Методична вказівка для студентів ІІ курсу
медичного факультету
ЗАНЯТТЯ № 3 (практичне 6 год)
Теми:1. Живильні середовища для культивування мікроорганізмів. Типи дихання бактерій.
2.Типи і механізми живлення бактерій. Ріст і розмноження мікроорганізмів.
3. Методи стерилізації і дезінфекції. Основні методи і принципи виділення чистих культур. Виділення чистих культур аеробних бактерій
МЕТА: Навчитись вирощувати бактерiї на поживних середовищах, методам стерилiзацiї, дезинфекцiї та пiдготовки матерiалу до стерилiзацiї.
Ознайомитися зi способами та механiзмом розмноження бактерiй. Оволодiти технiкою посiву бактерiй на рiдки i твердi живильні середовища.
Ознайомитися з типами дихання та культуральними властивостями бактерiй. Оволодiти технiкою створення анаеробних умов. Оволодiти бактерiологiчним методом дiагностики iнфекцiйних захворювань, методами бiохiмiчної та серологiчної iдентифiкацiї бактерiй.
Професійна орієнтація студентів: Бактеріологічний метод є найважливішим у практичній діяльності будь-якої мікробіологічної лабораторії. Для цього широко використовуються живильні середовища, на яких вирощують досліджувані мікроорганізми.
Головний метод у боротьбі з інфекційними хворобами – профілактичний. У зв¢язку з цим в діяльності медичних закладів велике значення має попередження проникнення збудників захворювань в організм людини або інші об¢єкти. Це проводиться методами мікробної деконтамінації. Основні з них – стерилізація, дезинфекція, антисептика і асептика.
Методика виконання практичної роботи: 9.00-12.00
Тема І. Робота 1. Вивчити ознаки росту мiкроорганiзмiв на поживних середовищах.
Робота 2. Засiяти дослiджуваний матерiал на щiльнi живильні середовища (МПА) методом “штрихiв”.
Робота 3. Розглянути i замалювати три чашки Петрi з ростом сумiшi бактерiй (метод Дригальського).
Робота 4. Макро- i мiкроскопiчне вивчення колонiй, якi виросли на МПА. Описати i замалювати в протоколi.
Робота 5. Ознайомитись з характером росту кишкової палички i сальмонел на середовищах Ендо, Левiна, Плоскирева, змiнами на середовищах Гiса i МПБ.
Тема ІІ. Робота 1. Ознайомитись з набором основних компонентiв для приготування простих поживних середовищ (м’ясна вода, пептон, хлорид натрiю, агар-агар).
Робота 2. Ознайомитись з готовими поживними середовищами (МПБ, МПА, кров’яний агар, згорнута сироватка, Ендо, Левiна, Плоскирєва, Гiса).
Робота 3. Ознайомитися з методами створення анаеробних умов за допомогою анаеростата; трубок Вiньяль-Вейона, біологічним методом Фортнера.
Робота 4. Посіяти грунт на молоко і середовище Кітта – Тароцці .
Тема ІІІ. Робота 1. Ознайомитись з будовою автоклаву, сухожарової печi Пастера, термостата, згортувача, стерилiзатора, фiльтра Зейтца, свiчками Шамберлана, Беркефельда.
Робота 2. Ознайомитись з контролями стерилiзацiї.
Робота 3. Пiдготувати до стерилiзацiї лабораторний посуд.
Перерва 12.00-12.30
Програма самопідготовки студентів до заняття:
Тема 1: 1. Типи живлення бактерiй.
2. Охарактеризувати механiзми живлення.
3. Ферменти бактерiй, їх особливостi:
4. Ріст i розмноження мікрооорганізмів.
5. Охарактеризувати основнi фази росту мiкробної популяцiї на рiдких поживних середовищах. Практичне значення.
Тема 2: 1.Класифікація живильних середовищ для культивування мікроорганізмів та їх характеристика.
2. Типи i механiзм дихання бактерiй. Основнi методи створення анаеробних умов для культивування бактерiй: бiологiчнi, механiчнi, хiмiчнi та iншi.
Тема 3: 1. Методи знезаражування бiологiчних об’єктiв. Стерилiзацiя, пастеризацiя, дезинфекцiя, асептика, антисептика.
1. Методи стерилiзацiї. Стерилiзацiя парою пiд тиском, текучою парою, сухим жаром, iонiзуюче та ультрафiолетове опромiнення, холодна стерилiзацiя.
