ЗАНЯТИЕ № 3

ЗАНЯТИЕ № 3

Тема: Общие принципы контроля качества гомеопатических препаратов. Контроль матричных гомеопатических препаратов. Контроль гомеопатических разведений основных лекарственных форм согласно фармакопеи. Техника безопасности при приготовлении гомеопатических препаратов.

МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ОСНОВНЫХ (БАЗИСНЫХ) Гомеопатические препараты

Контроль качества основных гомеопатических препаратов можно подразделить на два этапа:

а) контроль физико-химических свойств и технологических параметров;

б) аналитический контроль по действующим веществам.

Жидкие базисные препараты (эссенции, настойки, растворы) контролируют в соответствии с требованиями руководства В. Швабе и ДФ по следующим показателям:

Ø   соответствие запаха и вкуса;

Ø   прозрачность (отсутствие механических включений);

Ø   соответствие цвета, потому что ряд препаратов, особенно приготовленных из свежих растений, при длительном хранении меняют свою окраску (например, часто наблюдается изменение зеленой окраски в коричневую, вызванное в большинстве случаев изменением хлорофилла). Кроме того, может также изменяться интенсивность окраски в различных пробах того же препарата, несмотря на равный содержание лекарственного вещества, что особенно заметно в высоких разведениях. Этот факт необходимо учитывать при оценке приведенных данных об окраске различных веществ.

Ø   Цвет определяют визуально при дневном отраженном свете на матово-белом фоне (белый картон или бумага для письма) в пробирках одинакового стекла диаметром 10 мм.

Ø   капиллярное и капиллярно-люминесцентный анализ:

а) капиллярный анализ эссенций, настоек и жидких разведений проводят по методу Плана: с фильтрувальногои или хроматографической бумаги одного сорта в направлении, перпендикулярном текстуре бумаги, нарезают полоски шириной 2 см и длиной примерно 25 см и подвешивают в цилиндрической стеклянной посуде высотой около 5 см и диаметром около 3 см так, чтобы концы бумажных полосок доставали дна сосуда. В сосуд, если не оговорены другие условия проведения анализа, помещают 5 мл исследуемого раствора. Сосуд ставят в теплое помещение и через 24 ч или до момента, когда вся жидкость будет поглощена, вынимают полоски, просушивают и исследуют при дневном свете или в ультрафиолетовом, излучаемого кварцевой аналитической лампой. При исследовании более высоких разведений вместо широких капиллярных полосок используются полоски шириной не более 2,5 мм.

При описании капиллярной картины пользуются делением на две части.

Верхняя часть состоит из водной зоны часто – зоны в виде выпуклости или эллиптической выемки.

Нижняя часть основном состоит из нескольких зон, окрашенных в разные цвета, и основания.

Контролем служат данные капиллярного анализа эссенций или настоек, приведены для каждого объекта в руководстве В. Швабе;

б) капиллярно-люминесцентный анализ, разработанный Нейгебауэр и Платц, принятый в международной гомеопатической фармакопеи, уточнен и приспособлен для условий аптеки или лаборатории как метод, дающий ясную картину специфичности средства и правильности приготовления лекарств.

При наблюдении люминесценции жидкости, исследуемой методом капиллярного анализа, целесообразным также оказался разделение на две части.

Верхняя часть состоит из узкой самой верхней зоны, затем собственно верхней части и основания верхней части, четко наблюдаемого при люминесценции целого ряда препаратов.

Нижняя часть состоит из выпуклой зоны, или полосы, состоящей из нескольких зон, и основания; полоса может занимать всю нижнюю часть или только выпуклую зону.

Данные капиллярного анализа наблюдают при свете аналитической УФ-лампы обычно после просушки, так как при этом наиболее полно проявляется характерная люминесценция. При наблюдении капиллярных картин в ультрафиолетовом свете, для того чтобы избежать ошибок, необходимо обращать внимание на следующее: как при дневном свете, так и при освещении лампой наблюдения нужно всегда проводить на одинаковом фоне, лучше белом, по возможности не люминесцентном. Кроме того, надо знать, что и от фильтровальной бумаги появляется, как правило, бледно-голубая или сине-фиолетовая люминесценция, а также, что различные вещества, например молочный или тростниковый сахар, имеют часто собственную люминесценцию голубого цвета, также может проявляться при исследовании спиртового экстракта и затруднять определение вещества. Этиловый спирт также слегка голубую люминесценцию. Нужно следить за тем, чтобы в холостых проб с очищенной водой на верхнем конце капиллярных картин всегда появлялась узкая зона, окрашенная в коричневатые цвета. В ультрафиолетовом излучении она светится ярко-синим светом. С целью более точного исследования препарат нужно обработать соответствующими реактивами, после чего можно наблюдать характерные изменения окраски при дневном, а особенно ультрафиолетовом свете. Рекомендуется обильно наносить раствор на все зоны стеклянной палочкой или капельной пипеткой и проводить высушивание при слегка повышенной температуре. В сомнительных случаях рекомендуется проводить холостую пробу на той же полоске бумаги, но выше капиллярной картины.

 

Если применение реактивов недостаточно для доказательства идентичности, то можно использовать следующий метод (вторая капилляризация): исследуемый фильтровальную бумагу с капиллярной картиной помещают в пробирку, затем наливают (до верхней границы капиллярной картины) соответствующий растворитель, чаще хлороформ (чтобы воспрепятствовать тому, чтобы верхняя часть картины случайно не была бы барьером для растворителя и веществ, которые растворяются в нем). Растворитель растворяет все, содержащиеся в окрашенной области фильтровальной бумаги растворимые вещества и вместе с ними поднимается по бумаге. Затем эти вещества испаряются и откладывают в новой зоне, на верхнем крае пробирки.

Если эта «новая зона» получается слишком слабой, то опыт можно повторить с дополнительной порцией растворителя и, следовательно, повысить интенсивность этой зоны. Если эта зона слишком темная, то можно снова нанести растворитель, расширив тем самым зону и таким образом просвитлившы ее.

Новая более-менее широкая зона имеет часто характерные цвета и при дневном свете, и при ультрафиолетовом освещении. В случае необходимости ее исследования, как и капиллярной картины, можно продолжать различными методами. Растворы проверяют на люминесценцию непосредственно: для этого 1-2 мл помещают в пробирку диаметром около 1,5 см и наблюдают в ультрафиолетовом свете. К раствору добавляют несколько капель соляной кислоты, чтобы исключить, особенно при высоких разведениях, препятствия, которые могут вызываться имеющимся щелочью;

определения плотности жидкостей – проводят с помощью пикнометра или ареометра.

Метод 1. Применяют в случае определения плотности жидкостей с точностью до 0,001. Чистый сухой пикнометр взвешивают с точностью до 0,0002 г, заполняют с помощью маленькой воронки очищенной водой немного выше метки, закрывают пробкой и выдерживают в течение 20 мин в термостате, в котором поддерживают постоянную температуру воды 20 ° С с точностью до 0,1 ° С . При этой температуре уровень воды в пикнометра доводят до метки, быстро отбирая излишек воды при помощи пипетки или свернутой в трубку полоски фильтровальной бумаги. Пикнометр снова закрывают пробкой и выдерживают в термостате еще ​​10 мин, проверяя положение мениска относительно метки. Затем пикнометр вынимают из термостата, фильтровальной бумагой вытирают внутреннюю поверхность горлышка пикнометра, оставляют под стеклом аналитических весов в течение 10 мин и взвешивают с той же точностью.

