозином.
Материнська частина плаценти складається з базальної пластинки (відпадної слизової оболонки матки) з децидуальними клітинами, сполучнотканинних перегородок, розташованих між гру-пами ворсинок і лакун, заповнених материнською кров’ю. Замалювати і позначити: 1. Базальна відпадаюча пластинка слизової оболонки. 2. Децидуальні клітини. 3. Сполучнотканинні перегородки. 4. Лакуни заповнені материнською кров’ю. 5. Ворсинки.
P Якими структурами представлена метаринська частина плаценти?
P Чому кров плода і матері не змішуються?
P Якими структурами утворений плацентарний бар’єр?
Джерела інформації:
а) Основні
1. Матеріали для підготовки до практичного заняття з теми “Гаструляція, гісто- і органогенез людини. Позазародкові органи. Критичні періоди розвитку.” з tdmu.edu.ua.
2. Матеріали для підготовки до лекції “Загальна та порівняльна ембріологія” з tdmu.edu.ua.
3. Презентація лекції “Загальна та порівняльна ембріологія” з tdmu.edu.ua.
4. Гістологія людини / [Луцик О. Д., Іванова А. Й., Кабак К. С., Чайковський Ю. Б.]. – Київ : Книга плюс, 2010. – С. 84–106.
5. Гістологія людини / [Луцик О. Д., Іванова А. Й., Кабак К. С., Чайковський Ю. Б.]. – Київ : Книга плюс, 2003. – С. 86-110.
6. Волков К.С. Ультраструктура клітин і тканин : навчальний посібник-атлас / К. С. Волков, Н. В. Пасєчко. – Тернопіль : Укрмедкнига, 1997. – С. 15.
б) додаткові
1. Гистология, цитология и эмбриология / [Афанасьев Ю. И., Юрина Н. А., Котовский Е. Ф. и др.] ; под ред. Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юриной. – [5-е изд., перераб. и доп.]. – М. : Медицина. – 2001. – С. 107–137.
2. Гистология : [учебник] / под ред. Э. Г. Улумбекова, Ю. А. Челышева. –[2-е изд., перераб. и доп.]. – М. : ГЕОТАР–МЕД, 2001. – С. 108–113.
3. Данилов Р. К. Гистология. Эмбриология. Цитология. : [учебник для студентов медицинских вузов] / Р. К. Данилов – М. : ООО «Медицинское информационное агенство», 2006. – С. 83–98.
4. Гістологія людини / [Луцик О. Д., Іванова А. Й., Кабак К. С.]. – Львів : Мир, 1993. – С. 373-383.
5. Кузнецов С. Л. Атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии / Кузнецов С. Л., Н. Н. Мушкамбаров, В. Л. Горячкина. – М. : Медицинское информационное агенство, 2002. – С. 8–10.
Автор доц. О.П. Андріїшин
