ЗАНЯТТЯ № _________ (практичне)

Методична вказівка для студентів ІІ курсу

медичного факультету

 

ЗАНЯТТЯ № 9 (практичне 6 год)

 

Теми: 1.  Морфологія і ультраструктура вірусів.

           2.  Індикація вірусної репродукції.

           3. Серологічні реакції в вірусології.

 

Мета: Навчитись трактувати морфологію і ультраструктуру вірусів, аналізувати особливості взаємодії вірусів з живими системами, оцінювати результати розмноження вірусів в живих системах та методи культивування вірусів в лабораторних умовах.

 

Професійна орієнтація студентів: Вміння аналізувати біологічні властивості патогенних для людей вірусів, виявляти вірусну репродукцію, трактувати методи діагностики вірусних інфекцій, робити висновки за результатами досліджень, пояснювати роль вірусів в патології людини необхідні майбутньому спеціалісту-медику для використання в практичній діяльності.

 

Ввиконання практичної роботи: 9.00-12.00                                                                                            

І. Морфологія і ультраструктура вірусів. Культивування вірусів в курячому ембріоні та організмі лабораторних тварин.

Робота 1. Вивчити морфологію віріонів по мікрофотографіях, слайдах, малюнках.

Робота 2. Зараження курячих ембріонів в алантоїсну порожнину.

ІІ. Клітинні культури у вірусології. Культивування вірусів у клітинних культурах. Індикація в клітинних культурах.

Робота 3. Зараження культур клітин вірусовмісним матеріалом.

Робота 4. Ознайомитись з мікропрепаратами культур тканин, які уражено вірусами. Оцінити наявність ЦПД.

Робота 5. Розтин зараженого курячого ембріона, взяття алантоїсної рідини

Робота 6. Постановка РГА для серологічної ідентифікації вірусу грипу

ІІІ.  Серологічні реакції, які використовуються у вірусології.

Робота 7. Поставити РГГА для серологічної ідентифікації вірусу грипу

Робота 8. Поставити РГГА для серологічної діагностики грипу з парними

Робота 9. Поставити реакцію нейтралізації (РН) з парними сироватками для серологічної діагностики поліомієліту

Робота 10. Ознайомитись і провести облік результатів РЗК для серологічної діагностики кору

Робота 11. Ознайомитись з демонстраційним ІФА для діагностики СНІДу

 

Перерва 12.00-12.30

 

Програма самопідготовки студентів

І. Морфологія і ультраструктура вірусів. Культивування вірусів в курячому ембріоні та організмі лабораторних тварин.

1.                      Класифікація, будова, ультраструктура і хімічний склад вірусів.

а – основні принципи, покладені в основу класифікації вірусів, навести сучасну класифікацію;

б – будова віріонів, їх розміри, поняття про прості та складні віруси;

в – типи симетрії вірусів, форма вірусів;

г – хімічний склад вірусів.

2.                      Основні методи культивування вірусів:

а – зараження лабораторних тварин;

б – зараження курячих ембріонів;

ІІ.  Індикація вірусної репродукції.

3.                      Основні методи культивування вірусів:

а – класифікація культур тканин;

б – методи зараження культур тканин;

в – цитопатичний ефект.

4.                      Типи взаємодії вірусу і чутливої клітини.

5.                      Репродукція вірусів.

а – фази взаємодії вірусу і чутливої клітини;

б – особливості репродукції вірусів різних класів нуклеїнових кислот.

6.                      Методи індикації вірусів:

а – реакція гемаглютинації (компоненти, механізм, облік);

а – реакція гемадсорбції (компоненти, механізм, облік);

в – “кольорова проба” (компоненти, механізм, облік);

            г – ЦПД

      7.   Роль вірусів в еволюції.

ІІІ. Серологічні реакції в вірусології.

8.                      Реакція гальмування гемаглютинації. Компоненти і механізм реакції.

а – методика постановки та облік результатів;

б – практичне використання.

9.                      Реакція гальмування гемадсорбції. Компоненти і механізм реакції та облік результатів.

10.                  Реакція нейтралізації. Різновидності реакції в залежності від біологічної моделі репродукції вірусів.

а – компоненти і механізм реакції та облік результатів;

б – практичне використання.

11.                  Реакція непрямої гемаглютинації (РНГА) і оберненої непрямої гемаглютинації (РОНГА).

12.                  Реакція зв’язування комплементу (РЗК). Особливості постановки при діагностиці вірусних інфекцій.

13.                  Імуноферментний (ІФА), імунофлюоресцентний (РІФ) методи діагностики вірусних інфекцій.