Пикнометр освобождают от воды, высушивают, споласкивая последовательно спиртом и эфиром (сушить пикнометр путем нагревания не допускается), удаляют остатки эфира продуванием воздуха, заполняют пикнометр испытанной жидкостью и затем делают те же операции, что и с очищенной водой.

Плотность ρ ₂₀ (г / см ³⁾ вычисляют по формуле:

где:          m     – Масса пустого пикнометра, г;

m ₁    – Масса пикнометра с очищенной водой, м;

m ₂    – Масса пикнометра с испытанной жидкостью, м;

0,99703 – значение плотности воды при 20 ° С (в г / см ³ с учетом плотности воздуха);

0,0012 – значение плотности воздуха при 20 ° С и барометрическом давлении 1011 гПа (760 мм рт. Ст.).

Метод 2. Применяют в случае определения плотности жидкостей с точностью до 0,01. Испытанную жидкость помещают в цилиндр при температуре жидкости 20 ° С осторожно опускают в нее чистый сухой ареометр, на шкале которого предусмотрена ожидаемая величина плотности. Ареометр не выпускают из рук до тех пор, пока не станет очевидным, что он плавает, при этом необходимо следить, чтобы ареометр не касался стенок и дна цилиндра. Отсчет производят через 3-4 мин после погружения по делениях на шкале ареометра, что соответствует нижнему мениске жидкости (при подсчете глаза должны быть на уровне мениска). В случае определения окрашенных жидкостей отсчет производят по верхнему мениску.

При точном соблюдении правил приготовления эссенции по описаниям отдельных параграфов плотность основных настоек в среднем равна: по § 1 – 0,944; по § 2 – 0,944; по § 3 – 0,905;

Ø   определения содержания экстрактивных веществ (сухого остатка): выпаривают на водяной бане точно измеренную и точно взвешенную (с учетом плотности) количество жидкости, помещают в предварительно взвешенную фарфоровую чашку диаметром б-7 см. Затем сушат в течение 30 мин в термостате при 105 ° С.

Взвешивать нужно по возможности быстро, потому что некоторые экстракты очень сильно поглощают влагу и поэтому масса их увеличивается на весах в течение нескольких минут. Также не следует сушить дольше получаса, так как при длительном сушке при 105 ° С масса жиросодержащих сухих остатков снова возрастает.

Содержание экстрактивных веществ X (%) рассчитывают по формуле

где:          m – масса навески препарата до высушивания, г;

              m ₁ – масса сухого остатка после высушивания, г;

Ø   определения содержания жирных растительных   масел: остаток, получаемый при определении содержания экстрактивных веществ, смачивают 1-2 мл воды (иногда с подогревом на водяной бане), а затем растирают до получения однородного порошка с 10,0 г прокаленного гипса. Массу помещают в гильзу из фильтровальной бумаги и накрывают ватным тампоном. Гильзу помещают в аппарат Сокслета и экстрагируют в течение 2-3 г слегка кипящим петролейным эфиром. Затем эфир отгоняют, остаток сушат в течение 15 мин в сушильном шкафу при температуре 105 ° С и взвешивают;

Ø   количество обезжиренного сухого остатка определяют путем вычитания количества жирных масел из общего содержания сухого остатка;

Ø   определения содержания нерастворимого в воде осадка в Экстрагированные остатка настоек и эссенций, приготовленных по § 1-3:     25 0 г эссенции выпаривают на водяной бане и непродолжительном времени сушат в сушильном шкафу при температуре 105 ° С. После охлаждения остаток разбавляют водой, растирают и фильтруют через точно взвешенный фильтр и промывают водой. Затем фильтр высушивают и взвешивают.

Содержание нерастворимого осадка вычисляют относительно 100 частей экстрагированного остатка настоек и эссенций;

Ø   определения содержания этилового спирта:

а) по плотности отгона: в круглодонную колбу вместимостью 200-250 мл отмеривают точное количество жидкости (если жидкость содержит от 20 до 50% спирта – 50 мл, от 50% и выше – 25 мл жидкость перед перегонкой разбавляют водой до 75 мл) .

Для равномерного кипения в колбу с жидкостью помещают капилляры, пемзу или кусочки прокаленной фарфора. Если жидкость при перегонке сильно пенится, то добавляют фосфорную или серную кислоту (2-3 мл), хлорид кальция, парафин или воск (2-3 г).

Приемник (мерную колбу вместимостью 50 мл) помещают в сосуд с холодной водой, собирают около 48 мл отгона, доводят его температуру до 20 ° С и добавляют воду до метки. Отгон должен быть прозрачным или слегка мутноватым.

Плотность отгона определяют пикнометра и по алкоголеметричним таблицах находят соответствующий содержание спирта в процентах по объему и массе.

Содержание спирта в препарате X (% по объему) вычисляют по формуле

где:          50 – объем отгона, мл;

а    – Содержание спирта,% по объему;

b    – Объем исследуемого препарата, взятый для отгона, мл.

При содержании в жидкости эфирных масел, летучих кислот или оснований, камфоры к ней добавляют в делительной воронке равный объем насыщенного раствора натрия хлорида и такой же объем петролейного эфира. Смесь взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев спирто-водный слой сливают в другую делительную воронку и обрабатывают таким же образом половинным количеством петролейного эфира. Спирто-водный слой сливают в колбу для отгона, а соединенные эфирные жидкости взбалтывают с половинным количеством насыщенного раствора натрия хлорида, затем присоединяют к жидкости, находящейся в колбе для отгона.

При содержании летучих кислот их нейтрализуют раствором щелочи, при содержании летучих оснований – фосфорной или серной кислотой;

б) по температуре кипения настоек: прибор для количественного определения спирта в настойках состоит из сосуда для кипячения 1, трубки 2 с боковым отростком, холодильника 3, ртутного термометра 4 с ценой деления 0,1 ° С и пределом шкалы от 50 до 100 ° С.

В сосуд для кипячения наливают 40 мл настойки и для равномерного кипения помещают капилляры, пемзу или кусочки прокаленной фарфора. Термометр помещают в приборе таким образом, чтобы ртутный шарик выступала над уровнем жидкости на 2-3 мм.

Нагревают на сетке с помощью электроплитки мощностью 200 Вт или газовой горелки. Когда жидкость в колбе начнет закипать, с помощью реостата в два раза уменьшают напряжение, подаваемое на плитку. Через 5 мин после начала кипения, когда температура становится постоянной или ее отклонение не превышает ± 0,1 ° С, снимают показания термометра. Полученный результат приводят к нормальному давлению. Если показания барометра отличаются от 1011 гПа (760 мм рт. Ст.), Вносят поправку на разницу между наблюдаемым и нормальным давлением 0,04 ° С на 1,3 гПа (1 мм рт. Ст.). При давлении ниже 1011 гПа исправления добавляют до установленной температуры, при давлении выше 1011 гПа – отнимают.

Содержание спирта в настойке определяют с помощью табл ..