2. Контролi стерилiзацiї.
3. Назвати методи i принципи видiлення чистих культур.
4. Методи виділення чистих культур, засновані на механічному принципі: метод послідовних розведень, метод коха, Дригальського, штрихових посівів.
5. Методи виділення чистих культур, засновані на біологічному принципі: за типом дихання, за спороутворенням, рухомістю, стійкістю до дії кислот і лугів, чутливістю до хіміопрепаратів та ін.
6. Етапи видiлення чистих культур аеробних мiкроорганiзмiв.
Семінарське обговорення теоретичних питань: 12.30-14.00
Перерва: 14.00-14.15
Самостійна робота студентів: 14.15-15.00
Розв’язування ситуаційних задач з кожної теми, розбір завдань тестових ліцензійних іспитів «Крок», оцінювання студентів, які не склали напередодні тестовий контроль за системою «Moodle», відпрацювання та прийом практичних навичок (матрикули).
Зразки тестових завдань та ситуаційних задач
1. Типи обміну речовин у бактерій:
А- біосинтез
B– конструктивний (анаболізм)
C– енергетичний (катаболізм)
D– всі відповіді вірні
2. За характером засвоєння вуглецю є такі групи бактерій:
А- автотрофи і гетеротрофи
B– фототрофи і хемотрофи
C– літотрофи і органотрофи
D– всі відповіді невірні
3.До фізичних факторів впливу на мікроорганізми відносять:
А – температуру
B – висушування
C – високий тиск
D – всі вищеназвані
4. Для термофілів температурний оптимум становить:
А – 10-20˚С
B – 20-30˚С
C – 50-60˚С
D – 70-80˚С
5. Що таке чиста культура бактерій?
А – популяція мікробів одного виду, що виросли на живильному середовищі
B – сукупність кількох видів у середовищі
C – культура, яка виросла з 1-ї клітини
D – всі відповіді вірні
6. Колонія бактерій –:
А – завись мікробів у бульйоні
B – завись мікробів у ізотонічному розчині
C – видиме неозброєним оком скупчення мікробів на щільному середовищі
D – всі відповіді вірні
Вихідний рівень знань та вмінь
Студент повинен знати:
1. Типи і механізм живлення та дихання бактерій
2. Основні живильні середовища, для культивування мікроорганізмів
3. Механізми розмноження та культуральні властивості бактерій
4. Методи створення анаеробних умов.
5. Методи кількісного визначення бактерій у досліджуваному матеріалі.
6. Методи та контролі стерилізації і дезинфекції.
9. Студент повинен вміти:
1. Підготовити матеріал і аптечний посуд до стерилізації.
2. Провести контроль стерилізації.
3. Виготовити мазок із суміші бактерій, різних типів колоній, фарбувати за методом Грама
4. Провести посів досліджуваного матеріалу на щільні живильні середовища, скошений агар методом штрихів.
Вірні відповіді на тести та ситуаційні задачі:
1. D, 2. A, 3. D, 4. C, 5. А, 6. C.
Джерела інформації:
А. Основні:
1. Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С.Широбоков В.П. «Практична мікробіологія», Тернопіль.: «Укрмедкнига», 2004, С. 45-77;
2. І. О. Ситник, С. І. Климнюк, М. С. Творко Мікробіологія, вірусологія, імунологія. Тернопіль, “Укрмедкнига”, 1998. – С. 63-107.
3. Руководство к практическим заняттям по медицинской микробиологии и лабораторной диагностике инфекционных болезней /Под ред. Проф. Кривошеина Ю.С. – К.: Вища школа, 1986. – С. 25-31.
4. Медична мікробіологія вірусологія імунологія за ред.. акад. НАНУ В.П.Широбокова. – Вінниця. – «Нова книга». – 2011.
Б. Додаткові:
1.Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С.. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии. /Под ред. Борисова Л.И. – М.: Медицина, 1993.
2.Джавец Э., Мельник Дж. Л., Эйдельберг Э.А. Руководство по медицинской микробиологии. 1-ый т. Пер. с англ. – М.: Медицина, 1982.
Методичну вказівку склали: доц. Ткачук Н.І., доц. Романюк Л.Б.
Переглянуто і затверджено на засіданні кафедри
28. 08. 2012 р. № 1
Переглянуто і затверджено на засіданні кафедри
24.09.2013 р. Протокол №3