14.                  Імуноблотинг. Ланцюгова полімеразна реакція.

 

Семінарське обговорення теоретичних питань: 12.30-14.00

                                                                                 

Перерва: 14.00-14.15

 

Самостійна робота студентів: 14.15-15.00

Розв’язування ситуаційних задач з кожної теми, розбір завдань тестових ліцензійних іспитів «Крок», оцінювання студентів, які не склали напередодні тестовий контроль за системою «Moodle», відпрацювання та прийом практичних навичок (матрикули).

.

 

Тестові завдання та ситуаційні задачі.

1.     Що таке віріон?

А – вірус, що проник в клітину

В – вірус, який репродукується в клітині

Е – зрілий вірус поза клітиною

D – вірусний геном в стані інтеграції з геномом клітини

C – вірус у курячому ембріоні.

2.     В основу класифікації вірусів покладено:

А – тип нуклеїнової кислоти

В – тип симетрії

С – молекулярна маса

D – господар

Е – всі названі ознаки.

3.     Дегенеративні зміни в культурі клітин при дії вірусів мають загальну назву:

А – цитотоксична дія

В – цитопатична дія

С – некротоксична дія

D – гістотоксична дія

Е – гемолітична дія

         4.   Для індикації вірусів у досліджуваному матеріалі використовують реакцію:

А – гемолізу

В – кільцепреципітації

С – латексаглютинації

D –  гемаглютинації

Е – коаглютинації.

5.     Для серологічної діагностики грипу використали РГГА. З цією метою від хворого взяли …, після послідовних … у кожну пробірку внесли … . Через 30 хв. У кожну пробірку додали … . Реакція вважалась достовірною, якщо … .

6.     Для ідентифікації невідомого вірусу поставили реакцію нейтралізації по типу кольорової проби. За якими критеріями визначити позитивний результат?

А – по наявності цитопатичного ефекту

В – по наявності гемолізу еритроцитів

С – по наявності рідини рожевого кольору у дослідних пробірках

D – по наявності рідини жовтого кольору у дослідних пробірках

Е – по наявності осаду еритроцитів на дні пробірки.

 

Вихідний рівень знань та вмінь

 

Студент повинен знати:

1.   Морфологію та ультраструктуру вірусів

2.   Методи культивування вірусів

3.   Методи індикації вірусів

4.   Особливості репродукції вірусних геномів

5.   серологічні реакції, які використовуються при діагностиці вірусних інфекцій.

 

Студент повинен вміти:

1.                      Проводити зараження курячих ембріонів та культур тканин вірусмісним матеріалом.

2.                      Поставити і проаналізувати:

а – реакцію гемаглютинації

б – реакцію гальмування гемаглютинації

в – реакцію нейтралізації по типу “кольорової проби”.

3.                      Пояснити механізм сучасних реакцій, які використовуються у вірусології: РІФ, ІФА, РІА, імуноблотинг, ЛПР.

 

 Вірні відповіді на тести і ситуаційні задачі:

1 – Е;  2 – Е;  3 – С;  4 – D;  5 – парні сироватки, розведень, вірусний діагностикум, 1% курячі еритроцити, відсутність гемаглютинації, осад у вигляді “монетки”, титр антитіл у другій сироватці зростає мінімум у 4 рази; 6 – D.

 

Джерела інформації:

 

Матеріали підготовки 09

А – Основні: 1. Пяткін К Д., Кривошеїн Ю.С. «Мікробіологія», Київ.: «Вища школа», 1992, С. 69-71, 183;

                     2. Климнюк С.І., Ситник І.О.,  Творко М.С.Широбоков В.П. «Практична мікробіологія», Тернопіль.: «Укрмедкнига», 2004, С. 321-335;

                     3. Ситник І.О., Климнюк С.І., Творко М.С. «Мікробіологія, вірусологія, імунологія», Тернопіль.: «Укрмедкнига», 1998, С. 82-90, 208-221

                      4. Медична мікробіологія вірусологія імунологія за ред.. акад. НАНУ В.П.Широбокова. – Вінниця. – «Нова книга». – 2011.

В – Додаткові: 1. «Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии и лабораторной диагностике инфекционных болезней» под ред. Ю.С. Кривошеина, Киев:. «Вища школа», 1986, С. 54-63, 191-221.

 

 

 

 Методичну вказівку склала доц. Ткачук Н.І.

Затверджено на засіданні кафедри

24.12.2012 р. протокол № 5

Переглянуто і затверджено на засіданні кафедри

 

24.09. 2013 р. Протокол №3