Пример. Температура кипения настойки пустырника 80,9 ° С, атмосферное давление 1000 гПа (752 мм рт. Ст.), Разница давлений 1011 – 1000 = 11 гПа (760 – 752 = 8 мм рт. Ст.). Исправление составляет: 0,04 • 8 = 0,32 ° С. К найденной температуры кипения   добавляют исправления: 80,9 + 0,32 = 81,22 ° С. По табл. этой температуре кипения соответствует 66% спирта.

Таблица 16. Определение концентрации спирта в спирто-водных смесях по температуре кипения при давлении 1011 гПа (760 мм рт. Ст.)

в) по показателю преломления жидкостей: в водных растворах этилового спирта линейная зависимость показателя преломления и концентрации наблюдается в пределах до 50-60%. При установлении крепости спирта в более концентрированных растворах надо их предварительно разбавить и при расчетах концентрации учитывать разведения.

Таблица 17. Показатели преломления спирто-водных растворов, концентрация которых выражена в% по объеме

При определении показателя преломления спирто-водных растворов надо на призму рефрактометра наносить менее 5-7 капель и измерять величину nнемедленно во избежание ошибки, связанной с летучестью спирта. Исследования необходимо проводить при температуре 20 ° С. Если оно осуществляется не при 20 ° С, следует вносить поправку на температуру. Величины поправок показателя преломления на 1 ° С представлены в табл. Если определение проводится при температуре выше 20 ° С, то исправление добавляют к найденной величины показателя преломления; если анализ проводится при температуре ниже 20 ° С, исправления отнимают.

Пример. Анализу подвергался 40% – спиртовой раствор. Определение показателя преломления проводили при 23 ° С. Показания рефрактометра – 1,3541.Согласно табл. поправку на 1 ° С для показателя преломления, близкого по величине к полученному (1,35500), равна 2,4 · 10 ^-4 (т.е. 0,00024). Поскольку исследование проводилось при 23 ° С, то поправка будет составлять 0,00024 • 3 = 0,00072. Показатель преломления, приведенный к 20 ° С, равна 1,3541 + 0,00072 =   1,35482.

По табл. определяют соответствующий данному показателю преломления концентрацию спирта. Найденной величины показателя преломления (1,35482) в таблице нет; близкой по величине показателю преломления 1,35500 соответствует 40% спирт. Необходимо определить, какая концентрация спирта соответствует разнице показателей преломления: +1,35500 – +1,35482 = 0,00018. Исправление на 1% спирта равна 4,0 · 10 ^-4. Итак,    Таким чином, дійсний вміст спирту в досліджуваному розчині 40 — 0,45 = 39,55 %.

Для визначення концентрації етилового спирту в спиртових розчинах лікарських препаратів, приготовлених на 70 % спирті, розведення проводять звичайно 1:2, а приготовлених на 90 і 95 %   спирті – 1:3. При цьому необхідно враховувати, що при змішуванні спирту з водою обсяг розчину трохи зменшується, у зв’язку із чим варто вносити виправлення до фактора розведення: при змішуванні 1 мол спирту з 2 мол води множать на коефіцієнт 2,98 (замість 3); при змішуванні 1 мол спирту з 3 мол води – на 3,93 (замість 4).

Приклад . Аналізували настойку барбарису, приготовлену по § 4 на 70 % спирті; визначення проводили при 20°С. За показниками рефрактометра= 1,34555. В табл. дана величина показника переломлення відсутня, найбільш близьким значенням є 1,34573, що відповідає 23 % концентрації спирту. Різниця показників переломлення становить: 1,34573 – 1,34555 = 0,00018. Виправлення на 1 % спирту по табл. дорівнює 6,1·10-4, отже, різниці   показань відповідає концентрація спирту    Тому що перед визначенням настойку розводили 1:2, істинна концентрація становить (23 — 0,295) -2,98 = 67,66 %.

г) по щільності рідини, визначеної за допомогою ареометра : по алкоголеметричених таблицях ДФ знаходять відповідний вміст спирту в % по масі й по обсязі;

Ø   визначення вмісту важких металів: у порцеляновій чашці випарюють досуха 5 мл рідкого досліджуваного препарату, потім залишок обережно спалюють у присутності сірчаної кислоти й прожарюють. Отриманий залишок обробляють при нагріванні 5 мл насиченого розчину амонію ацетату, фільтрують через беззольний фільтр і доводять до мітки 100 мл. 10 мл отриманого розчину повинні витримувати випробування на важкі метали (не більше 0,001 %).

Контроль якості порошкових розтирань (тритурацій) проводять по наступних параметрах:

Ø   рівномірність розподілу лікарських речовин: порошки розглядають на відстанні 20—25 см за допомогою лупи або мікроскопа з окулярним мікрометром у прямому світлі: лікарська речовина повинне бути рівномірно розподілена в молочному цукрі;

Ø   відповідність фарбування, смаку, запаху: у низьких розведеннях у пофарбованих, сильно пахучих і вихідних речовин, що мають різкий смак можна помітити відповідне фарбування й відчути своєрідний запах або смак;

Ø   однорідність: основна маса готової тритурації повинна складатися із часток розміром 25 мкм і менш, не повинно бути часток розміром більше 50 мкм;

Ø   величина зовнішньої питомої поверхні тритурації повинна бути не менш 0,65 м ² /г, а молочного цукру – не менш 0,50 м ² /г;

Ø   розмір часток металевих і вугільних розтирань: на предметне скло наносять 0,02–0,03 г відповідного розтирання, додають 1–2 краплі води й викликають розчинення молочного цукру помірним нагріванням; потім (при не дуже високій температурі) розчин випарюють настільки, щоб залишився в’язкий, оліфоподібний залишок, що накривають покривним склом. Препарат розглядають під мікроскопом при збільшенні в 200 разів, а величину непрозорих металевих часточок визначають за допомогою окулярного мікрометра;

Ø   капілярний аналіз: розтирання беруть у кількості 5 г, змішують приблизно з подвійною ваговою кількістю абсолютного етилового спирту й отриману суміш піддають капілярному аналізу як рідке розведення;

Ø   перекристалізація насичених розчинів: зважену пробу речовини поміщають у мірну колбу з певною кількістю води, різним для кожної речовини, а колбу покривають невеликим кристалізатором. Розчинення досягають нагріванням закритої колби в киплячій воді або на відкритому полум’ї, потім повільно прохолоджують на повітрі.

А. З речовинами, пересичені розчини яких повністю кристалізуються при зіткненні з ізоморфним кристалом , надходять у такий спосіб: невеликою піпеткою обережно беруть трохи краплі пересиченого розчину й поміщають по однієї на скляну пластинку, потім невеликим, попередньо прожареним, а потім повністю охолодженим платиновим шпателем беруть невелику пробу (приблизно завбільшки зі шпилькову голівку) розтирання, що підлягає випробуванню, і поміщають неї в одну із крапель пересиченого розчину, що перебуває на скляній пластинці. Якщо в пробі був хоч один ізоморфний кристал, то порівняно швидко відбувається кристалізація всієї краплі, у результаті чого утвориться груба кристалічна поверхня й одночасно губиться її прозорість. Прикладом цього класу речовин є натрію ацетат і сегнетова сіль.

Б. З речовинами, пересичені розчини яких, стикаючись із ізоморфним кристалом, збільшують його, а самі при цьому не кристалізуються , надходять так: за допомогою піпетки беруть трохи миллилитров пересиченого розчину й обережно, щоб не змочити край і верхню поверхню стінки, поміщають у маленьку пробірку, що закриває гумовою пробкою. За допомогою маленького, попередньо прожареного й повністю охолодженого платинового шпателя додають до розчину невелику пробу досліджуваного розтирання, пробірку закривають гумовою пробкою, обережно перекидають і залишають у похилому положенні на кілька годин. Якщо в пробі були мікроскопічні ізоморфні кристали, то через кілька годин на нижній стінці можна помітити деяку кількість вирослих кристалів або друз різної величини. Прикладом цього класу речовин є бура й міді сульфат.

Примітка: у розтирань речовин, які в пересичених розчинах можуть викликати явище перекристалізації, цей метод можна використати для перевірки готування ліки відповідно до пропису, тому що явище перекристалізації спостерігається й при високих розведеннях, наприклад таких, як з п’ятого до дев’ятого десяткові розтирання.

Аналітичний контроль якості основних гомеопатичних препаратів по діючих речовинах проводять різними методами в залежності як від природи вихідних речовин, так і від того,   чи є вони фармакопейними або нефармакопейними препаратами.

Фармакопейні алопатичні препарати, які застосовуються й у гомеопатії, аналізують на дійсність і кількісний зміст по методиках фармакопейних видань. Як приклади можна привести деякі хімічні сполуки, застосовувані для готування розчинів або порошкових розтирань.

Меді сульфат CuS04 • 5Н20

Достовірність:

реакція із залізом металевим (проба на Си2+); реакція з аміаком (проба на Си2+); реакція з барії нітратом (проба на SO2″).

Кількісне визначення:

субстанція — йодометричне визначення;

тритурації, дилюции до ХЗ — йодометричне визначення;

фотоколориметрически з аміаком — до Х4.

Калія карбонат К2С03

Достовірність:

реакція з винною кислотою (проба на К+); реакція з хлороводородной кислотою (проба на С0 ~).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра; пряма потенціометрія.

Натрію карбонат Na2C03

Достовірність:

реакція з цинкуранил ацетатом (проба на Na+); реакція з хлороводородной кислотою (проба на СО ~).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра, пряма потенціометрія.

Бура, натрію тетраборат Na2B407 • ЮН20

Достовірність:

реакція утворення борноэтилового ефіру.

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра; пряма потенціометрія.

Натрію гідрокарбонат NaHC03

Достовірність:

реакція з цинкуранил ацетатом (проба на Na+); реакція з хлороводородной кислотою (проба на СО*-); реакція з магнію сульфатом (проба на НСО~).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра; пряма потенціометрія.

Натрію хлорид NaCl

Достовірність:

реакція з цинкуранил ацетатом (проба на Na+); реакція з срібла нітратом (проба на С1-).

Кількісне визначення:

субстанція — аргентометрическое визначення по Мору; тритурації, дилюции до ХЗ — аргентометрическое титрування; титрування потенціометра; пряма потенціометрія.

Магнію сульфат MgS04 • 7Н20

Достовірність:

реакція з натрію гидрофосфатом в аміачному буфері (проба на Mg2+);

реакція з барії нітратом (проба на SO2-).

Кількісне визначення:

субстанція — комплексонометричне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — аналогічно субстанції.

Кислота хлороводородная НС1

Достовірність:

визначення рН (проба на Н+);

реакція з срібла нітратом (проба на С1~).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра.

Кислота оцетова СН3СООН

Достовірність:

визначення рН (проба на Н+);

реакція із спиртом етиловим (проба на ацетат-іон).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра; пряма потенціометрія.

Залоза сульфат FeS04 • Н20

Достовірність:

реакція з калія гексацианоферратом (III)

K3[Fe(CN) 6] (проба на Fe2+);

реакція з барії нітратом (проба на SO2-).

Кількісне визначення:

субстанція — перманганометрическое титрування; тритурації, дилюции до ХЗ — аналогічно субстанції.

Срібло нітрат AgN03

Достовірність:

реакція з хлороводородной кислотою (проба на Ag+).

Кількісне визначення:

субстанція — пряме тиоцианатометрическое титрування по Фольгарду; тритурації, дилюции до ХЗ — пряме тиоцианатометрическое титрування по Фольгарду; пряма іонометрія.

Залізо металеве Fe

Здобуття:

відновлення воднем із заліза (II) оксиду

Достовірність:

розчинення в сірчаній кислоті і реакція на Fe2+ дією калія гексацианоферрата (III) K3[Fe(CN) 6.

Кількісне визначення:

субстанція — розчинення в сірчаній кислоті, потім перманганометрическое титрування; тритурації до ХЗ — аналогічно субстанції.

Якщо препарат не є фармакопейным, то в якості субстанцій використовують хімічні реактиви квалификации не менше «ч. д. а.». Їх якість повинна соответствовать Госту на даний хімічний реактив і подтверждаться стандартними методиками.

Для прикладу приведемо деякі препарати.

Цинк Zn марки «ч. д. а.»

або отриманий електролізом розчину цинку сульфату.

Достовірність:

розчинення без залишку в хлороводородной кислоті.

Кількісне визначення:

субстанція — комплексонометричне титрування; тритурації до ХЗ — комплексонометричне титрування; фотоколориметрически з дитизоном — до Х5.

Срібло Ag

Достовірність:

розчинення без залишку в азотній кислоті.

Кількісне визначення:

субстанція — розчинення в азотній кислоті

потім пряме тиоцианатометрическое титрування по Фольгарду;

тритурації до ХЗ — аналогічно субстанції.

Свинець РЬ

Достовірність:

розчинення без залишку в азотній кислоті.

Кількісне визначення:

субстанція — розчинення в азотній кислоті, потім комплексонометричне титрування; тритурації до ХЗ — аналогічно субстанції.

Кислота азотна HN03

Достовірність:

визначення рН (проба на Н+);

реакція із заліза сульфатом і сірчаною кислотою (проба на NO3-) або реакція з дифеніламіном (проба на NO3-).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра.

Достовірність:

визначення рН (проба на Н+);

реакція з барії нітратом (проба на SO*-).

Кількісне визначення:

субстанція — кислотно-основне титрування; дилюции до ХЗ — кислотно-основне титрування; титрування потенціометра.

В разі відсутності відповідних хімічних реактивов субстанції отримують особливими (спеціальними) методами.

Кальциум карбоникум, кальцію карбонат СаС03

Здобуття:

білосніжні внутрішні лускаті шматочки розбитих раковин перетворюють на дрібний порошок.

Достовірність:

розчинення в азотній кислоті і реакція з молібденовокислим амонієм (проба на Са2+).

Кількісне визначення:

субстанція, тритурації — не стандартизуются.

Алюміна, обпалений глинозем А1203

Здобуття:

з кріоліту або з розчину алюминиево-калиевых квасцов під дією аміаку.

Достовірність:

лужне плавлення, потім реакція з алізарином (проба на А13+).

Кількісне визначення:

субстанція, тритурації — не стандартизуются.

Калія арсеніт KAs02 • HAs02 • Н20

Здобуття:

реакція миш’яковистого ангідриду з калія карбонатом.

Достовірність:

реакція з сірководнем;

реакція з срібла нітратом (проби на AsO~).

Кількісне визначення:

субстанція — иодометрически;

броматометрически;

тритурації до ХЗ — иодометрически.

Хлористе золото, тетрахлороаурат (III) водню H[AuClJ • Н20

Здобуття:

розчинення золота в «царській горілці» (суміші хлороводородной і азотною кислот)

Достовірність:

реакція з молочним цукром і розчином формальдегіду (проба на Аї3+).

Кількісне визначення:

субстанція, дилюции до Хб — фотоколориметрически з толуидиновым реактивом.

Контроль якості базисних гомеопатичних препаратів з рослинної сировини (есенції, настойки) з метою їхньої подальшої стандартизації рекомендується також проводити по вмісту БАР. Для цього використають:

Ø   якісні реакції на основні групи БАР;

Ø   хроматографічний аналіз у різних системах розчинників;

Ø   кількісне визначення інструментальними (газорідинна хроматографія, УФ- і ІЧ-спектрофотометрія, фотоколориметрія) і іншими методами.

Широко розповсюдженими в рослинній сировині класами сполук є: алкалоїди, кардіостероїдні (серцеві) глікозиди, флавоноїди, сапоніни, дубильні речовини, антраценпохідні, кумарини, вітаміни, полісахариди й ін. Для виявлення основних груп БАР у рослинній сировині й препаратах найбільше часто використовують кольорові якісні реакції або реакції осадження.

Алкалоїди , виявляють наступними загальними осадовими реакціями:

–              з реактивом Майера (розчини ртуті дихлориду й калію йодиду) – бурий осад;

–              з реактивами Вагнера й Бушарда (розчини йоду в розчині калію йодиду) – бурий осад;

–              з реактивом Драгендорфа (розчин вісмуту нітрату основного, калію йодиду й кислоти оцтової) – оранжево-червоний або цегляно-червоний осад;

–              з реактивом Марме (розчин кадмію йодиду й кадмію йодиду) – білий або жовтуватий осад;

–              з реактивом Зонненшейна (розчин фосфорно-молібденової кислоти) – жовтуватий осад;

–              з розчином кремнієвовольфрамової кислоти – білуватий осад;

–              з розчином пікринової кислоти – жовтий осад;

–              з розчином таніну – білуватий або жовтуватий осад.

При визначенні кардіостероїдів   проводяться кольорові реакції на різні фрагменти молекули:

на стероїдну частину молекули карденолида:

–              реакція Лібермана-Бурхарда (крижана оцтова кислота, оцтовий ангідрид і концентрована сірчана кислота) – на границі шарів фарбування від рожевої до зеленої й синьої;

–              реакція Розенгейма (спиртовий розчин трихлороцтової кислоти) – фарбування від рожевого до лілового й синього;

на бутенолідне (лактоне) кільце:

–              реакція Раймонда (бензольний розчин м-динітробензолу й спиртової розчин калію гідроксида);

–              реакція Легаля (розчини натрію нітропрусида й натрію гідроксида) – на границі шарів спостерігається червоне фарбування у вигляді кільця;

на цукровий компонент:

–              реакція Келлер-Кіліани (крижана оцтова кислота зі слідами заліза сульфату й концентрована сірчана кислота) – верхній шар офарблюється у синій колір;

–              реакція з реактивом Фелінга – жовтогарячий осад після гідролізу.

Остання із зазначених реакцій використається також для визначення відновлюючих цукрів.

Наличие флавоноидов установлюють за допомогою таких реакцій:

–              ціанідинова проба (порошок металевого магнію й концентрована хлоридна кислота) – флавони, флавоноли й флавонони дають червоне або жовтогаряче фарбування;

–              борно-лимонна реакція – 5-оксифлавони й 5-оксифлавоноли утворять яскраво-жовте фарбування з жовто-зеленою флуоресценцією;

–             

реакція із трьоххлористою сурмою – 5-оксифлавони й 5-оксифлавоноли дають жовте або червоне фарбування;

–              реакції з розчином аміаку або спирто-водним розчином натрію (калію) гідроксида – флавони, флавоноли, флавонони й флавононоли утворять жовте фарбування, при нагріванні перехідне в жовтогаряче або червоне; халкони й аурони дають відразу червоне або пурпурне фарбування;

–              реакція із хлоридом окисного заліза – при наявності поліфенолів з’являється зеленувато-синє фарбування;

–              реакція з розчином ваніліну в концентрованої хлоридній кислоті – катехіни дають червоно-малинове фарбування;

–              реакція із свинцю ацетатом – флавони, халкони, аурони, що містять вільні ортогідроксильні угруповання в кільці В, утворять осади, пофарбовані в яскраво-жовтий і червоний кольори.

Для виявлення сапонінів і встановлення їхньої хімічної природи використаються наступні реакції:

–              проба на піноутворення (у присутності кислоти й лугу) – рівна по об’єму й стійкості піна утвориться в обох пробірках при наявності тритерпенових сапонінів; у випадку вмісту сапонінів стероїдної природи в лужному середовищі утвориться піна в кілька разів більше по об’єму й стійкості;

–              реакція зі спиртовим розчином холестерину – обидві групи сапонінів утворять осади;

–              реакція з баритовою водою – обидві групи сапонінів дають осади;

–              реакція з розчинами свинцю ацетату – тритерпенові сапоніни осаджуються середнім свинцю ацетатом, а стероїдні – основним;

–              реакція Лібермана-Бурхарда – стероїдні сапоніни (як і серцеві глікозиди) дають фарбування від рожевого до зеленого й синього;

–              реакція Лафона (розчин міді сульфату й концентрована сірчана кислота) – при нагріванні з’являється синьо-зелене фарбування;

–              реакція Сальковского (хлороформ і концентрована сірчана кислота) – спостерігається появу фарбування від жовтого до червоного;

–              реакція з пятихлористой сурмою (хлороформний розчин) – з’являється червоне фарбування, що переходить у фіолетове;

–              реакція з розчином натрію нітрату (у присутності концентрованої сірчаної кислоти) – яскраво-червоне фарбування;

–              реакція з ваніліном (спиртовий розчин) і концентрованою сірчаною кислотою – з’являється червоне фарбування, при розведенні водою тритерпеноїди утворять сині пластівці.

Наявність кумаринів можна виявити за допомогою:

–              реакції з лугом і діазотованою сульфаніловою кислотою – при нагріванні з розчином калію гідроксиду розчин жовтіє, а після додавання диазотованої сульфанілової кислоти фарбування змінюється від коричнево-червоного до вишневих кольорів;

–              лактонової проби – після нагрівання препарату із спиртовим розчином калію гідроксиду, розведення водою очищеною й додаванням хлоридної кислоти помутніння або випадання осаду вказує на ймовірну наявність кумаринів.

Виявлення дубильних речовин проводять наступними якісними реакціями:

–              з розчином желатину – утворення каламуті;

–              з розчином хініну гідрохлориду – аморфний осад;

–              з розчинами залізо-амонієвих галунів або хлориду окисного заліза – з’являється фарбування чорно-синє – при наявності гідролізованих дубильних речовин, чорно-зелене – у присутності конденсованих;

–              з бромною водою – при наявності конденсованих дубильних речовин відразу утвориться осад;

–              з розчином середньої солі свинцю ацетату в оцтовокислому середовищі – осад випадає при наявності гідролізованих дубильних речовин; при додаванні до фільтрату розчину залізо-амонієвих галунів і кристалічного натрію ацетату в присутності конденсованих дубильних речовин з’являється чорно-зелене фарбування;

–              з кристалічним натрію нітратом у присутності хлоридної кислоти – при наявності гідролізованих дубильних речовин з’являється коричневе фарбування.

Для хроматографического аналізу алкалоїдів використають наступні системи.розчинників:

a)        для хроматографії на папері: н-бутанол — оцтова кислота — вода (5:1:4); етилацетат – оцтова кислота — вода (11:21:85); н -бутанол, насичений водою — крижана оцтова кислота (100:5) і ін.;

b)       для тонкошарової хроматографії: хлороформ – ацетон – диетиламін (5:4:1); хлороформ – диетиламін (9:1); хлороформ – метанол – оцтова кислота (18:1:1); хлороформ – етанол (9:1 або 8:2); ацетон – розчин аміаку (95:5).

Проявниками для хроматограм служать реактив Драгендорфа, пари йоду, хлороформний розчин сурми трихлориду.

Виявлення кардіотонічних (серцевих) глікозидів методами ТШХ і хроматографії на папері проводять у системах: хлороформ – ацетон – вода (84:15:0,7); хлороформ – бензол – н -бутанол (78:12:5); етилацетат – бензол – вода (84:16:50); бензол – хлороформ (9:1, 7:5 або 3:7).

Для прояву хроматограм використовують реактиви Раймонда (розчини м-динітробензолу й калію гідроксиду спиртового) або Йенсена (25 % хлороформний розчин трихлороцтової кислоти).

Для виявлення флавоноїдів методом хроматографії на папері й у тонкому шарі сорбенту рекомендуються наступні системи розчинників: 15 % оцтова кислота; н -бутанол — оцтова кислота — вода (4:1:2); етилацетат — мурашина кислота — вода (70:15:17 або 10:2:3); метанол — оцтова кислота — вода (18:1:1) і ін.

Як проявники використають: 1 % спиртовий розчин алюмінію хлориду, 10 % спиртовий розчин натрію (калію) гідрооксиду, пари аміаку в УФ-світлі й т.д.

Дубильні речовини методом ТШХ найчастіше аналізують у системі: н -бутанол — оцтова кислота — вода (40:12:28) і обробляють 1 %-ним розчином ваніліну в концентрованої хлоридної кислоти

Хроматографування сапонінів у тонкому шарі сорбенту проводять у системах: бензол — метанол (8:2); хлороформ — метанол — вода (61:32:7); ізопропанол — вода — хлороформ (30:10:5); хлороформ — метанол (3:1); н-бутанол — етанол — 25 % розчин аміаку (7:2:5) і ін.

Прояв хроматограм проводять відповідно парами йоду, 20 % розчином сірчаної кислоти й 10 % спиртовим розчином фосфорно-вольфрамової кислоти.

Для аналізу кумаринів пропонують такі системи розчинників:

a)        для хроматографії на папері: петролейний ефір – бензол – метанол (5:4:1);

b)       у тонкому шарі: бензол – етилацетат (2:1); ацетон – гексан (2:8); гексан – бензол – метанол (5:4:1).

Обробку хроматограм проводять 10 % розчином калію гідроксиду й діазотованою сульфаніловою кислотою.

Крім того, методами хроматографії виявляють такі класи хімічних сполук:

каротиноїди — системи: хлороформ — ацетон (9:1); бензол — метанол (1:1) і ін.; реактиви для прояву хроматограм — 10 % спиртовий розчин фосфорно-молібденової кислоти, пари йоду;

антраценпохідні — системи: етилацетат — мурашина кислота — вода (10:2:3), етилацетат — метанол — вода (100:17:13); реактив для прояву хроматограм — 5 % спиртовий розчин калію (натрію) гідроксиду;

амінокислоти — системи: бутанол — оцтова кислота — вода (4:1:1), етанол — вода (95:5), ізопропанол — аміак — вода (10:1:1), ізопропанол — оцтова кислота — вода (7:2:1), н-бутанол — мурашина кислота — вода (75:15:10); реактив для прояву хроматограм — 0,2 % спиртовий або бутанольний розчин нінгідрин.

Приклади хроматограм у тонкому шарі й на папері наведені на мал.

Р и с. 17. Схеми хроматографії флавоноїдів:

а – кругова паперова хроматографія: 1-есенція туї, 2-тинктура з есенції, 3-тинктура зі свіжої сировини, 4-тинктура із сухої сировини, 5-розведення Х2 з тинктури (з есенції), 6-розведення ХЗ із тинктури (зі свіжої сировини), 7-розведення ХЗ (тинктура із сухої сировини), 8-гранули ХЗ (тинктура зі свіжої сировини); б – хроматографія в тонкому шарі сорбенту: 1-есенція, 2-тинктура з есенції, 3-тинктура зі свіжої сировини, 4-тинктура із сухої сировини.

Система: 15 % оцтова кислота. Проявники: пари аміаку, спирто-водний розчин калію гідроксиду, УФ-світло

Кількісний зміст БАР у матричних настойках і інших базисних препаратах у статтях фармакопей закордонних країн вказується лише в рідких випадках, зокрема при аналізі настойок, що містять отрутні й сильнодіючі речовини (аконіт, строфант, чилібуха, ігнація, беладона й ін.).

У нормативні документи, призначені для гомеопатичної фармакопеї Російської Федерації, включені сучасні методи аналізу, що дозволяють здійснювати контроль якості гомеопатичних лікарських засобів з урахуванням змісту БАР.

Для цієї мети можна використати газорідинну хроматографію, спектрофотометрію, фотоколориметрію й інші інструментальні методи, у деяких випадках доцільно використати титриметричні методи аналізу.

ЗАГАЛЬНІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ ГОМЕОПАТИЧНИХ ЛІКАРСЬКИХ ПРЕПАРАТІВ

Нижче дані короткі вказівки по методиці дослідження гомеопатичних лікарських препаратів.

А. МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ РІДКИХ ПРЕПАРАТІВ

1. Питома вага

Питому вагу [Під питомою вагою мається на увазі відношення ваги тіла до ваги води в тому ж об’ємі при 4°.] рідин визначають на вагах Мору — Вестфаля, за допомогою пікнометра або ареометром. Визначення прийнято проводити при температурі 17,5° С. Еслі визначення проводиться при іншій температурі, то у величину питомої ваги вносять наступні поправки, досить точні значення, що дають, для спиртних рідин.

При температурах вище 17,5° З на кожен градус додають 0,0007, а при температурах нижче 17,5° З віднімають на кожен градус 0,0007.

При точному дотриманні правил приготування есенції по розпорядженнях окремих §§ питома вага основних настойок в середньому рівна:

по § 1 — 0,944

по § 2 — 0,944

по § 3 — 0,905.

2. Вміст винного спирту

Вміст винного спирту можна орієнтування визначити по питомій вазі основних настойок або винно-спиртних розчинів або розведень. Для точного визначення поміщають 50 мл досліджуваного препарату в колбу для перегонки, додають 100 мл води і 50 г куховарської солі або сульфату натрію (аби уникнути утворення піни при кип’яченні) і відганяють 100 мл

Визначають питому вагу дистиляту, а по таблиці спиртів вираховують вміст чистого винного спирту. Вміст спирту в препаратах, не створюючих рясної піни при кип’яченні, можна визначити способом, вказаним в Держ. фармакопеї.

 

3. Вміст екстракту

Вміст екстракту у вихідних настойках, сухого залишку в розчинах і так далі визначають таким чином: випаровують на водяній лазні точно виміряну і точно зважену (з врахуванням питомої ваги) кількість рідини, яка поміщена в заздалегідь зважену круглу скляну чашку діаметром 6—7 див. Потім сушать протягом півгодини в термостаті при 105° С.

Зважувати слід по можливості швидше, оскільки деякі екстракти дуже сильно поглинають воду і тому вагу їх збільшується на вагах протягом декількох хвилин. Також не слід сушити довше півгодини, оскільки при тривалій сушці при 105° З вага жиросодержащих сухих залишків знов зростає.

4. Жирні масла (рослинні)

Кількість жирних масел в основних настойках і розчинах визначають таким чином: залишок, отриманий при визначенні вмісту екстракту, змочується 1—2 мл води (інколи з підігріванням на водяній лазні), а потім розтирається до здобуття однорідного порошку з 10 г прожареного гіпсу. Масу поміщають в гільзу з фільтрувального паперу і закривають ватяним тампоном, який до цього служив для витирання скляної чашки. Потім гільзу поміщають в апарат Сокслета або в інший відповідний апарат для екстракції жирів і екстрагують протягом 2—3 годин злегка киплячим петролейным ефіром. Потім ефір відганяють, залишок сушать протягом 15 хвилин в сушильній шафі при температурі 105° і потім зважують.

5. Знежирені сухі речовини

Кількість знежиреного сухого залишку визначається шляхом віднімання кількості жирних масел із загального вмісту сухого залишку.

6. Вміст алкалоїдів

Вміст алкалоїдів в есенціях, тинктурах і сировині визначають різними способами. Правила визначення вмісту вказані в розділах, що стосуються відповідних лікарських засобів. Бюретка, використовувана для точних визначень, є, як вказано у фармакопеї, бюретку завдовжки близько 60 см, ємкістю 10 мл, з мінімальним діленням шкали, рівним 0,02 мл; під мікробюреткою розуміється бюретка завдовжки 50 см, ємкістю 5 мл, з мінімальним діленням шкали, рівним 0,01 мл

7. Нерозчинний у воді осад в залишку есенцій, приготованих по, що екстрагується §§ 1—3

25 г есенції випаровують на водяній лазні і нетривалий час сушать в сушильній шафі при температурі 105° С. Після охолоджування залишок розбавляють водою, розтирають і фільтрують через точно зважений фільтр і промивають водою. Потім фільтр висушують і зважують. Вміст нерозчинного осаду обчислюють по відношенню до 100 частин осаду тинктур, що екстрагується.

8. Вміст відновників в есенціях, приготованих по §§ 1—3, виражене еквівалентною кількістю глюкози

Доводять об’єм екстракту, отриманого при визначенні нерозчинного у воді осаду, до 100 мл, потім змішують 30 мл розчину сульфату міді (концентрації 69,2 г/литр) з 30 мл розчину гідрата калія і сегнетовой солі (з концентрацією відповідно 250 і 346 г/л). Суміш нагрівають до кипіння і додають 2,5 г вищезгаданого розбавленого екстракту. Після однократного кип’ячення рідину фільтрують через точно зважену азбестову або фарфорову фільтрувальну трубочку, потім фільтр промивають по черзі водою, винним спиртом і, нарешті, ефіром і протягом 15 хвилин витримують в сушильній шафі при температурі 105°С. Після охолоджування фільтрувальну трубочку зважують і по кількості обложеного окислу міді по таблиці (даною в додатку) обчислюють відповідну кількість глюкози. Цю величину множать на 16 і ділять на кількість екстракту (у г), що міститься в 100 частинах есенції. Якщо помножити отриману величину на 100, отримаємо безпосередньо % вміст відновника в екстракті, виражений через еквівалентну кількість глюкози. Якщо отримана кількість окислу міді перевищує 0,522 г, то вищезгаданий водний екстракт потрібно розбавити рівною за об’ємом кількістю води і з 25 мл цього розбавленого розчину ще раз провести визначення. Кількість глюкози, знайдена при цьому, слід умножати на 32, а не на 16.

9. Забарвлення есенцій, тинктур і рідких розведень

Цілий ряд препаратів, особливо тих, які приготовані зі свіжих рослин, при тривалому зберіганні змінюють своє забарвлення. Наприклад, часто спостерігається зміна зеленого забарвлення в коричневу, викликана в більшості випадків змінами хлорофілу. Крім того, може також змінитися інтенсивність забарвлення в різних пробах одного і того ж препарату, не дивлячись на рівний вміст лікарської речовини, що особливо помітно в найвищих розведеннях. Ці факти необхідно враховувати при оцінці приведених відомостей про забарвлення різних речовин. Забарвлення спостерігають при денному світлі, помістивши кювет перед шматком білого картону або писального паперу і розглядаючи шар рідини завтовшки 10 мм. У разі потреби можна застосовувати пробірки діаметром 10 мм. Якщо порівнюють забарвлення двох різних рідин, то для цієї мети можна застосувати будь-який колориметр.

10. Капілярний аналіз і капілярно-люмінесцентний аналіз есенцій, тинктур і розведень

Капілярний аналіз есенцій, настойок і рідких розведень проводять по методу “Плану”. З фільтрувального паперу [Можна рекомендувати користуватися спеціальним папером “для хроматографії”, яка випускається різних сортів: що швидко фільтрує, повільно фільтрує і ін.] одного сорту в напрямі, перпендикулярному текстурі паперу, нарізують смужки шириною 2 см і завдовжки приблизно 25 см і підвішують в циліндровій скляній судині заввишки близько 5 см і діаметром близько 3 см так, щоб кінці паперових смужок стосувалися дна судини. У судину, якщо не обумовлені інші умови проведення аналізу, поміщають зазвичай 5 мл досліджуваного розчину. Судину ставлять в помірно тепле приміщення і через 24 години або до моменту, коли вся рідина буде поглинена, виймають смужки, просушують і досліджують при денному світлі або ж в ультрафіолетовому світлі, що випромінюється кварцевою аналітичною лампою. При дослідженні вищих розведень замість широких капілярних смужок використовуються смужки шириною не більше 2,5 мм.

При роботі з розтираннями або роздробленими пігулками такі беруть в кількості 5 г, змішують приблизно з подвійною ваговою кількістю абсолютного винного спирту і отриману суміш піддають капілярному аналізу як розведення.

Методика дослідження препаратів в крупинках за допомогою описаного тут методу вказується для кожного препарату окремо.

При описі капілярної картини користуються діленням на 2 частини:

1. Верхня частина, що складається з водної зони і часто зони у вигляді опуклості або еліптичної виїмки.

2. Нижня частина, більшою частиною що складається з декількох зон, забарвлених в різні кольори, і підстави.

При спостереженні люмінесценції рідини, досліджуваної методом капілярного аналізу, найдоцільніше виявилося наступне розділення — на:

1. Верхню частину, яка складається з вузької самої верхньої зони, потім власне верхньої частини і підстави верхньої частини, ясно спостережуваного при люмінесценції цілого ряду препаратів.

2. Нижню частину, яка складається з опуклої частини, або зведення, смуги, що складається з декількох зон, і підстави. Смуга може займати всю нижню частину або лише опуклу зону.

Дані капілярного аналізу спостерігають при світлі аналітичної лампи зазвичай після просушування, оскільки при цьому якнайповніше виявляється характерна люмінесценція. При спостереженні капілярних картин в ультрафіолетовому світлі для того, щоб уникнути помилок, необхідно звертати увагу на наступне: як при денному світлі, так і при освітленні лампою спостереження потрібно завжди проводити на однаковому фоні, краще всього білому, по можливості не люмінесцентному. Крім того, треба знати, що і від фільтрувального паперу з’являється, як правило, блідо-голуба або синьо-фіолетова люмінесценція, а також, що різні речовини, як, наприклад, молочний і очеретяний цукор, мають часто власну люмінесценцію блакитного кольору, яка може виявлятися також при дослідженні винно-спиртного екстракту і утрудняти визначення речовини. Винний спирт також має злегка блакитну люмінесценцію. Далі, потрібно стежити за тим, аби в неодружених проб з водою, що дистилює, на верхньому кінці капілярних картин завжди з’являлася вузька зона, забарвлена в коричневий колір. У ультрафіолетовому випромінюванні вона світиться яскраво-синім світлом. В цілях точнішого дослідження препарат потрібно обробити відповідними реактивами, після чого можна спостерігати характерні зміни забарвлення при денному, а особливо при ультрафіолетовому світлі. Рекомендується рясно наносити розчин на всі зони скляною паличкою або краплинною піпеткою і висушування проводити при злегка підвищеній температурі. У сумнівних випадках рекомендується проводити неодружену пробу на тій же смужці паперу, але вище за капілярну картину.

Якщо вживання реактивів недостатньо для доказу ідентичності, то можна використовувати описаний нижче метод (2-я капіляризація).

Досліджуваний фільтрувальний папір з капілярною картиною поміщають в пробірку, потім наливають (до верхнього кордону капілярної картини) відповідний розчинник, найчастіше хлороформ (аби перешкодити тому, аби верхня частина картини випадково не була б бар’єром для розчинника і речовин, що розчиняються в нім). Розчинник розчиняє ті, що все містяться в забарвленій ділянці фільтрувального паперу розчинні речовини і разом з ними піднімається по паперу. Потім ці речовини випаровуються і відкладаються в новій зоні, на верхньому краю пробірки.

Якщо ця “нова зона” виходить дуже слабкою, то досвід можна повторити з додатковою порцією розчинника, і отже, підвищити інтенсивність цієї зони. Якщо ця зона дуже темна, то можна знову нанести розчинник, розширити цим зону і таким чином просветлить її.

Нова більш менш широка зона має часто характерний колір і при денному світлі, і при ультрафіолетовому освітленні. У разі потреби її дослідження, як і капілярної картини, можна продовжувати різними методами. Розчини перевіряють на люмінесценцію безпосередньо; для цього 1—2 мл поміщають в пробірку діаметром близько 1,5 см і спостерігають в ультрафіолетовому світлі. До розчину додають декілька крапель хлористоводневої кислоти, аби виключити, особливо при високих розведеннях, перешкоди, що викликаються впливом наявного лугу.

ЗАГАЛЬНІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ РОЗТИРАНЬ

1. Відповідність розтирань необхідним властивостям краще всього визначити під лупою або під мікроскопом в прямому світлі. Лікарська речовина має бути рівномірно розподілена в молочному цукрі. В забарвлених, сильно пахучих і таких, що мають різкий смак вихідних речовин в низьких розведеннях можна відмітити відповідне забарвлення і відчути своєрідний запах або смак.

2; В розтирань речовин, які в пересичених розчинах можуть викликати явище перекристалізації, цей метод можна використовувати для перевірки приготування ліків згідно пропису, оскільки явище перекристалізації має місце і при високих розбавленнях, наприклад таких, як з 5 по 9 десяткових розтирань.

Приготування пересичених розчинів і проведення цих випробувань наступне:

Зважену пробу речовини поміщають в мірну колбу з певною кількістю води, різною для кожної речовини, а колбу покривають невеликим кристалізатором. Розчинення досягають тим, що ставлять закриту колбу в киплячу воду або нагрівають на відкритому полум’ї. Після повного розчинення колбу залишають на 10—15 хвилин в теплі, а потім повільно охолоджують на повітрі.

а) З речовинами, пересичені розчини яких повністю кристалізуються при зіткненні з ізоморфним кристалом, поступають таким чином. Невеликою піпеткою обережно беруть декілька крапель пересиченого розчину і поміщають по одній на скляну пластинку, потім невеликим, заздалегідь прожареним, а потім повністю охолодженим платиновим шпателем беруть невелику пробу (приблизно величиною з шпилькову голівку) розтирання, підмета випробуванню, і поміщають її в одну з крапель пересиченого розчину, що знаходиться на скляній пластинці. Якщо в пробі був хоч один ізоморфний кристал, то порівняно швидко відбувається кристалізації всієї краплі, внаслідок чого утворюється груба кристалічна поверхня і одночасно втрачається її прозорість. Прикладом цього класу речовин є ацетат натрію і сегнетова сіль.

б) Речовини, пересичені розчини яких, стикаючись з ізоморфним кристалом, збільшують його, а самі при цьому не кристалізуються.

За допомогою піпетки беруть декілька миллилитров пересиченого розчину і обережно, так, щоб не змочити край і верхню внутрішню поверхню стінки, поміщають в маленьку пробірку, що закривається гумовою пробкою. За допомогою маленького, заздалегідь прожареного і повністю охолодженого платинового шпателя додають до розчину невелику пробу досліджуваного розтирання, пробірку закривають гумовою пробкою, обережно перевертають і залишають в похилому положенні на декілька годинників. Якщо в пробі були мікроскопічно маленькі ізоморфні кристали, то через декілька годинників на нижній стінці можна відмітити деяку кількість кристалів, що виросли, або друз різної величини. Прикладом цього класу речовин є бура і сульфат міді.

3. Для визначення величини часток металевих і вугільних розтирань під мікроскопом готують мікроскопічні препарати цих розтирань таким чином.

На наочне скло (яке має бути безбарвним, відшліфованим і вільним від газових включень) наносять 0,02—0,03 г відповідного розтирання, додають 1—2 краплі води і викликають розчинення молочного цукру помірним нагріванням. Потім (при не дуже високій температурі) розчин випаровують настільки, аби залишився в’язкий, олифоподобный залишок. Його накривають покривним склом, і препарат розглядають під мікроскопом при збільшенні в 200 разів, а величину непрозорих металевих частинок визначають відомим способом за допомогою окулярного мікрометра.

Другий метод підготовки розтирань для мікродослідження полягає в наступному: 0,02—0,03 г речовини ретельно розтирають на наочному склі в одній краплі канадського бальзаму, потім видаляють з препарату бульбашки повітря слабким і обережним нагріванням і після цього, накривши препарат покривним склом, як вказано вище, досліджують його під мікроскопом.